辣椒中提取红色素

实验42 红辣椒中红色素的提取

实验目的

了解色谱分离技术在有机物分离中的应用。熟悉薄层色谱、柱色谱的分离原理，掌握柱层析分离技术。 产品介绍

天然红辣椒中含有辣椒红色素（简称辣椒红），辣椒素、辣椒油酯等。 辣椒红是辣椒红素、辣椒玉红素、β-胡萝卜素等色素的混合物，为深红色油状液体。 辣椒红是食品和化妆品中的天然色素添加剂。其化学组成为呈深红色的色素主要是由辣椒红脂肪酸酯和辣椒玉红素脂肪酸酯所组成。呈黄色的色素则是β-胡萝卜素，化学结构：

HO

3

CH 3O

CH 3CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

OH

CH 3

CH 3

H 3C

辣椒红

O

CH 3

CH 3O

CH 3CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

H 3C O

C

O R

C

O R

辣椒红的脂肪酸酯（R=3个或更多碳的链）

另一个具有稍大R f 值的较小红色斑点，可能是由辣椒玉红素的脂肪酸酯组成。

CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

CH 3CH 3

CH 3

CH 3

CH 3

H 3C

β-胡萝卜素 主要试剂

2 g 红辣椒，二氯甲烷，乙醇，氯仿，硅胶H （60~200目）。 主要仪器

圆底烧瓶，烧杯，层析缸，薄层色谱板，层析柱，试管等。 实验流程

实验步骤

1．红辣椒色素的提取

在50 mL 圆底烧瓶中放入2 g 红辣椒和2~3粒沸石，加入15 mL 二氯甲烷，回流30 min ，冷却至室温，然后过滤除去固体。蒸发滤液得到色素的一种粗混合物。 2．色素的薄层分析

把少量粗色素样品用5滴氯仿溶解在一个小烧杯中，用毛细管点在准备好的硅胶G 薄板上，用含有1％~5％绝对乙醇的二氯甲烷作为展开剂，在层析缸中进行层析，记录每一点的颜色，并计算它们的R f 值[1~2]。 3. 红色素的柱层析分离

用湿法装柱。约8 g 硅胶（60～200目）在适量二氯甲烷中搅匀，装填到配有玻璃活塞的层析柱中[3]。柱填好后，将二氯甲烷洗脱剂液面降至被盖硅胶的砂的上表面。将色素的粗混合物溶解在少量二氯甲烷中（约1 mL ），然后将溶液用滴管加入层析柱。

红辣椒二氯甲烷回流20min

过滤滤液

蒸馏色素混合物

薄层色谱分析柱色谱分离

红色素

放置色素于柱上后，用约50 mL二氯甲烷洗脱色素。收集不同颜色的洗脱组份于小锥形瓶或试管中，当第二组黄色素洗脱后，停止层析。

通过薄层层析来检验柱层析，若没有得到一个好的分离效果，用同样的步骤将合并的红色素组份再进行一次柱层析分离。鉴定含有红色素的组份．然后将主要含有同种组分的每组组份合并。

安全提示

实验须在通风橱下进行，严禁烟火，严禁皮肤接触，牢记有机化学实验常规安全防范和急救措施。

注释

[1] 点样时，毛细点样管刚接触薄板即可，不然会拖尾，影响分离效果。

[2] 详细操作可参考薄层色谱技术介绍

[3] 柱层析时，棉花不能塞的太紧，以免影响洗脱速度（太紧会流速太慢）！

思考题

（1）为什么极性较大的组分要用极性较大的溶剂洗脱？

（2）层析柱中若有气泡或装填不均匀，会给分离造成什么影响？如何避免？

（3）如何利用R f值来鉴定化合物？