革兰氏染色法

细菌的大小
细菌大小的测定：
(1) 测量： 测微尺
(2) 长度单位：微米(μm)(亚细胞构造用nm) (3) 表示：
球菌：直径 杆菌： 宽×长 螺菌： 宽、长、螺距
细菌染色法
简单染色法 正染色法
鉴别染色法 死菌
负染色：荚膜染色法
革兰氏染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 姬姆萨染色法
活菌：用美兰或TTC（氯化三苯基四氮唑）
细胞壁的基本骨架——肽聚糖
革兰氏阳性细菌肽聚糖单体
革兰氏阴性细菌肽聚糖单体
细胞壁的基本骨架——肽聚糖
肽聚糖网格状结构
革兰氏阳性菌细胞壁
❖由肽聚糖和磷壁酸组成
磷壁酸：占40%。G+ 菌所特有,其主链由数 十个磷酸甘油或磷酸 核糖醇组成,有的还有 由D-Ala和还原糖组 成的侧链。
肽聚糖:
占30-70% ,不同菌种中 肽聚糖(肽链)组分不同
基本结构
细胞壁 细胞膜 细胞质 细胞核
特殊结构
鞭毛 菌毛 糖被（荚膜和粘液层） 芽孢
（一）细菌细胞的基本结构
细菌细胞结构
1、细胞壁
约占细胞干重的10%～25%。
（1）细胞壁的功能 固定细胞外形和提高机械强度，使其免受渗透压等外力 的 损伤； 为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需； 阻拦大分子有害物质（抗生素和酶）进入细胞； 与细菌的抗原性．致病性和对噬菌体的敏感性密切相关。
革兰氏阴性菌细胞壁
❖由外膜层和内壁层组成
外膜层：位于肽聚糖层的外部。
外膜蛋白 脂多糖 脂蛋白、
包括: 蛋白质层 外膜蛋白 孔蛋白;
孔蛋白 磷脂.
内壁层：紧贴胞膜,仅由
1~2层肽聚糖分子构成,占细 胞壁干重5~10%,无磷壁酸。
❖革兰氏染色的机理
第一步：结晶紫使菌体染成紫色 第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁 阻 留在细胞内。 第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。 第四步：沙黄复染。 G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽 聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细 胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因 其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细 胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色。
间体：由细胞膜内褶形成的一种管状、层状或串状物，一 般位于细胞分裂的部位或附近。
间体 间体的功能:
▪参与隔膜形成 ▪与核分裂有关 ▪类线粒体功能
3、拟核（或核质体、核区） 由大型环状双链DNA纤丝不规则地折叠或缠绕而构成
的无核膜、核仁的区域。
细菌DNA：长度一般为1~3mm
例：大肠杆菌的DNA长约1mm。
3、螺旋菌
弧菌
例：霍乱弧菌、逗号弧菌
螺旋菌
干酪螺菌
螺旋体
梅毒密螺旋体
细菌的特殊形态
影响细菌形态的因素
培养时间、培养温度、培养基成分、浓度、pH值 等环境条件对细菌形态都有明显的影响。
一般处于幼龄阶段和生长条件适宜时，细菌形态正 常、整齐，表现出特定的形态。
在较老的培养物中，或不正常的条件下，细胞常出 现不正常形态，尤其是杆菌，有的细胞膨大，有的出 现梨形，有的产生分枝，有时菌体显著伸长以至呈丝 状等异常形态。若将它们转移到新鲜培养基中或适宜 的培养条件下又可恢复原来的形态。
生长迅速的细菌在核分裂之后细胞往
往来不及般只
细 菌（Bacteria)
细菌是单细胞原核微生物，个体微小， 形态简单，多以二等分裂方式繁殖。在自 然界中，细菌分布最广、数量最多。 细菌的形态构造及其功能 细菌的群体形态
一、细菌的形态构造及其功能 （一） 形态和染色
1. 球 菌
2. 杆 菌
短杆菌
长杆菌 梭状芽孢杆菌
2. 杆 菌 杆菌细胞两端的形态特征
细菌的染色
革兰氏染色法
革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦 医生Hans Christian Gram于1884年创立。
基本步骤： 涂片固定→ 结晶紫初染1min →碘液媒染1min
→95%乙醇脱色0.5min →沙黄复染1min 结果:
革兰氏阳性菌——紫色； 革兰氏阴性菌——红色。
（二）细菌的细胞构造
（2）细胞壁的化学组成与结构 化学组成：
革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较
成分
肽聚糖 磷壁酸 类脂质 蛋白质
占细胞壁干重的%
革兰氏阳性细菌
含量很高（30-95） 含量较高（<50） 一般无（<2）
无
革兰氏阴性细菌
含量很低（5-0） 无
含量较高（～20） 含量较高
化学结构：
细胞壁的基本骨架——肽聚糖 肽聚糖：是由N-乙酰胞壁酸（NAM）和N-乙酰葡 糖胺（NAG）以及少数氨基酸短肽链组成的亚单 位聚合而成的大分子复合体。 肽聚糖单体：是由NAG 、 NAM 、肽尾、肽桥构 成。
阳性菌 阴性菌
G+ 细菌和G-一系列生物学特性的比较
比较项目
G＋ 细菌
G-细菌
革兰氏染色反应 能阻留结晶紫染成紫色
肽聚糖层
厚，层次多
磷壁酸
多数含有
外膜
无
脂多糖（LPS） 无
类脂和脂蛋白含量 低
鞭毛结构
基体上着生2个环
产毒素
以外毒素为主
对机械力的抗性 强
细胞壁抗溶菌酶 弱
可经脱色而复染成红色 薄，一般单层 无 有 有 高 基体上着生4个环 以内毒素为主 弱 强
细胞膜液态镶嵌模型
膜是由球形蛋白与磷脂 按照二维排列方式构成的流 体镶嵌式，流动的脂类双分 子层构成了膜的连续体，而 蛋白质象孤岛一样无规则地 漂流在磷脂类的海洋当中。
(3) 细胞膜的功能 ＊能选择性控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送 ＊是维持细胞内正常渗透压的结构屏障 ＊是合成细胞壁和糖被有关成分（如肽聚糖、磷壁酸、脂 多糖和荚膜多糖）的重要场所 ＊膜上含有与氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的 酶系，是细胞的产能基地 ＊是鞭毛基体的着生部位，并可提供鞭毛旋转运动所需的 能量。
❖青霉素的作用
作用于肽聚糖肽桥的 联结，即抑制肽聚糖 的合成，故仅对生长 着的菌有效，主要是 G+菌。
2、细胞膜
细胞膜是紧贴细胞壁内侧包围细胞质的一层柔软、富有弹性的 半透明薄膜。 (1) 细胞膜的化学组成
主要包括
蛋白质 磷脂 糖类 少量核酸
(2) 细胞膜的结构 1972年Singer和Nicolson提出的细胞膜液态镶嵌模型。