大鼠子宫内膜炎模型的建立及炎症因子水平的检测
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基 础 科 学
中国畜牧兽 医文摘
2 0 1 6 年
3 2 卷
第l 2 期
大 鼠子 宫内膜炎模 型 的建立及炎症 因子水平 的检测
刘雅枝 喻 翌 符铭雪 贺光婷 曲旦旺姆 肖红 1 0 1 2 8 )
[ 摘 要] 子宫 内膜 炎是 一 种 的母 畜 易患 病 ,本研 究 拟建 立 大 鼠子 宫 内膜 炎模 型 ,为其 发 病机 理研 究提 供 合适 的动物 病 理模 型 。 方 法 :体 重2 O O ~2 5 0 g ,刚 生产 完 2 4 h 内 的八只 母 鼠 随机 分 为 两组 ,实验 组 ( 五 只 )和对 照组 ( 三 只 ),采 用 子宫 注射 大肠 埃 希 茵的 方 法造模 , 肉眼观 察 并记 录 子宫 变化 并检 测子 宫 匀浆 中 炎症 因子水 平 。结果 :模 型组 大鼠子 宫 出现 明显 的病理 表现 ,肿 瘤 坏死 因子 一 仅、 白细胞 介素 6 的浓度 明显 升 高。 【 结论 ] 大 鼠子 宫 内膜 炎 建模型 成 功 。
m
对 照组 ( 5 只)
N = 5 。 与对照 组相 比较 ,・ P < 0 . 0 1 。 白介素一 6 ,I L - 6 ;肿瘤 坏死 因
子一0 【 ,T N F 一 。 【 。
1 . 4 动 物 造 模 1 . 4 . 1 大 鼠阴道 开腔 器和 子宫 灌 注针 的 制作 将 l ml 塑 料移 液 枪 头 距离 尖 嘴 l c m 和3 e a r 分 别做横 截 断 ,使 其 成为 1 个2 c m长 的小喇 叭 管 ,制成 阴道 开腔 器 ;将 7 或9 号 的灌 注针 头 的针 尖 截断 ,在 细磨 刀 上 打磨 截 面 ,保 持 圆滑 ,在酒 精 灯上 快 速熔 化 塑 料 ,使熔 化 的 塑 料 液滴 在注 射针 头截 断处形 成 1 个小 圆球 ,制成 子宫 灌注 针 。 1 . 4 . 2 大 鼠的麻 醉 将 大 鼠置 于封 闭 的充满 乙醚 气体 的容 器 中 , 静 置 等 待 十分 钟左 右 使之 进 入 全麻 状态 ,待 其失 去 活动 能 力 时取
[ 关键 词] 大 鼠 子 宫 内膜 炎
动物 模 型是 现 在 国 内外研 究疾 病 机 理一 种 常见 有 效 的方 法 , 也 可用 于某 些药 物 的开发 与利 用 。 子 宫 内膜 炎 是子 宫 内膜 的炎症 ,母 畜在 配 种 、人 工授 精 、分 娩 、助产 、流产 期 间常 易 发生 子 宫 内膜 炎 ,严 重危 及 母 畜和 仔猪 的健康 ’ 。 由于实 验室 不便 用患 该病 大 型母 畜 ,本实验 拟采 用 阴 道 给 菌法 建 立 大 鼠子宫 内膜炎 模 型 ,以期 为将 来 开展 鼠子宫 内膜 炎 发病 机制 及相 关药 物治 疗效 果 的研 究提供 基 础 。
出。
3 讨 论
大 鼠子 宫 内膜 炎 建模 殊 为不 易 ,操 作 时应 注 意_ l ’ : ( 1 )阴 道 开 腔 器 使 用 时 管 的 两 端 用 蚊 香 微 烤 ,使 截 面 保 持 光 滑 ,使 用 时 ,先将 小 口端插 人 阴道 ,然后 用 镊子 牵 引 至子 宫 颈 口 ,可 防止 损伤 阴道 内壁 ; ( 2 )宫灌 注针 经过 子宫 颈 口给子 宫 内送药 或送 菌 液时 ,不 应损 伤 阴道 内壁 ; ( 3) 麻 醉期 间观 察大 鼠反 应 以防麻 醉 过度致其死亡 ; ( 4 )注射细菌溶液 ,应将菌液缓慢注入大鼠子宫 中 ,针刺 人大 鼠子宫 内应有 突破 一层 薄膜 之感 。 子 宫 内膜 炎 是 引起 而 不 育 症 严 重 疾 病 ,影 响 母 畜 的 生 产 性 能 。猪 子 宫 内膜炎 的发 生 已成 为阻 碍养 殖 业健 康 发 展 的一个 重 要 因 素 ,但 其 发 病 原 因及 治 疗 机 理 尚不 明确 ’ 。本 实 验 的结 果 表 明 模 型 组 大 鼠子 宫 出 现 明 显 的 病 理 表 现 ,子 宫 匀 浆 中炎 症 因子 T N F —d、I L 一 6 的浓 度 明显 升高 ,说 明大 鼠子宫 内膜 炎模 型 制备 成 功 。本研 究子 宫 内膜 炎后续 的病 理及 药理 研 究提 供实 验数 据 。 参考文献
2 实验 结果
肉眼 观察 可 见 :接 种病 原 菌 的大 鼠子宫 出现子 宫 内膜 脱 落 , 黏 膜 充血 出血 ,并 有 炎症 细胞 浸 润 的病 理 表现 ,说 明实 验组 大 鼠 产 生 了子 宫 内膜 炎 ,而对 照组 大 鼠 的子 宫 内膜 完整 且 子宫 环 境健
康。
酶联 免 疫 法 检 测 结 果表 明 :模 型 组 大 鼠子 宫 匀浆 中T N F —d 和I L 一 6 的浓 度 明显 高 于正 常 对 照组 ( P < O . O 1 ),实 验数 据 如 图所
示:
1 材料 与方法
1 . 1 实 验 材 料 磷 酸 缓 冲盐溶 液 ( p h o s p h a t e b u rr s a l i n e ), 自配灭 菌备 用 ; 大 肠 埃希 菌 ,购 于 中 国兽 医药 品监察 所 ,用 前 制成 菌 悬 液 ,配 制 0 I § 浓 度 为9 X 1 0 C F U / M L ;其 他试 剂均 为 国产分 析纯 。 l 1 . 2 实 验 动 物 Wi s t a r 大 鼠 ,体 重2 0 0 ~2 5 0 g ,由湖南农 业 大学 动 物科技 学 院 小 动物 实验 室提 供 ,二级 清 洁动 物 ,7 ~8 N龄 。 1 . 3 动 物 分 组 N F -e L 浓度 和 I L - 6 浓度 的浓度 。 数 据采 用均数 ±标 准差表 示 , 健 康 的产 仔 不 到2 4 h 的十 只大 鼠 ,随机 分 为实 验 组 ( 5 只 )和 图 1
中国畜牧兽 医文摘
2 0 1 6 年
3 2 卷
第l 2 期
大 鼠子 宫内膜炎模 型 的建立及炎症 因子水平 的检测
刘雅枝 喻 翌 符铭雪 贺光婷 曲旦旺姆 肖红 1 0 1 2 8 )
[ 摘 要] 子宫 内膜 炎是 一 种 的母 畜 易患 病 ,本研 究 拟建 立 大 鼠子 宫 内膜 炎模 型 ,为其 发 病机 理研 究提 供 合适 的动物 病 理模 型 。 方 法 :体 重2 O O ~2 5 0 g ,刚 生产 完 2 4 h 内 的八只 母 鼠 随机 分 为 两组 ,实验 组 ( 五 只 )和对 照组 ( 三 只 ),采 用 子宫 注射 大肠 埃 希 茵的 方 法造模 , 肉眼观 察 并记 录 子宫 变化 并检 测子 宫 匀浆 中 炎症 因子水 平 。结果 :模 型组 大鼠子 宫 出现 明显 的病理 表现 ,肿 瘤 坏死 因子 一 仅、 白细胞 介素 6 的浓度 明显 升 高。 【 结论 ] 大 鼠子 宫 内膜 炎 建模型 成 功 。
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对 照组 ( 5 只)
N = 5 。 与对照 组相 比较 ,・ P < 0 . 0 1 。 白介素一 6 ,I L - 6 ;肿瘤 坏死 因
子一0 【 ,T N F 一 。 【 。
1 . 4 动 物 造 模 1 . 4 . 1 大 鼠阴道 开腔 器和 子宫 灌 注针 的 制作 将 l ml 塑 料移 液 枪 头 距离 尖 嘴 l c m 和3 e a r 分 别做横 截 断 ,使 其 成为 1 个2 c m长 的小喇 叭 管 ,制成 阴道 开腔 器 ;将 7 或9 号 的灌 注针 头 的针 尖 截断 ,在 细磨 刀 上 打磨 截 面 ,保 持 圆滑 ,在酒 精 灯上 快 速熔 化 塑 料 ,使熔 化 的 塑 料 液滴 在注 射针 头截 断处形 成 1 个小 圆球 ,制成 子宫 灌注 针 。 1 . 4 . 2 大 鼠的麻 醉 将 大 鼠置 于封 闭 的充满 乙醚 气体 的容 器 中 , 静 置 等 待 十分 钟左 右 使之 进 入 全麻 状态 ,待 其失 去 活动 能 力 时取
[ 关键 词] 大 鼠 子 宫 内膜 炎
动物 模 型是 现 在 国 内外研 究疾 病 机 理一 种 常见 有 效 的方 法 , 也 可用 于某 些药 物 的开发 与利 用 。 子 宫 内膜 炎 是子 宫 内膜 的炎症 ,母 畜在 配 种 、人 工授 精 、分 娩 、助产 、流产 期 间常 易 发生 子 宫 内膜 炎 ,严 重危 及 母 畜和 仔猪 的健康 ’ 。 由于实 验室 不便 用患 该病 大 型母 畜 ,本实验 拟采 用 阴 道 给 菌法 建 立 大 鼠子宫 内膜炎 模 型 ,以期 为将 来 开展 鼠子宫 内膜 炎 发病 机制 及相 关药 物治 疗效 果 的研 究提供 基 础 。
出。
3 讨 论
大 鼠子 宫 内膜 炎 建模 殊 为不 易 ,操 作 时应 注 意_ l ’ : ( 1 )阴 道 开 腔 器 使 用 时 管 的 两 端 用 蚊 香 微 烤 ,使 截 面 保 持 光 滑 ,使 用 时 ,先将 小 口端插 人 阴道 ,然后 用 镊子 牵 引 至子 宫 颈 口 ,可 防止 损伤 阴道 内壁 ; ( 2 )宫灌 注针 经过 子宫 颈 口给子 宫 内送药 或送 菌 液时 ,不 应损 伤 阴道 内壁 ; ( 3) 麻 醉期 间观 察大 鼠反 应 以防麻 醉 过度致其死亡 ; ( 4 )注射细菌溶液 ,应将菌液缓慢注入大鼠子宫 中 ,针刺 人大 鼠子宫 内应有 突破 一层 薄膜 之感 。 子 宫 内膜 炎 是 引起 而 不 育 症 严 重 疾 病 ,影 响 母 畜 的 生 产 性 能 。猪 子 宫 内膜炎 的发 生 已成 为阻 碍养 殖 业健 康 发 展 的一个 重 要 因 素 ,但 其 发 病 原 因及 治 疗 机 理 尚不 明确 ’ 。本 实 验 的结 果 表 明 模 型 组 大 鼠子 宫 出 现 明 显 的 病 理 表 现 ,子 宫 匀 浆 中炎 症 因子 T N F —d、I L 一 6 的浓 度 明显 升高 ,说 明大 鼠子宫 内膜 炎模 型 制备 成 功 。本研 究子 宫 内膜 炎后续 的病 理及 药理 研 究提 供实 验数 据 。 参考文献
2 实验 结果
肉眼 观察 可 见 :接 种病 原 菌 的大 鼠子宫 出现子 宫 内膜 脱 落 , 黏 膜 充血 出血 ,并 有 炎症 细胞 浸 润 的病 理 表现 ,说 明实 验组 大 鼠 产 生 了子 宫 内膜 炎 ,而对 照组 大 鼠 的子 宫 内膜 完整 且 子宫 环 境健
康。
酶联 免 疫 法 检 测 结 果表 明 :模 型 组 大 鼠子 宫 匀浆 中T N F —d 和I L 一 6 的浓 度 明显 高 于正 常 对 照组 ( P < O . O 1 ),实 验数 据 如 图所
示:
1 材料 与方法
1 . 1 实 验 材 料 磷 酸 缓 冲盐溶 液 ( p h o s p h a t e b u rr s a l i n e ), 自配灭 菌备 用 ; 大 肠 埃希 菌 ,购 于 中 国兽 医药 品监察 所 ,用 前 制成 菌 悬 液 ,配 制 0 I § 浓 度 为9 X 1 0 C F U / M L ;其 他试 剂均 为 国产分 析纯 。 l 1 . 2 实 验 动 物 Wi s t a r 大 鼠 ,体 重2 0 0 ~2 5 0 g ,由湖南农 业 大学 动 物科技 学 院 小 动物 实验 室提 供 ,二级 清 洁动 物 ,7 ~8 N龄 。 1 . 3 动 物 分 组 N F -e L 浓度 和 I L - 6 浓度 的浓度 。 数 据采 用均数 ±标 准差表 示 , 健 康 的产 仔 不 到2 4 h 的十 只大 鼠 ,随机 分 为实 验 组 ( 5 只 )和 图 1