饲料中转基因成分的检测分析方法
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２２ ＤＮＡ检 测 法 ．
基 因芯片技 术 ； 白质 检测 方法 是检 测转入 外 源基 蛋 因的表达蛋 白 ， 用 于抗 原 性未 被破 坏 的转 基 因产 适 品。检 测 方法 主要 有 免 疫学 方 法 和化 学 分 析 等方 法 ， 以采 用符合 国家标 准 的蛋 白质 检测试 剂 盒进 可 行 。 Ｇ Ｆ中转基 因成 分检 测 的工 作流 程为 ： 对 Ｍ 实验 室样 品到样 品验 收 （ 确定 是 否 具备 检 验 的基 本 条 件） 一混 样 获取 测试样 品一 测试 样 品 的制 备一 核 酸和 （ ） 白等 目标物质 的获 取 Ｐ Ｒ试验 （ 括 或 蛋 Ｃ 包 扩增和 产物分 析 ） 或 ） 白质检 测一 结果 判定 及 和（ 蛋
政策 要求 对 用 于饲 料 的转 基 因作 物 进行 风 险 性评
估 ，并 且要求在 饲料 中的转 基 因成分不 能超过 一定 数 量 ，如 欧 盟要 求 饲 料 中 的转 基 因成分 不 能 超 过
ｌ 我国农业部（０ １颁布实施《 ％； ２０ ） 绿色食品 饲料及 饲料添加剂使用准则》禁止使用转基因方法生产的
饲 料 中转 基 因成分 的监 督 、 测 和管理 ， 检 减小 Ｇ ＭＦ 商 品化 带来 的潜 在风险 Ｉ 生，以便对人类 和动物 的健 康 和生 态环境多样性进行保护 。 目前 ，国际上 对 Ｇ Ｆ中转 基 因成分 检测 常用 Ｍ 的检 测方 法可 以分为 两大类 ， 以核 酸为 基础 的检 即
质 、 糖 、 类 、 维 素 以及 Ｄ Ａ提 取 时加 入 的试 多 脂 纤 Ｎ 剂 ， 括 酚类 、Ｄ Ａ、 氯 甲烷 、 丙 醇 、 包 ＥＴ 三 异 乙酸钠 、 异 戊醇 、 乙醇等 。 根 据 Ｇ ／ ９９ ． ２０ ＢＴ１４５３ ０４可知 ， 同 的 Ｄ Ａ提 — 不 Ｎ 取纯 化方法 适用 于不 同 的样 品 。目前 可用 于饲料 中
测方 法和 以蛋 白质 为基础 的检测方 法 。 核酸检 测方 法适 用于对 转入 的外来 核 酸片段 的检测 。 检测 方法 主要 有 ： 转基 因产 品 的核酸 的提取 、 性 Ｐ Ｒ检测 定 Ｃ 方 法 、 量 Ｐ Ｒ检 测 方 法 、 重 Ｐ Ｒ检 测 法 以及 定 Ｃ 多 Ｃ
生 物分析法是通 过转入 目的基 因表 达的特殊性
转基 因成 分 的核 酸提 取纯 化 方法 有 多种 ， 包括 酚 一
３ ・ ８
广东饲料 第 １ 卷第 ４ ９ 期 ２１ 年 ４ ００ 月
三 氯 甲烷 法 、Ｖ Ｐ Ｐ法 （ 乙烯 吡 咯烷 酮 法 ）Ｃ ＡＢ 聚 、Ｔ
法 、 土 法及 胍 一三 氯 甲烷 法 ； 以上各 种 方 法 已 硅 且
转 基 因饲料 （ｅｅｃｌ ｏｉｅ ｅ ，ＭＦ 是 ｇｎｔａｙ ｄｆｄｅｄＧ ） ｉ ｌｍ ｉ ｆ
指通过基 因重组技术获 得的基 因改 良生物加工 而成
总则 ： 取及 制 备 的样 品应 具有 代 表性 ； 保 抽 确 抽 样器 具 清 洁 、 干燥 、 无异 味 ， 样 、 抽 制样 器 具 及 样
广东饲料 第 １ 卷第 ４ ９ 期 ２１ 年 ４ ００绮 霞
（ 广东省农科 院畜牧研究所 ， 广东 广州 ５０ ４ ） １６ ０
【 中图分类号】９ ９４ Ｓ ５ ．８ ［ 文献标识码】 Ｃ 【 文章编号】 ０ — ６ ３ ２ １ ）４ ０ ３ — ３ ｌ ５ ８ １ （０ ０ ０ — ０ ８ ０ ０
状 ， 鉴定是否为转基 因产品的一种简便方法 。 富 来 如
含 Ｂ 胡萝 卜 一 素的转基因“ 金水稻”低糖高甜玉米 、
等。 通过这种方 法可实现对原料 的初步筛选 ， 由于 但 大部 分转基 因所表达 的特殊性 ， 虫 、 如抗 抗病等 体现
在作物 漫长 的生长过 程中 ， 法用于实验室检测 。 无
要组成部分 ： 调控基因、 标记基因和 目的基 因。 其中
调控 基 因包 括启 动子 和终 止子等 。 根据 所选择 的用
经成 功 的应 用 于各种 饲料 样 品。 中 Ｃ Ａ 其 Ｔ Ｂ法 和胍
出具检 验报告 。 １饲料 中转基 因成分 检测 的抽样 和 制样方 法
・
２２１ 酸 的提取 纯化 ．． 核
核 酸 提 取 的 目 的是 提 供 合 适 的 后 续 分 析 的
Ｄ Ａ。Ｄ Ａ 的质 量包 括提取 的 Ｄ Ａ分 子 的平 均长 Ｎ Ｎ Ｎ
度、 化学纯度 以及 Ｄ Ａ序列及双螺旋 的完整性等。 Ｎ Ｄ Ａ 的提 取 必 须 充 分 弃 除 抑 制 Ｐ Ｒ反 应 的蛋 白 Ｎ Ｃ
的饲料（Ｎ１１０— ０３ ｏ目前 ， ｓ ／ １２０ ｒ２ 转基 因农作 物的商 业 化种植 面积正在逐年 增加 ， 品种 日益 丰富 ， 于转 鉴
基因作物潜在 的风险 Ｉ 生，世界各 国纷纷 制定相 应的
品容器所用材质不应对待抽取样品造成污染 ； 避免
交叉 污 染 ； 样 时应 注 意保 护 样 品 ， 抽 抽样 器 具 和样 品容 器应存 放 于清 洁 的环 境 中 ， 免雨 水和灰 尘 等 避 外来 物 引起 的污 染 ；在 尽 可能 短 的时 间 内完 成抽 样 ， 免样 品的组 成 发 生变 化 ； 果 某一 抽 样 步骤 避 如 需很 长时 间 ， 则样 品应存 放 于密 闭容器 中 。 制样 方 法一 般 是 通 过混 合 足 够 量 的份 样 组成 原始 样 品 ， 分原 始 样 品得 到 实验 室 样 品 ， 缩 使用 适
饲料原 料等 。因此 ， 界各 国在 加紧研 发 Ｇ 世 ＭＦ的同
时， 也在 积极研 究 Ｇ ＭＦ的检测 分析 方法 ， 以加 强对
当方法制备存查样 品及对实验室样品进行适当的 均匀化 和 降低 其 粒度来 获得试 样 。
２饲料 中转 基 因成 分 的定性检 测方 法
２１生物分析 法 ．
基 因芯片技 术 ； 白质 检测 方法 是检 测转入 外 源基 蛋 因的表达蛋 白 ， 用 于抗 原 性未 被破 坏 的转 基 因产 适 品。检 测 方法 主要 有 免 疫学 方 法 和化 学 分 析 等方 法 ， 以采 用符合 国家标 准 的蛋 白质 检测试 剂 盒进 可 行 。 Ｇ Ｆ中转基 因成 分检 测 的工 作流 程为 ： 对 Ｍ 实验 室样 品到样 品验 收 （ 确定 是 否 具备 检 验 的基 本 条 件） 一混 样 获取 测试样 品一 测试 样 品 的制 备一 核 酸和 （ ） 白等 目标物质 的获 取 Ｐ Ｒ试验 （ 括 或 蛋 Ｃ 包 扩增和 产物分 析 ） 或 ） 白质检 测一 结果 判定 及 和（ 蛋
政策 要求 对 用 于饲 料 的转 基 因作 物 进行 风 险 性评
估 ，并 且要求在 饲料 中的转 基 因成分不 能超过 一定 数 量 ，如 欧 盟要 求 饲 料 中 的转 基 因成分 不 能 超 过
ｌ 我国农业部（０ １颁布实施《 ％； ２０ ） 绿色食品 饲料及 饲料添加剂使用准则》禁止使用转基因方法生产的
饲 料 中转 基 因成分 的监 督 、 测 和管理 ， 检 减小 Ｇ ＭＦ 商 品化 带来 的潜 在风险 Ｉ 生，以便对人类 和动物 的健 康 和生 态环境多样性进行保护 。 目前 ，国际上 对 Ｇ Ｆ中转 基 因成分 检测 常用 Ｍ 的检 测方 法可 以分为 两大类 ， 以核 酸为 基础 的检 即
质 、 糖 、 类 、 维 素 以及 Ｄ Ａ提 取 时加 入 的试 多 脂 纤 Ｎ 剂 ， 括 酚类 、Ｄ Ａ、 氯 甲烷 、 丙 醇 、 包 ＥＴ 三 异 乙酸钠 、 异 戊醇 、 乙醇等 。 根 据 Ｇ ／ ９９ ． ２０ ＢＴ１４５３ ０４可知 ， 同 的 Ｄ Ａ提 — 不 Ｎ 取纯 化方法 适用 于不 同 的样 品 。目前 可用 于饲料 中
测方 法和 以蛋 白质 为基础 的检测方 法 。 核酸检 测方 法适 用于对 转入 的外来 核 酸片段 的检测 。 检测 方法 主要 有 ： 转基 因产 品 的核酸 的提取 、 性 Ｐ Ｒ检测 定 Ｃ 方 法 、 量 Ｐ Ｒ检 测 方 法 、 重 Ｐ Ｒ检 测 法 以及 定 Ｃ 多 Ｃ
生 物分析法是通 过转入 目的基 因表 达的特殊性
转基 因成 分 的核 酸提 取纯 化 方法 有 多种 ， 包括 酚 一
３ ・ ８
广东饲料 第 １ 卷第 ４ ９ 期 ２１ 年 ４ ００ 月
三 氯 甲烷 法 、Ｖ Ｐ Ｐ法 （ 乙烯 吡 咯烷 酮 法 ）Ｃ ＡＢ 聚 、Ｔ
法 、 土 法及 胍 一三 氯 甲烷 法 ； 以上各 种 方 法 已 硅 且
转 基 因饲料 （ｅｅｃｌ ｏｉｅ ｅ ，ＭＦ 是 ｇｎｔａｙ ｄｆｄｅｄＧ ） ｉ ｌｍ ｉ ｆ
指通过基 因重组技术获 得的基 因改 良生物加工 而成
总则 ： 取及 制 备 的样 品应 具有 代 表性 ； 保 抽 确 抽 样器 具 清 洁 、 干燥 、 无异 味 ， 样 、 抽 制样 器 具 及 样
广东饲料 第 １ 卷第 ４ ９ 期 ２１ 年 ４ ００绮 霞
（ 广东省农科 院畜牧研究所 ， 广东 广州 ５０ ４ ） １６ ０
【 中图分类号】９ ９４ Ｓ ５ ．８ ［ 文献标识码】 Ｃ 【 文章编号】 ０ — ６ ３ ２ １ ）４ ０ ３ — ３ ｌ ５ ８ １ （０ ０ ０ — ０ ８ ０ ０
状 ， 鉴定是否为转基 因产品的一种简便方法 。 富 来 如
含 Ｂ 胡萝 卜 一 素的转基因“ 金水稻”低糖高甜玉米 、
等。 通过这种方 法可实现对原料 的初步筛选 ， 由于 但 大部 分转基 因所表达 的特殊性 ， 虫 、 如抗 抗病等 体现
在作物 漫长 的生长过 程中 ， 法用于实验室检测 。 无
要组成部分 ： 调控基因、 标记基因和 目的基 因。 其中
调控 基 因包 括启 动子 和终 止子等 。 根据 所选择 的用
经成 功 的应 用 于各种 饲料 样 品。 中 Ｃ Ａ 其 Ｔ Ｂ法 和胍
出具检 验报告 。 １饲料 中转基 因成分 检测 的抽样 和 制样方 法
・
２２１ 酸 的提取 纯化 ．． 核
核 酸 提 取 的 目 的是 提 供 合 适 的 后 续 分 析 的
Ｄ Ａ。Ｄ Ａ 的质 量包 括提取 的 Ｄ Ａ分 子 的平 均长 Ｎ Ｎ Ｎ
度、 化学纯度 以及 Ｄ Ａ序列及双螺旋 的完整性等。 Ｎ Ｄ Ａ 的提 取 必 须 充 分 弃 除 抑 制 Ｐ Ｒ反 应 的蛋 白 Ｎ Ｃ
的饲料（Ｎ１１０— ０３ ｏ目前 ， ｓ ／ １２０ ｒ２ 转基 因农作 物的商 业 化种植 面积正在逐年 增加 ， 品种 日益 丰富 ， 于转 鉴
基因作物潜在 的风险 Ｉ 生，世界各 国纷纷 制定相 应的
品容器所用材质不应对待抽取样品造成污染 ； 避免
交叉 污 染 ； 样 时应 注 意保 护 样 品 ， 抽 抽样 器 具 和样 品容 器应存 放 于清 洁 的环 境 中 ， 免雨 水和灰 尘 等 避 外来 物 引起 的污 染 ；在 尽 可能 短 的时 间 内完 成抽 样 ， 免样 品的组 成 发 生变 化 ； 果 某一 抽 样 步骤 避 如 需很 长时 间 ， 则样 品应存 放 于密 闭容器 中 。 制样 方 法一 般 是 通 过混 合 足 够 量 的份 样 组成 原始 样 品 ， 分原 始 样 品得 到 实验 室 样 品 ， 缩 使用 适
饲料原 料等 。因此 ， 界各 国在 加紧研 发 Ｇ 世 ＭＦ的同
时， 也在 积极研 究 Ｇ ＭＦ的检测 分析 方法 ， 以加 强对
当方法制备存查样 品及对实验室样品进行适当的 均匀化 和 降低 其 粒度来 获得试 样 。
２饲料 中转 基 因成 分 的定性检 测方 法
２１生物分析 法 ．