比色分析及分光光度法.
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
It T I0 I0 1 A lg lg lgT It T
∞
T 10 A
1.0 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.05 0 A
0
10
20
30
40
50
60 70
80
90
100 T%
18
二、朗伯—比尔定律
Lambert-Beer’s Law
A－吸光度 K－比例常数，与吸光物 质的性质、入射光波长、 温度等有关 b－液层厚度，cm
微波光谱 法
9
3. 单色光与复合光
单色光：具有同一波长的光 复合光：不同波长组成的光 可见光的波长大约在 400 ～ 760nm 之
间，由红、橙、黄、绿、青、蓝、 各种光具有一定的波长范围。
10
紫等各种色光按一定比例混合而成，
4. 互补光
11
二、物质对光的选择性吸收
12
1. 物质颜色和吸收颜色的关系
5
二、分光光度法的特点
灵敏度高、选择性好 准确度较高 应用广泛 仪器简单、操作简便、分析快速
6
§7.2 物质对光的选择性吸收
光的基本性质 物质对光的选择性吸收
7
一、光的基本性质
1.
光的波动性和微粒性：
- - - -波 长 ， 在 紫 外 － 可 见 以 区n m为 单 位
2.
摩尔吸光系数：
A bc
3.
关系： ＝ M a
例 1
50mL 比 色 管 中 ， 加 入 含 有 0.025mg的 Fe2+溶液，加入邻二氮菲显色剂，用水 稀释至50mL，用2cm比色池，在分光光 度计上测得吸光度 A=0.190 ，计算摩尔 吸光系数？ 解： ε
A bc 0.190 1.1 104 (L m ol-1 cm 1 ) 0.025 2 55.85 50
光谱 名称
10-1 1 10 102 103 可见光 外层电子 比色及可见 光度法 104 105 106 107 108
X－射线 紫外光
红外光
微波 分子转动
跃迁 类型
分析 方法
内层电 子
中层、外 层电子
分子振动 或转动
红外光谱 法
紫外光度 法 X－射线
光谱法
Ultraviolet－Visible Spectrophotometry
0.4
0.2 400 450 500 550 600 650 /nm
14
3. 分析依据
定性分析：最大吸收波长max 定量分析：吸光度大小
A 0.8 1 2
0.4
0.6 0.2
400 450 500 550 600 650 /nm
15
§7.3 光吸收基本定律
透光率与吸光度 朗伯－比尔定律 吸光系数、摩尔吸光系数
c
Baidu Nhomakorabea
- - - -频 率 ， Hz
c - - - -光 速 ， 真 空 中 3 1010 cm s -1
E h h
c
E - - - -光 子 的 能 量 ， J h - - - -Pl an k 常数， 6.625 10- 34 J s
8
2. 电磁波谱图
波长 /nm
c3
c3
c4
c4
1
2
4
8
16
40
x
25
二、分光光度法
Spectrophotometry
26
分光光度计
基本部件
显示装置
光源
单色器
比色皿
检测器
27
光源：
在可见光和近红外光区，常用钨灯或 碘 钨 灯 作 光 源 ， 它 们 辐 射 320 － 2500nm波长的光；在近紫外区，常使 用 氢 灯 或 氘 灯 ， 它 们 能 辐 射 180 － 375nm波长的光。
物质颜色 黄绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 绿蓝 蓝绿 颜色 紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 橙 红 吸收光 波长范围/nm 400～450 450～480 480～490 490～500 500～560 560～580 580～600 600～650 650～750
13
2. 吸收光谱图
A 0.8 0.6 最大吸收波长max
2
本章内容提要
§7.1 概述 §7.2 物质对光的选择性吸收 §7.3 光吸收基本定律
§7.4
其仪器
比色分析和分光光度法及
3
§7.1 概述
方法依据及分类 方法特点
4
一、方法依据及分类
基于 物质对光的选择性吸收 而建立 起来的分析方法，包括比色法、可 见及紫外光度法及红外光谱法等。 比色分析法：通过目视比较颜色的 深浅来测定物质的浓度。 分光光度法：使用分光光度计测定 的方法。
分析化学
第七章 比色分析及分光光度法 Colorimetry and
Spectrophotometry
1
基本内容和重点要求
掌握物质对光的选择性吸收、吸光度和 透光度、朗伯 — 比尔定律及摩尔吸光系 数等知识 了解比色分析和分光光度法的特点、基 本原理、仪器构造和各部件的作用 学习掌握显色反应和显色条件的选择 理解掌握 分光光度法定量分析中的各种 影响因素
21
四、吸光度的加合性
多组分体系中
A A1 A2 ... An 1 bc1 2 bc 2 ... n bc n
22
五、标准曲线（校正曲线）
Standard curve，calibrated curve， working curve A
0.50
A bc
A Kbc
c－溶液的浓度，molL-1 或g L-1
19
三、吸光系数、摩尔吸光系数
1.
吸光系数a：
A Kbc
c－gL-1 b－cm a=A/( b c)， L· g-1· cm-1 c －mol L－1 b－cm =A/(b c)，L· mol-1· cm-1
20
A abc
吸光度的加合性
标准曲线（校正曲线）
16
一、透光率与吸光度
Transmittance and absorptivity
I0 Ia It Ir
I0 Ir
透光率或 透射比 吸光度
Ia
It
I0 Ia It It T I0
I0 A l g l gT It
17
透光率T与吸光度A的关系
0.40 0.30
0.20
0.10 0 2.0 4.0 6.0 8.0 10 mg/mL
23
§7.4 比色分析和分光光度法 及其仪器
目视比色法 分光光度法
24
一、目视比色法（ colorimetry ）
观察方向
方法依据 方法特点
cc 12
c1 c2
方便 、灵敏 ， 准确度 差。常用于限界分 析。
∞
T 10 A
1.0 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.05 0 A
0
10
20
30
40
50
60 70
80
90
100 T%
18
二、朗伯—比尔定律
Lambert-Beer’s Law
A－吸光度 K－比例常数，与吸光物 质的性质、入射光波长、 温度等有关 b－液层厚度，cm
微波光谱 法
9
3. 单色光与复合光
单色光：具有同一波长的光 复合光：不同波长组成的光 可见光的波长大约在 400 ～ 760nm 之
间，由红、橙、黄、绿、青、蓝、 各种光具有一定的波长范围。
10
紫等各种色光按一定比例混合而成，
4. 互补光
11
二、物质对光的选择性吸收
12
1. 物质颜色和吸收颜色的关系
5
二、分光光度法的特点
灵敏度高、选择性好 准确度较高 应用广泛 仪器简单、操作简便、分析快速
6
§7.2 物质对光的选择性吸收
光的基本性质 物质对光的选择性吸收
7
一、光的基本性质
1.
光的波动性和微粒性：
- - - -波 长 ， 在 紫 外 － 可 见 以 区n m为 单 位
2.
摩尔吸光系数：
A bc
3.
关系： ＝ M a
例 1
50mL 比 色 管 中 ， 加 入 含 有 0.025mg的 Fe2+溶液，加入邻二氮菲显色剂，用水 稀释至50mL，用2cm比色池，在分光光 度计上测得吸光度 A=0.190 ，计算摩尔 吸光系数？ 解： ε
A bc 0.190 1.1 104 (L m ol-1 cm 1 ) 0.025 2 55.85 50
光谱 名称
10-1 1 10 102 103 可见光 外层电子 比色及可见 光度法 104 105 106 107 108
X－射线 紫外光
红外光
微波 分子转动
跃迁 类型
分析 方法
内层电 子
中层、外 层电子
分子振动 或转动
红外光谱 法
紫外光度 法 X－射线
光谱法
Ultraviolet－Visible Spectrophotometry
0.4
0.2 400 450 500 550 600 650 /nm
14
3. 分析依据
定性分析：最大吸收波长max 定量分析：吸光度大小
A 0.8 1 2
0.4
0.6 0.2
400 450 500 550 600 650 /nm
15
§7.3 光吸收基本定律
透光率与吸光度 朗伯－比尔定律 吸光系数、摩尔吸光系数
c
Baidu Nhomakorabea
- - - -频 率 ， Hz
c - - - -光 速 ， 真 空 中 3 1010 cm s -1
E h h
c
E - - - -光 子 的 能 量 ， J h - - - -Pl an k 常数， 6.625 10- 34 J s
8
2. 电磁波谱图
波长 /nm
c3
c3
c4
c4
1
2
4
8
16
40
x
25
二、分光光度法
Spectrophotometry
26
分光光度计
基本部件
显示装置
光源
单色器
比色皿
检测器
27
光源：
在可见光和近红外光区，常用钨灯或 碘 钨 灯 作 光 源 ， 它 们 辐 射 320 － 2500nm波长的光；在近紫外区，常使 用 氢 灯 或 氘 灯 ， 它 们 能 辐 射 180 － 375nm波长的光。
物质颜色 黄绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 绿蓝 蓝绿 颜色 紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 橙 红 吸收光 波长范围/nm 400～450 450～480 480～490 490～500 500～560 560～580 580～600 600～650 650～750
13
2. 吸收光谱图
A 0.8 0.6 最大吸收波长max
2
本章内容提要
§7.1 概述 §7.2 物质对光的选择性吸收 §7.3 光吸收基本定律
§7.4
其仪器
比色分析和分光光度法及
3
§7.1 概述
方法依据及分类 方法特点
4
一、方法依据及分类
基于 物质对光的选择性吸收 而建立 起来的分析方法，包括比色法、可 见及紫外光度法及红外光谱法等。 比色分析法：通过目视比较颜色的 深浅来测定物质的浓度。 分光光度法：使用分光光度计测定 的方法。
分析化学
第七章 比色分析及分光光度法 Colorimetry and
Spectrophotometry
1
基本内容和重点要求
掌握物质对光的选择性吸收、吸光度和 透光度、朗伯 — 比尔定律及摩尔吸光系 数等知识 了解比色分析和分光光度法的特点、基 本原理、仪器构造和各部件的作用 学习掌握显色反应和显色条件的选择 理解掌握 分光光度法定量分析中的各种 影响因素
21
四、吸光度的加合性
多组分体系中
A A1 A2 ... An 1 bc1 2 bc 2 ... n bc n
22
五、标准曲线（校正曲线）
Standard curve，calibrated curve， working curve A
0.50
A bc
A Kbc
c－溶液的浓度，molL-1 或g L-1
19
三、吸光系数、摩尔吸光系数
1.
吸光系数a：
A Kbc
c－gL-1 b－cm a=A/( b c)， L· g-1· cm-1 c －mol L－1 b－cm =A/(b c)，L· mol-1· cm-1
20
A abc
吸光度的加合性
标准曲线（校正曲线）
16
一、透光率与吸光度
Transmittance and absorptivity
I0 Ia It Ir
I0 Ir
透光率或 透射比 吸光度
Ia
It
I0 Ia It It T I0
I0 A l g l gT It
17
透光率T与吸光度A的关系
0.40 0.30
0.20
0.10 0 2.0 4.0 6.0 8.0 10 mg/mL
23
§7.4 比色分析和分光光度法 及其仪器
目视比色法 分光光度法
24
一、目视比色法（ colorimetry ）
观察方向
方法依据 方法特点
cc 12
c1 c2
方便 、灵敏 ， 准确度 差。常用于限界分 析。