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机能学实验报告

课程：药物的量效关系及pD2、

临床医学系2016 级 1 班pA2的测定

姓名：学号：3161003002

组员：

【实验目的】

测定乙酰胆碱对蛙腹直肌Nm受体的pD2以及维库溴铵对乙酰胆碱的pA2

【实验动物】

蛙

【实验药品】

RM6240生物机能实验系统、张力换能器、标本槽、哺乳动物手术器械、丝线、棉球、任氏液、乙酰胆碱液

【实验步骤】

一、制备蛙腹直肌标本

二、标本安置

将腹直肌标本悬挂于盛有20ml任氏液的标本槽中，两端分别固定在张力换能器和标本槽底部。槽下孔接排水管并进入空气。标本前负荷加3g，稳定至基线平稳。

三、配制梯度浓度的乙酰胆碱溶液(激动剂)

母液2.0*10 ^-1mol/L，10倍稀释，分别配成2.0*10^-2mol/L、2.0*10^-3mol/L、

2.0*10^-4mol/L、2.0*10^-5mol/L (4.5 ml任氏液+ 0.5ml上一浓度的Ach)，用4根试

管配制，每个注射器对应相应的浓度，不可混用

三、向浴槽依次加入不同浓度的乙酰胆碱，浓度由低到高，一般由2.0*10^-5mol/L开始，每

一浓度分别加0.1ml和0.3ml两次，并记录标本收缩力。以肌肉收缩效应%为纵坐标，以对数浓度为横坐标，可绘制量效曲线，求EC50, pD2。

四、洗脱浴槽内的乙酰胆碱

五、加入2.0*10^-4mol/L维库澳铵溶液(拮抗剂)0.2ml

六、加入维库溴铵5min 后，向浴槽依次加入之前所用的五种不同浓度的乙酰胆碱，记录标本

收缩力，绘制量效曲线，求EC50',维库溴铵对乙酰胆碱的pA2。

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【实验结果】

A B

曲线图1 曲线图2

根据上述表格及曲线图中的数据可计算：

1.pD2的计算：在曲线图一中，横坐标x为乙酰胆碱浓度的对数值

y=0.2378x+1.5941,令y=50%，得x=—4.616即logEC50=—4.616,EC50=2.42084e

所以pD2=4.616

2.pA2的计算：按照1的计算方法，得logEC50’=—

3.7252，EC50’=0.000188273

因pA2=pAx+log[（C50’/EC50）-1]

所以pA2=0.831068034

【实验讨论】

1.在图A中，连续的曲线中出现了一部分不规则的波动，应该是在滴加药液的时候碰到了悬挂腹直肌的线，引起张力换能器的感应

2.图A、B中，理论上前一部分还会有一到两个规则起伏，但在实际实验中这一部分并没有观察到，原因可能是在制作腹直肌标本的时候没有及时将其浸泡在任氏液中导致它的活性有所下降

3.未加入拮抗剂时，药物作用效果随乙酰胆碱浓度的升高而增大；加入拮抗剂后，相同浓度的乙酰胆碱产生的效果变小，但总体来讲还是随乙酰胆碱浓度的升高而增大

【实验结论】

从这次的实验结果来看，药物的量效关系是：在阈浓度到最大有效浓度之间，药物浓度越大，药物的作用效果越明显

pD2=4.616 ，pA2=0.831068034

完成报告: 2018 年11 月26 日批改报告: 年月日

教师签名: