〖医学〗人类外周血培养和染色体核型分析
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人类外周血培养和染色体核型 分析
人类外周血培养和染色体核型分析
主要仪器： （1） 超净工作台 （2） 大容量低速离心机 （3） 二氧化碳培养箱和电热恒温培养箱 （4） 电热恒温干燥箱 （5） 水浴锅 （6） 天平 （7） 显微镜
人类外周血培养和染色体核型分析
试剂：
培养基（含80% RPMI-1640营养液，20% 胎牛血清，每5mL中加1-2%植物血球凝 集素和各500单位的青、链霉素）
2 染色体臂率（比）＝q/p 3 着丝粒指数＝p/单条染色体总长 根据上述三个重要参数，将染色体分成7个组，即A－G
组，X染色体长短在C组内，Y染色体长短归于G组内。
思考题：
人类染色体畸变的类型 制片质量的关键步骤 人类染色体组型分析的标准
精品课件文档，欢迎下载，下 载后可以复制编辑。
根据第五次人类遗传学国际会议讨论通过的内容， 1978 年 发 表 了 ISCN （ An International System for Human Cytogenetic Nomenelature）根据规定的内容， 非显带方法的人类染色体的核型分析依据如下：
1 染色体相对长度＝单条染色体长度/正常单套常染色 体＋X染色体的总长度
* Giemsa工作液（10%）需要新鲜配制（以蒸馏水或 1/15M 磷酸缓冲溶液配制）
人类外周血培养和染色体核型分析
0.0125%胰蛋白酶（效价1:250，以生理盐 水配制）
0.2M HCL 2.5% Ba(OH)2：新鲜配制并经65oC热过滤 2×SSC（0.3M NaCL + 0.03M 柠檬酸钠）
编辑本段明清时期（df肺25s血液f369血小板t5172红 血球gdf55m白 血球fd2）
是中医学理论综合汇编、深化发展，临 床各科 辨证体 系丰富 、提高 阶段。 如明代 楼英的 《医学 纲目》 和王肯 堂的《 证治准 绳》， 清代吴 谦等编 著的《 医宗金 鉴》和 陈梦雷 主编的 《古今 图书集 成·医部 全录》 等。王 清任著 《医林 改错》 ，注重 实证研 究，（ df高血 压958心脏病983u6糖 尿病87fr）纠 正了古 医籍中 关于解 剖知识 的某些 错误， 肯定了 “脑主 思维” ，发展 了瘀血 理论。 温病学 说的形 成和发 展，标 志着中 医理论 的创新 与突破 ，吴有 性著《 温疫论 》，叶 天士著 《温热 病篇》 ，吴鞠 通著《 温病条 辨》等 ，在药 物学研 究方面 ，（45传染病q566丙 肝964jo乙肝28jgs x甲 肝gh）李时珍 著的《 本草纲 目》， 总结了16世纪 以前我 国药物 学研究 的成就 。医的 诊察疾 病能参 考现代 医学的 微观分 析，将 辨证与 辨病相 结合， 实现宏 观与微 观的统 一，使 中医诊 断客观 化，即 把分析 与综合 相结合 的方法 引入中 医理、 法、方 、药的 研究， 使二
我国经济和科学技术日益发展， 学术文 化领域 百家争 鸣，（df高血压 958心 脏病983u6糖尿 病87fr ）特别 是思想 家的革 新精神 ，为中 医学理 论的创 新和突 破性进 展，提 供了有 利的文 化背景 。宋代 陈无择 著《三 因极一 病证方 论》一 书，（45传染 病q566丙肝964jo乙肝 28jgsx甲肝gh）提出 三因学 说；并 产生了 最具盛 名四大 学派， 刘完素 倡导火 热论； 张从正 力倡“ 攻邪论 ”；李 杲提出 “内伤 脾胃， 百病由 生”的 理论； 朱震亨 创造性 地阐明 了相火 的演变 规律。
人类外周血培养和染色体核型 分析
实验步骤
1. 细胞培养： 按每5ml培养基中接种约0.5ml静脉血 （经0.4%肝素抗凝），置于恒温培养 箱中37oC培养68-72小时。
人类染色体核型分析
实验步骤------2. 染色体制片：
收获前2-3小时加入0.1ml 5ug/ml秋水仙素（终浓度0.1ug/ml）
加入8mL固定液并充分将细胞混匀，室温固定至少半小时，重复 离心后，去掉上清液
加入新鲜固定液再次固定至少半小时（最好过夜）
经离心和去上清液后的细胞沉淀中加入约0.2ml新鲜固定液混匀
细胞悬液滴于预冷的载玻片上（以每张玻片3滴细胞悬液为宜）
酒精灯烘烤滴片，冷却后进行分带处理
人类外周血培养和染色体核型分析
混匀后继续培养2-3小时
转入10ml离心管中，以1500-2000转/分钟离心10分钟，去上清液
加入8ml低渗液（37oC预热）将细胞沉淀吹打均匀
放入温箱中37oC半小时
加入1ml新配制的固定液，轻轻混匀后以与前面相同的转速和时间 离心，吸去上清液
人类外周血培养和染色体核型 分析
实验步骤------2. 染色体制片：
者有机结合，互相借鉴、补充，避免 各自的 片面性 、局限 性，这 将有利 于中西 医学的 优势互 补，“ 和而不 同”， 多元发 展。近 年来， 中医药 在防治 非典、 禽流感 和艾滋 病方面 发挥的 独特作 用也证 实了二 者的有 机结合 ，具有 肯定的 临床疗 效。
低渗液（0.075M KCL） 固定液（新配制的甲醇:冰醋酸为3:1） 生理盐水（0.85% NaCL）
人类外周血培养和染色体核型分析
0.5mg/mL秋水仙素溶液（以无菌的生理 盐水配制）
Giemsa染液（1g Giemsa粉不断添加少量 甘油充分研磨，甘油总量为60mL,倒入烧 杯中于55-60oC水浴加热2小时，冷却后加 入60mL甲醇，混匀后室温放置2-3天过滤， 在棕色瓶中长期保存。
更多精造成的肝炎按照其病毒系列不同分为甲、乙、丙 、丁、 戊和庚 共六种 类型病 毒性肝 炎。能 引起肝 脏细胞 肿胀， 是世界 上流传 广泛， 危害很 大的传 染病之 一。
1908年，才发现病毒也是肝炎的致病因 素之一 。1947年，将 原来的 传染性 肝炎（i nfectious hepatitis）称为甲型肝炎（Hepatitis A, HA）；血清性肝炎（serum hepatitis）称为乙型肝炎（Hepatitis B, HB）。1965年人类首次检测到乙型肝 炎的表 面抗原 。
人类外周血培养和染色体核型分析
主要仪器： （1） 超净工作台 （2） 大容量低速离心机 （3） 二氧化碳培养箱和电热恒温培养箱 （4） 电热恒温干燥箱 （5） 水浴锅 （6） 天平 （7） 显微镜
人类外周血培养和染色体核型分析
试剂：
培养基（含80% RPMI-1640营养液，20% 胎牛血清，每5mL中加1-2%植物血球凝 集素和各500单位的青、链霉素）
2 染色体臂率（比）＝q/p 3 着丝粒指数＝p/单条染色体总长 根据上述三个重要参数，将染色体分成7个组，即A－G
组，X染色体长短在C组内，Y染色体长短归于G组内。
思考题：
人类染色体畸变的类型 制片质量的关键步骤 人类染色体组型分析的标准
精品课件文档，欢迎下载，下 载后可以复制编辑。
根据第五次人类遗传学国际会议讨论通过的内容， 1978 年 发 表 了 ISCN （ An International System for Human Cytogenetic Nomenelature）根据规定的内容， 非显带方法的人类染色体的核型分析依据如下：
1 染色体相对长度＝单条染色体长度/正常单套常染色 体＋X染色体的总长度
* Giemsa工作液（10%）需要新鲜配制（以蒸馏水或 1/15M 磷酸缓冲溶液配制）
人类外周血培养和染色体核型分析
0.0125%胰蛋白酶（效价1:250，以生理盐 水配制）
0.2M HCL 2.5% Ba(OH)2：新鲜配制并经65oC热过滤 2×SSC（0.3M NaCL + 0.03M 柠檬酸钠）
编辑本段明清时期（df肺25s血液f369血小板t5172红 血球gdf55m白 血球fd2）
是中医学理论综合汇编、深化发展，临 床各科 辨证体 系丰富 、提高 阶段。 如明代 楼英的 《医学 纲目》 和王肯 堂的《 证治准 绳》， 清代吴 谦等编 著的《 医宗金 鉴》和 陈梦雷 主编的 《古今 图书集 成·医部 全录》 等。王 清任著 《医林 改错》 ，注重 实证研 究，（ df高血 压958心脏病983u6糖 尿病87fr）纠 正了古 医籍中 关于解 剖知识 的某些 错误， 肯定了 “脑主 思维” ，发展 了瘀血 理论。 温病学 说的形 成和发 展，标 志着中 医理论 的创新 与突破 ，吴有 性著《 温疫论 》，叶 天士著 《温热 病篇》 ，吴鞠 通著《 温病条 辨》等 ，在药 物学研 究方面 ，（45传染病q566丙 肝964jo乙肝28jgs x甲 肝gh）李时珍 著的《 本草纲 目》， 总结了16世纪 以前我 国药物 学研究 的成就 。医的 诊察疾 病能参 考现代 医学的 微观分 析，将 辨证与 辨病相 结合， 实现宏 观与微 观的统 一，使 中医诊 断客观 化，即 把分析 与综合 相结合 的方法 引入中 医理、 法、方 、药的 研究， 使二
我国经济和科学技术日益发展， 学术文 化领域 百家争 鸣，（df高血压 958心 脏病983u6糖尿 病87fr ）特别 是思想 家的革 新精神 ，为中 医学理 论的创 新和突 破性进 展，提 供了有 利的文 化背景 。宋代 陈无择 著《三 因极一 病证方 论》一 书，（45传染 病q566丙肝964jo乙肝 28jgsx甲肝gh）提出 三因学 说；并 产生了 最具盛 名四大 学派， 刘完素 倡导火 热论； 张从正 力倡“ 攻邪论 ”；李 杲提出 “内伤 脾胃， 百病由 生”的 理论； 朱震亨 创造性 地阐明 了相火 的演变 规律。
人类外周血培养和染色体核型 分析
实验步骤
1. 细胞培养： 按每5ml培养基中接种约0.5ml静脉血 （经0.4%肝素抗凝），置于恒温培养 箱中37oC培养68-72小时。
人类染色体核型分析
实验步骤------2. 染色体制片：
收获前2-3小时加入0.1ml 5ug/ml秋水仙素（终浓度0.1ug/ml）
加入8mL固定液并充分将细胞混匀，室温固定至少半小时，重复 离心后，去掉上清液
加入新鲜固定液再次固定至少半小时（最好过夜）
经离心和去上清液后的细胞沉淀中加入约0.2ml新鲜固定液混匀
细胞悬液滴于预冷的载玻片上（以每张玻片3滴细胞悬液为宜）
酒精灯烘烤滴片，冷却后进行分带处理
人类外周血培养和染色体核型分析
混匀后继续培养2-3小时
转入10ml离心管中，以1500-2000转/分钟离心10分钟，去上清液
加入8ml低渗液（37oC预热）将细胞沉淀吹打均匀
放入温箱中37oC半小时
加入1ml新配制的固定液，轻轻混匀后以与前面相同的转速和时间 离心，吸去上清液
人类外周血培养和染色体核型 分析
实验步骤------2. 染色体制片：
者有机结合，互相借鉴、补充，避免 各自的 片面性 、局限 性，这 将有利 于中西 医学的 优势互 补，“ 和而不 同”， 多元发 展。近 年来， 中医药 在防治 非典、 禽流感 和艾滋 病方面 发挥的 独特作 用也证 实了二 者的有 机结合 ，具有 肯定的 临床疗 效。
低渗液（0.075M KCL） 固定液（新配制的甲醇:冰醋酸为3:1） 生理盐水（0.85% NaCL）
人类外周血培养和染色体核型分析
0.5mg/mL秋水仙素溶液（以无菌的生理 盐水配制）
Giemsa染液（1g Giemsa粉不断添加少量 甘油充分研磨，甘油总量为60mL,倒入烧 杯中于55-60oC水浴加热2小时，冷却后加 入60mL甲醇，混匀后室温放置2-3天过滤， 在棕色瓶中长期保存。
更多精造成的肝炎按照其病毒系列不同分为甲、乙、丙 、丁、 戊和庚 共六种 类型病 毒性肝 炎。能 引起肝 脏细胞 肿胀， 是世界 上流传 广泛， 危害很 大的传 染病之 一。
1908年，才发现病毒也是肝炎的致病因 素之一 。1947年，将 原来的 传染性 肝炎（i nfectious hepatitis）称为甲型肝炎（Hepatitis A, HA）；血清性肝炎（serum hepatitis）称为乙型肝炎（Hepatitis B, HB）。1965年人类首次检测到乙型肝 炎的表 面抗原 。