药品微生物检验基础知识课件
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燥，镜检。
染色结果
。 革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色
染色结果
革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色
一、微生物基本介绍
4.2真菌（包括酵母菌和霉菌） 1黑曲霉菌
2白色念珠菌
1黑曲霉菌
黑曲霉，半知菌亚门，丝孢 纲，丝孢目，丛梗孢科，曲 霉属真菌中的一个常见种。 广泛分布于世界各地的粮食、 植物性产品和土壤中。
2金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人类的一种重要病原菌， 隶属于葡萄球菌属有“嗜 肉菌"的别称，是革兰氏阳 性菌的代表，可引起许多 严重感染。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的 病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺 炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、 脓毒症等全身感染。
细菌鉴别革兰氏染色
格兰仕阳性菌例如：金黄色葡萄球菌，也称 “金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖和10% 的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴 性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱 色故而呈现紫色
革兰氏阴性菌例如:大肠埃希菌的细胞壁肽聚 糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫色 复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。
2白色念珠菌
白色念珠菌（Monilia albican 或 canidia Albicans），是一 种真菌，通常存在于正常人 口腔，上呼吸道，肠道及阴 道，是医学全身性真菌感染 病的重要途径，可以引起心 膜炎、肺炎、尿布疹、鹅口 疮、阴道炎、脑膜炎、及败 血症。
白色念珠菌沙氏葡萄糖琼脂白色念珠菌
微生物检验技术 基础知识
制剂中心药检室
张文
20160225
目录
一、微生物基本介绍 二、培养基 三、菌种 四、微生物限度检查法
一、微生物基本介绍
1、微生物的定义
微生物是一些形体微小，以单细胞或简单多细胞、 甚至是没有细胞结构的形式存在的低等生物的统称。
2、微生物的分类
微生物的主要分类单位：域、界、门、纲、目、科、 属、种、变种、亚种（小种）、型、菌株（品系）
过长，易使培养基受污染；
二、培养基
2、培养基的灭菌
已配制好的培养基最好尽快灭菌； 一般培养基采用湿热灭菌，即高压蒸汽菌，通常是121℃15
分钟； 湿热灭菌必须严格控制灭菌温度和时间，不可重复高温灭菌； 高压蒸汽灭菌锅在使用时，内置物品不能太多，不要堆积形
成死角。 要定期对压力表等进行检定，检定周期一般为半年； 定期对灭菌效果进行检验，可采用生物指示菌法、化学变色
“种”是最本的分类单位，例：大肠埃希菌
Baidu Nhomakorabea
一、微生物基本介绍
3、微生物的特点
体形微小； 结构简单； 生长繁殖快； 种类繁多，分布广，适应性强。 包括：细菌、酵母菌、霉菌、放线菌、立克次氏体、
支原体和病毒等。
一、微生物基本介绍
4.1细菌 药典收录的有代表性的常见细菌有 1大肠埃希菌 2金黄色葡萄球菌 3枯草芽孢杆菌 4生孢梭菌 5铜绿假单胞菌
白色念珠菌
左图：白色念珠菌在该批念 珠菌显色对照培养基表面培 养 24 小时的生长形态；
右图：白色念珠菌在该批念 珠菌显色对照培养基表面培 养 48 小时的生长形态。
一、微生物基本介绍
5、微生物与我们
每张人民币带细菌：900万个； 人体体表及体内存在大量的微生物； 皮肤表面：平均10万个细菌/平方厘米； 口腔“细菌种类超过500种； 肠道：微生物总量达100万亿；
一、微生物基本介绍
（未清洗的手）
（清洗过的手）
二、培养基
1、培养基的制备
培养基的配制： 按处方配制，使用按处方生产的符合规定的脱水
培养基
二、培养基
配制时注意：
不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基； 常用的溶剂是纯化水、蒸馏水，避免使用自来水，因其中含
有氯等抗菌物质； 脱水型培养基应完全溶解于水中，再分装灭菌； 加热助溶，注意不要过度加热； 如需要添加其它组分，加入后应充分混匀； 配制用的容器最好用中性玻璃或聚乙烯容器； 配制培养基一般要在1小时内完成，如果室温高，配制时间
革兰氏染色
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等 四个步骤，具体操作方法是：
1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒
后水洗，吸去水分。 7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗。干
2金黄色葡萄球菌
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm 左右，显微镜下排列成葡萄串状。
3枯草芽孢杆菌
枯草芽胞杆菌，是芽胞杆菌属 的一种。单个细胞0.7～ 0.8×2～3微米，着色均匀。无 荚膜，周生鞭毛，能运动。革 兰氏阳性菌，芽孢0.6～ 0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱 状，位于菌体中央或稍偏，芽 孢形成后菌体不膨大。菌落表 面粗糙不透明，污白色或微黄 色，在液体培养基中生长时， 常形成皱醭。需氧菌。
1大肠埃希菌
大肠埃希氏菌（Escherichia coli）通常被称为大肠杆菌，是 Escherich在1885年发现的，在 相当长的一段时间内一直被当 作正常肠道菌群的组成部分认 为是非致病菌。
一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条 件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强， 引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。人体感染致病EHEC 后，会发生严重的痉挛性腹痛和反复发作的出血性腹泻， 同时伴有发热、呕吐等表现，多为EHEC产生的毒素所 致。
4生孢梭菌
生孢梭菌 （Clostridium sporogenes） 又译产孢梭菌，能够产生孢 子，革兰氏染色阳性，以周 生鞭运动，严格厌氧的梭菌。
5铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌的学名是 Pseudomonas aeruginosa， 绿脓假单胞菌属为革兰染色阴 性需氧菌，存在于土壤、尘埃 、水和少数人体肠道中，亦可 暂时寄生于皮肤，主要寄生在 肛门、生殖器部位、腋窝和外 耳道等处。在正常情况下一般 不致病，当机体抵抗力低下时 可致病，还可引起病人死亡。
染色结果
。 革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色
染色结果
革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色
一、微生物基本介绍
4.2真菌（包括酵母菌和霉菌） 1黑曲霉菌
2白色念珠菌
1黑曲霉菌
黑曲霉，半知菌亚门，丝孢 纲，丝孢目，丛梗孢科，曲 霉属真菌中的一个常见种。 广泛分布于世界各地的粮食、 植物性产品和土壤中。
2金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人类的一种重要病原菌， 隶属于葡萄球菌属有“嗜 肉菌"的别称，是革兰氏阳 性菌的代表，可引起许多 严重感染。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的 病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺 炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、 脓毒症等全身感染。
细菌鉴别革兰氏染色
格兰仕阳性菌例如：金黄色葡萄球菌，也称 “金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖和10% 的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴 性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱 色故而呈现紫色
革兰氏阴性菌例如:大肠埃希菌的细胞壁肽聚 糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫色 复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。
2白色念珠菌
白色念珠菌（Monilia albican 或 canidia Albicans），是一 种真菌，通常存在于正常人 口腔，上呼吸道，肠道及阴 道，是医学全身性真菌感染 病的重要途径，可以引起心 膜炎、肺炎、尿布疹、鹅口 疮、阴道炎、脑膜炎、及败 血症。
白色念珠菌沙氏葡萄糖琼脂白色念珠菌
微生物检验技术 基础知识
制剂中心药检室
张文
20160225
目录
一、微生物基本介绍 二、培养基 三、菌种 四、微生物限度检查法
一、微生物基本介绍
1、微生物的定义
微生物是一些形体微小，以单细胞或简单多细胞、 甚至是没有细胞结构的形式存在的低等生物的统称。
2、微生物的分类
微生物的主要分类单位：域、界、门、纲、目、科、 属、种、变种、亚种（小种）、型、菌株（品系）
过长，易使培养基受污染；
二、培养基
2、培养基的灭菌
已配制好的培养基最好尽快灭菌； 一般培养基采用湿热灭菌，即高压蒸汽菌，通常是121℃15
分钟； 湿热灭菌必须严格控制灭菌温度和时间，不可重复高温灭菌； 高压蒸汽灭菌锅在使用时，内置物品不能太多，不要堆积形
成死角。 要定期对压力表等进行检定，检定周期一般为半年； 定期对灭菌效果进行检验，可采用生物指示菌法、化学变色
“种”是最本的分类单位，例：大肠埃希菌
Baidu Nhomakorabea
一、微生物基本介绍
3、微生物的特点
体形微小； 结构简单； 生长繁殖快； 种类繁多，分布广，适应性强。 包括：细菌、酵母菌、霉菌、放线菌、立克次氏体、
支原体和病毒等。
一、微生物基本介绍
4.1细菌 药典收录的有代表性的常见细菌有 1大肠埃希菌 2金黄色葡萄球菌 3枯草芽孢杆菌 4生孢梭菌 5铜绿假单胞菌
白色念珠菌
左图：白色念珠菌在该批念 珠菌显色对照培养基表面培 养 24 小时的生长形态；
右图：白色念珠菌在该批念 珠菌显色对照培养基表面培 养 48 小时的生长形态。
一、微生物基本介绍
5、微生物与我们
每张人民币带细菌：900万个； 人体体表及体内存在大量的微生物； 皮肤表面：平均10万个细菌/平方厘米； 口腔“细菌种类超过500种； 肠道：微生物总量达100万亿；
一、微生物基本介绍
（未清洗的手）
（清洗过的手）
二、培养基
1、培养基的制备
培养基的配制： 按处方配制，使用按处方生产的符合规定的脱水
培养基
二、培养基
配制时注意：
不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基； 常用的溶剂是纯化水、蒸馏水，避免使用自来水，因其中含
有氯等抗菌物质； 脱水型培养基应完全溶解于水中，再分装灭菌； 加热助溶，注意不要过度加热； 如需要添加其它组分，加入后应充分混匀； 配制用的容器最好用中性玻璃或聚乙烯容器； 配制培养基一般要在1小时内完成，如果室温高，配制时间
革兰氏染色
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等 四个步骤，具体操作方法是：
1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒
后水洗，吸去水分。 7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗。干
2金黄色葡萄球菌
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm 左右，显微镜下排列成葡萄串状。
3枯草芽孢杆菌
枯草芽胞杆菌，是芽胞杆菌属 的一种。单个细胞0.7～ 0.8×2～3微米，着色均匀。无 荚膜，周生鞭毛，能运动。革 兰氏阳性菌，芽孢0.6～ 0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱 状，位于菌体中央或稍偏，芽 孢形成后菌体不膨大。菌落表 面粗糙不透明，污白色或微黄 色，在液体培养基中生长时， 常形成皱醭。需氧菌。
1大肠埃希菌
大肠埃希氏菌（Escherichia coli）通常被称为大肠杆菌，是 Escherich在1885年发现的，在 相当长的一段时间内一直被当 作正常肠道菌群的组成部分认 为是非致病菌。
一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条 件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强， 引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。人体感染致病EHEC 后，会发生严重的痉挛性腹痛和反复发作的出血性腹泻， 同时伴有发热、呕吐等表现，多为EHEC产生的毒素所 致。
4生孢梭菌
生孢梭菌 （Clostridium sporogenes） 又译产孢梭菌，能够产生孢 子，革兰氏染色阳性，以周 生鞭运动，严格厌氧的梭菌。
5铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌的学名是 Pseudomonas aeruginosa， 绿脓假单胞菌属为革兰染色阴 性需氧菌，存在于土壤、尘埃 、水和少数人体肠道中，亦可 暂时寄生于皮肤，主要寄生在 肛门、生殖器部位、腋窝和外 耳道等处。在正常情况下一般 不致病，当机体抵抗力低下时 可致病，还可引起病人死亡。