果实采后品质测定方法总结

果实采后品质测定方法总结

将整株按照花球、茎、叶、根4个器官分割，清洗，叶片取植株中部健壮的成熟叶片，重复间取相同部位。

含水量测定

所需仪器：烘箱，天平，滤纸

取样，洗净，105℃杀青2小时，70℃烘干至恒重，测定其含水量

可溶性固形物测定

一、试剂：

二、仪器：手持式折光仪（手持式糖度计）、研钵、滴管、滤纸、擦镜纸、蒸馏水

三、实验步骤

1.样品制备：取5.0 g果实放入研钵磨碎，4000 r/m，离心10 min取汁液。

2.调零：打开手持式折光仪棱镜盖板，用擦镜纸轻擦折光镜面，滴几滴蒸馏水于折光镜面上，合上盖板，将仪器对向光线，由目镜观察，转动棱镜旋钮，使视野分成明暗两部分。若有偏离，用专用螺丝刀补偿器旋钮，使视野分为黑白两色，同时使明暗分解线与标尺上的0位重合。打开盖板擦干水分

3.测定，滴入样品在折光镜上，并读取读数。重复三次，计算平均值和标准偏差。

叶绿素测定

一、仪器设备：1）分光光度计；2）电子顶载天平（感量0.01g）；3）研钵；4）棕色容量瓶；5）小漏斗；6）定量滤纸；7）吸水纸；8）擦境纸；9）滴管。

二、试剂：1）80%丙酮；2）石英砂；3）碳酸钙粉。

三、实验步骤

1）取新鲜叶片（或其它绿色组织）或干材料，擦净组织表面污物，剪碎（去中脉），混匀。

2）称取剪碎的新鲜样品0.5g ，共3份，分别放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及2～3ml 丙酮，研成均浆，再加丙酮10ml，继续研磨至组织变白。静置3～5min。

3）取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到25ml棕色容量瓶中，用少量丙酮冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。

4）用滴管吸取丙酮，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用丙酮定容至25ml，摇匀。

5）把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内，以80%丙酮为空白，在波长663nm和645nm 下测定吸光度。

四、实验结果计算

叶绿素a的含量= 12.7⨯OD663 - 2.69⨯OD645

叶绿素b的含量= 22.9⨯OD645 - 4.86⨯OD663

叶绿素a、b的总含量= 8.02⨯OD663 + 20.20⨯OD645

Brandford 法检测蛋白质含量

一、仪器和试剂

1.仪器：分光光度计、移液抢、具塞刻度试管、烧杯、量瓶、研钵

2.试剂：考马斯亮蓝G-250染料、牛血清蛋白、90%乙醇、85%磷酸

考马斯亮蓝G-250:称取100mg 考马斯亮蓝，溶于50ml90%乙醇中，加入100ml85%的磷酸，再用蒸馏水定溶到1L ，贮于棕色瓶中。

标准牛血清蛋白溶液：100ug/ml 牛血清蛋白：称取牛血清蛋白25mg 加水溶解并定溶至100ml ，吸取上述溶液40ml ，用蒸馏水稀释至100ml 即可。 二、 实验步骤 1. 标准曲线的绘制

取6支试管，按下表加入试剂（0～100ug/ml 的标准蛋白）。混合均匀后，向各管中加入5ml 考马斯亮蓝溶液，摇匀，并放置5min 左右，用1cm 光径的比色皿在595nm 下比色测定吸光度。以蛋白质浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 绘制标准曲线的各试剂加入量

管号 1 2 3 4 5 6 标准蛋白质/ml 0 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 水/ml 1.00 0.80 0.60 0.40 0.20 0

蛋白质质量/ml 0 20 40 60 80 100

2.样品的测定

（1）样品的提取：称取鲜样0.25-0.5g ，用5ml 水研磨成匀浆后，3000r/min 离心10min ，取上清液1.0ml （视蛋白质含量适当稀释）于试管中（每个样品重复2次）。

（2）加入5ml 考马斯亮蓝溶液，充分混合，放置2min 后在595nm 下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。 四、结果计算

样品中蛋白质含量 ＝

1000

⨯⨯⨯F S T

W V V C (mg/g)

式中：C —查标曲值；VT —提取液总体积；WF —样品鲜重；VS —测定时加样量，ml 。

总糖和还原糖的测定──3,5－二硝基水杨酸法

一、试剂

3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml 容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml。

葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为2.0mg/ml。

6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。

碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。

6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。

0.1% 酚酞指示剂。

二、器材

WFJ UV－2000型分光光度计，水浴锅，电炉，15mm×180mm试管。

三、操作方法

1、葡萄糖标准曲线制作

取5支15mm×180mm试管，按下表加入2.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。

管号葡萄糖标准液（/ml）蒸馏水（/ml）葡萄糖含量（/mg）OD540

0 0 1 0

1 0.

2 0.8 0.4

2 0.4 0.6 0.8

3 0.6 0.

4 1.2

4 0.8 0.2 1.6

5 1 0 2

在上述试管中分别加入DNS试剂2.0ml，于沸水浴中加热2min进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水9.0ml，摇匀，在540nm波长处测定光吸收值。以1.0ml蒸馏水代替葡萄糖标准液按同样显色操作为空白调零点。以葡萄糖含量（mg）为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。

2、样品中还原糖的提取

准确称取0.5g藕粉，放在100ml烧杯中，先以少量蒸馏水(约2 ml)调成糊状，然后加入40ml 蒸馏水，混匀，于50℃恒温水浴中保温20min，不时搅拌，使还原糖浸出混。过滤，将滤液全部收集在50ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，即为还原糖提取液。

3、样品总糖的水解及提取

准确称取0.5g玉米淀粉，放在锥形瓶中，加入6mol/L HCl 10ml，蒸馏水15ml，在沸水浴中加热0.5h，取出1～2滴置于白瓷板上，加1滴I-KI溶液检查水解是否完全。如已水解完全，则不呈现蓝色。水解毕，冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，以6N NaOH溶液中和至溶液呈微红色，并定