检验基础知识培训

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检验基础知识讲座
崔志刚
株式会社 日立高新技术
问 题:
1、检验科是做什么的? 工作流程如何?
2、生化仪的用途是什么? 3、生化仪分析的是什么?
检验科科室工作分布情况
临检室
生化室
免疫室
微生物室
血常规
肝功能
小便常规
肾功能
大便常规
血脂
脑脊液、体液常规
心肌酶谱
电解质
糖类
部分免疫项目
肝炎类 肿瘤标志物
肾炎类
R2:Tris缓冲液 L-丙氨酸 a-酮戊二酸
检验科科室工作流程(工作前准备)
使 用 双 试 剂的优点
扣除样本空白的影响(R1多为缓冲液,R2多为启动试剂)
去除内源性干扰物质(R1含与内源性干扰物质反应的物 质,R2为启动试剂)
使用方便,不易造成浪费
检验科科室工作流程(工作前准备)
使用双波长的优点
检验科科室工作流程(接收标本整理分类)
血 清/血浆 标 本 测 定 项 目
生化项目
1、肝功能:ALT、AST、TP、ALB、TBIL、DBIL、ALP、GGT、CHE、TBA、PA 2、肾功能:BUN、CRE、UA、CO2-CP 3、血脂:TCHO、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB、Lp(a) 4、心肌酶谱:AST、LDH、HBDH、CK、CK-MB、LDH-1 5、电解质:K、Na、Cl、Ca、Mg、P、Fe、Cu、Zn 6、免疫类:ASO、RF、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP 7、其他特殊项目:
AST (GPT)
丙氨酸氨基转移酶—谷丙转氨酶
LDH
乳酸脱氢酶
LDH-1
乳酸脱氢酶-1
CK
肌酸激酶
CK-MB
肌酸激酶同工酶MB
α-HBDH
α-羟丁酸脱氢酶
临床意义:用于诊断急、慢性心脏疾病。
注:同功酶是指同一种属酶分子结构组成不同能催化同一种化学反 应的一组酶,其物理、化学性质乃至生物学功能均可有所差异。由于分 子结构的差异,虽然催化同一种反应,但其底物专一性与亲和力,乃至 酶的动力学都可能存在差异,在代谢过程中的功能也有所不同。
吸光度
A1
A’ 1
λ1
主波长
A’ 2
A2
λ2
付波长
1、使用单波长λ1测定时, 待测物的吸光度A为: A=A1+A’1 2、使用双波长测定时,待 测物的吸光度A为: A=(A1+A’1)-(A2+A’2)
λ波长
—:待测物的吸收曲线;—:干扰物的吸收曲线
检验科科室工作流程(工作前准备)
使用双波长的优点
电 解 质和微量元素 生 化 项 目
K

Na

Cl

Ca

Mg

P

Fe

Cu

Zn

免疫类生化项目
IgG IgA IgM C3 C4 CRP(hsCRP)
免疫球蛋白G 免疫球蛋白A 免疫球蛋白M 补体Leabharlann Baidu3 补体C4 C-反应蛋白(超敏C-反应蛋白)
临床意义:用于诊断、监测感染、免疫性疾病和急 性炎症。
免疫项目 血液病检查项目 微生物项目
根据项目分类后,送各科室,各科室进行样本编号。
肝功能生化项目
ALT(GPT) AST(GOT) ALT/AST ALP(AKP) GGT(γ-GT) TBIL DBIL IDBIL TP ALB GLO A/G CHE TBA PA
液体试剂 + + 小 小 + + ++
干粉试剂 ++ 短 大 大
需要复溶 ++
易造成浪费
检验科科室工作流程(工作前准备)
单试剂与双试剂的比较
吸光度
吸光度
R2
S+R1
A’1 A1
A’1 A1 A’2
A2
时间 S+R1
时间
吸光度计算
单试剂
正常颜色
A=A1
本底颜色高
A=A'1
结果 受标本本底颜色影响,结果偏高
丙氨酸氨基转移酶—谷丙转氨酶 天门冬氨酸氨基转移酶—谷草转氨酶 谷丙/谷草 碱性磷酸酶—碱磷酶 γ-谷氨酰转肽酶—转肽酶 总胆红素 直接胆红素 间接胆红素 总蛋白 白蛋白 球蛋白 白球比值 胆碱酯酶 总胆汁酸 前白蛋白
为什么选用以下项目作为肝功能指标?
ALT(GPT) AST(GOT) ALT/AST ALP(AKP) GGT(γ-GT) TBIL DBIL IDBIL TP ALB GLO A/G CHE TBA PA
检查亚临床肝病 估计肝组织损害程度 观察黄疸性质和程度 判断肝病以便拟订治疗措施 检测肝病病程、评价疗效 估计病人能否接受某种治疗措施,如手术等 常规体检
肾功能生化项目
BUN/UREA CRE UA CO2-CP U-TP U-ALB
尿素氮/尿素 肌酐 尿酸 二氧化碳结合力 尿蛋白 尿白蛋白
标本分类
血清 血浆 尿液 脑脊液 体液(胸水、腹水)
末梢采血针
采血针分类:
静脉采血针
真空管采血管分类:
• 1. (普通血清管)- 红色头盖,采血管中不含添加剂,用于常规血清生化,血库和血清学相关检验。 2. (惰性分离胶促凝管)-金黄头盖,采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。标本离心后,惰性分离胶能够将血液中的液 体成分(血清或血浆)和固体成分(红细胞,白细胞,血小板,纤维蛋白等)彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障, 标本在48小时内保持稳定。促凝剂可快速激活凝血机制,加速凝血过程,适用于急诊血清生化试验。 3. (肝素抗凝管)-绿色头盖,采血管内添加有肝素。肝素直接具有抗凝血酶的作用,可延长标本凝血时间。适用于红细 胞脆性试验,血气分析,红细胞压积试验,血沉及普能生化测定,不适于做血凝试验。过量的肝素会引起白细胞的聚集, 不能用于白细胞计数。因其可使血片染色后背景呈淡蓝色,故也不适于白细胞分类。 4. (血浆分离管)-浅绿色头盖,在惰性分离胶管内加入肝素锂抗凝剂,可达到快速分离血浆的目的,是电解质检测的最 佳选择,也可用于常规血浆生化测定和ICU等急诊血浆生化检测。血浆标本可直接上机并在冷藏状态下保持48小时稳 定。 5. (EDTA抗凝管)-紫色头盖,乙二胺四乙酸(EDTA,分子量292)及其盐是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液标 本中钙离子,螯合钙或将钙反应位点移去将阻滞和终止内源性或外源性凝过程,从而防止血液标本凝固。适用于一般 血液学检验,不适用于凝血试验及血小板功能检查,亦不适用于钙离子,钾离子,钠离子,铁离子,碱性磷酸酶,肌酸 激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。 6. (枸橼酸钠凝血试验管)-浅蓝头盖,枸橼酸钠主要通过与血样中钙离子螯合而起抗凝作用。适用于凝血实验,国家临 订实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的抗凝剂浓度是3.2%或3.8%(相当于0.109mol/L或0.129mol/L),抗凝剂与血液 的比例为1:9。 7. (枸橼酸钠血沉试验管)-黑色头盖,血沉试验要求的枸橼酸钠浓度是3.2%(相当于0.109mol/L)抗凝剂与血液的比例 为1:4。 8. (草酸钾/氟化钠)-灰色头盖,氟化钠是一种弱效抗凝剂,一般常同草酸钾或乙碘酸钠合并使用,其比例为氟化钠1份, 草酸钾3份。此混合物4mg可使1ml血液在23天内不凝固和抑制糖分解,它是血糖测定的估良保存剂,不能用于尿素酶 法测定尿素,也不有用于碱性磷酸酶和淀粉酶的测定,推荐用于血糖检测。(目前树兰不使用)
糖类生化项目
GLU HBA1C FMN
葡萄糖 糖化血红蛋白 果糖胺/糖化血清蛋白
临床意义:用于诊断糖尿病、监测治疗过程。
尿液标本测定项目
临检项目(尿常规、尿沉渣检查) 生化项目(尿淀粉酶、尿肌酐、尿尿酸等) 免疫项目(尿β2-微球蛋白等) 微生物项目(培养、鉴定、药敏) 血液病检查项目
丙氨酸氨基转移酶—谷丙转氨酶 天门冬氨酸氨基转移酶—谷草转氨酶 谷丙/谷草 碱性磷酸酶—碱磷酶 γ-谷氨酰转肽酶—转肽酶 总胆红素 直接胆红素 间接胆红素 总蛋白 白蛋白 球蛋白 白球比值 胆碱酯酶 总胆汁酸 前白蛋白
1、肝细胞的损害情况 2、肝细胞参与的代谢功能 3、肝细胞的合成功能
肝功能生化项目临床意义
心肌损伤标志物
爱滋病 风湿类 急性时相蛋白
培养 鉴定 药敏
血液室
骨髓涂片 鉴别实验
检验科科室工作流程
朝会交接工作 接收标本整理分类
样本前处理准备 工作前准备 上机测定
复查
上级主管 异常告知 结果审核 报告发出 填写记录 维护保养 关机
检验科科室工作流程(朝会交接工作)
朝会交接工作 接收标本整理分类
检验科科室工作流程(样本前处理准备)
朝会交接工作 接收标本整理分类
样本前处理准备 工作前准备 上机测定
复查
上级主管 异常告知 结果审核 报告发出 填写记录 维护保养 关机
检验科科室工作流程(样本前处理准备)
生化室
1、血清/血浆:离心、分注 2、尿液/脑脊液/胸/腹水:离心,取上清液
免疫室
1、同上 2、抗凝血:细胞分离使用
双试剂 A=A1-A2 A=A’1-A’2 不受标本本底颜色影响
—:表示正常颜色样本反应曲线;—:表示样本本底颜色高的标本
检验科科室工作流程(工作前准备)
单试剂与双试剂的比较
原理: 试剂成分:
ALT
α-酮戊二酸+L-丙氨酸 L-谷氨酸+丙酮酸
LDH
丙酮酸+NADH+H L-乳酸+NAD
R1:Tris缓冲液 L-丙氨酸 NADH LDH
微生物室:直接使用 临检室:
1、全血:直接使用 2、血清/血浆:离心、分注 3、尿液/脑脊液/胸/腹水:直接使用或离心,取上清液/沉渣
血液室:
1、血液/骨髓:涂片使用 2、血清:离心、分注 3、抗凝血:细胞分离使用
检验科科室工作流程(样本前处理准备)
影响测定的样本因素
溶血:K、LDH、AST、ALT 抗凝剂: 样本的稳定性 : GLU、K 样本稀释: 因大多数蛋白质在浓溶液中的分子 构象比稀溶液中稳定;
血清与血浆的成分区别
不抗凝管
血清 纤维蛋白原
血细胞
抗凝管
血浆 血细胞
检验科科室工作流程(接收标本整理分类)
标本具备患者信息及编号
姓名 门诊病历号/住院病历号 年龄 性别 临床诊断/表现 开单日期 检查项目 采样日期及时间
编号时,观察样本状况,可添加以下信息作为该标本注释: 1、标本量(是否足够) 2、是否正确使用盛器 3、有无溶血(溶血—红细胞破裂) 4、有无黄疸(黄疸—血清中胆红素含量达到一定范围,所呈现类似金黄色) 5、有无脂血(脂血—血清中脂类含量达到一定范围,呈牛奶状)
检验科科室工作流程(工作前准备)
朝会交接工作 接收标本整理分类
样本前处理准备 工作前准备 上机测定
复查
上级主管 异常告知 结果审核 报告发出 填写记录 维护保养 关机
检验科科室工作流程(工作前准备)
医院 科
每日开关机程序
版 本: 执行日期:

HITACHI( 日 立 ) 7180
共5页
第1页
标准化操作程序
样本前处理准备 工作前准备 上机测定
复查
上级主管 异常告知 结果审核 报告发出 填写记录 维护保养 关机
检验科科室工作流程(接收标本整理分类)
朝会交接工作 接收标本整理分类
样本前处理准备 工作前准备 上机测定
复查
上级主管 异常告知 结果审核 报告发出 填写记录 维护保养 关机
检验科科室工作流程(接收标本整理分类)
1、补偿由于样本溶血、黄疸、脂血造成的样本本底颜色增高 的影响; 2、补偿由于电压波动造成的影响。
检验科科室工作流程(上机测定)
临床意义:用于排除和发现肾脏和泌尿道疾病。
血脂生化项目
TCHO
总胆固醇
TG
甘油三酯
HDL-C
高密度脂蛋白-胆固醇
LDL-C
低密度脂蛋白-胆固醇
ApoA1
载脂蛋白A1
ApoB
载脂蛋白B
Lp(a)
脂蛋白a
临床意义:用于心血管疾病的临床观察、干预研究、 实验室和流行病学调查。
心肌酶谱生化项目
HITACHI(日立)7180 自动生化分析仪
文件编号 编写者 审核者 批准者
检验科科室工作流程(工作前准备)
试剂种类介绍
试剂
干粉试剂 液体试剂
单试剂 双试剂 单试剂 双试剂
检验科科室工作流程(工作前准备)
液体试剂与干粉试剂的比较
比较内容 保存稳定性 开瓶稳定性
瓶间差 批间差 使用方便性 运输方便性 节约性
脑脊液标本测定项目
临检项目(细胞计数、分类等) 生化项目(葡萄糖、乳酸脱氢酶、氯化物、蛋白等) 免疫项目(免疫球蛋白等) 微生物项目(培养、鉴定、药敏)
胸腹水标本测定项目
临检项目(细胞计数、分类等) 生化项目(葡萄糖、乳酸脱氢酶、氯化物、蛋白等) 免疫项目(免疫球蛋白等) 微生物项目(培养、鉴定、药敏)
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