茶叶中有效成分的提取
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实验二十茶叶中有效成分的提取
一、实验目的
1. 通过茶叶和咖啡中有效成分的提取了解固、液相分离方法; 2.掌握吸滤、萃取、分液、升华等实验操作。
二、实验原理
咖啡因(caffeinum)化学式为 GH o N^-NOd , 3, 7-三甲基-2 , 6-氧嘌呤),是具有绢丝光泽的一种白色针状晶体。其结构式为
100 C时晶体失去结晶水后开始升华,120 C时升华显着,至178C时升华很快。无结晶水物的熔点为 235C, 能溶于水 (2%)、乙醇(2%)、苯(1%)、氯仿 %)等。
由于其在氯仿中溶解度较大,可通过萃取茶叶的水浸渍液提取咖啡因。根据其易升华的性质,可用升华法进一步提纯咖啡因。
茶多酚是由 30种以上的酚类物质组成的混合物。其中儿茶素(又名儿茶酚)含量最高,在茶多酚总量中
占 60%— 80%。其结构式为茶多酚在乙酸乙酯中溶解度较大,并且能与重金属作用产生沉淀,故可用沉淀、萃取等方法来提取茶多酚。也可用此方法从细、粗咖啡中提纯咖啡因作为对照实验。
三、实验用品
仪器和材料烧杯(50、100、200mL)、50rnL量筒、150mL分液漏斗、布氏漏斗、吸滤瓶、酒精灯、点滴板,真空泵(或水流吸气泵)、托盘天平、剪刀、铁架台、滤
纸。
药品饱和石灰水、5%氢氧化钠溶液、氨水、2mol.L-1 硫酸、盐酸、氯仿、乙酸乙酯,茶叶(当年新茶,
隔年陈茶)、咖啡(粗,细)、氢氧化钙固体、氯酸钾固体,酸性碘一碘化钾试剂。
四、实验内容及操作
1.方法 I- 热水浸渍法
(1)称取茶叶,剪碎,浸渍于盛有200mL蒸馏水的烧杯中;
(2)加热煮沸约半小时;
(3)过滤;
(4)用30mL氯仿分三次(15、& 7mL)萃取滤液,合并氯仿相,先用5煖氧化钠溶液,再用适量水洗涤;
(5)挥发掉有机溶剂 [4] ,得粗咖啡因;
⑹ 用30mL乙酸乙酯分三次(15、8、7mL)萃取氯仿萃取过的水相;
(7)用适量水洗涤萃取液;
(8)挥发有机溶剂,即得茶多酚。
2.方法n —碱液浸渍法
(I)称取茶叶,用剪刀剪碎;
(2)将茶叶放人盛有200mL饱和石灰水的烧杯中;
(3)再向烧杯中投入 2,Og 氢氧化钙固体;
(4)煮沸 30min 后过滤;
(5)将过滤所得清液用 30mL氯仿分三次萃取(15、8、7mL);
(6)合并有机相,先用 5%氢氧化钠溶液洗涤,再用适量水洗涤;
(7)将洗涤后的氯仿相挥发溶剂 [41 可得粗咖啡因;
(8)将过滤所得固相用硫酸溶液100mL转溶,搅拌10min以上;
(9)过滤,固相弃去;
(10)滤液用乙酸乙酯萃取,共 30mL分三次(15、8、7mL);
(II)洗涤有机相,挥发溶剂 [4] 可得茶多酚。
3.实验结果实验所得数据填入下表
4.咖啡因的升华提纯和定性检验
(1)升华提纯咖啡因:在底部留有咖啡因的烧杯中部平放一张定性滤纸,用酒精灯(或煤气灯)隔着石棉网加热烧杯待其升华,冷却后取下滤纸,可观察到滤纸上附着白色针状晶体。
(2)咖啡因定性检验原理
(3)粗咖啡因的定性检验:取粗产品少许于干燥的点滴板上,喷上酸性碘一碘化钾试剂,可见到有棕色、红紫色和蓝紫色物质生成。(棕色表示有咖啡因存在,红紫色表示有茶碱存在,蓝紫色表示有可可碱存在。)
(4)咖啡因的定性检验:取提纯后的咖啡因少许,加盐酸1ml_ 溶解,加氯酸钾,在通风橱中加热蒸发,待
于,冷却后滴加氨水数滴,溶液变为紫色。
5.从咖啡中提取咖啡因为比较茶叶和咖啡两种饮品中咖啡因的含量,我们还可以从咖啡中提取咖啡因。
(1)具体过程
①称取咖啡放在装有 200mL水的烧杯中;
②煮沸 20min[5]:
③过滤;
④滤液用30mL氯仿分三次萃取,分别为 15、8 7mL;
⑤洗涤;
⑥挥发溶剂可得咖啡因。
(2)实验结果
将实验所得数据填入下表
五、实验注释
[1] 用研钵研细的茶叶会因其颗粒过小而影响,所以本实验改用剪刀剪碎。
[2] 过滤效率可能不太理想,此时可及时更换滤纸或先离心再过滤。
[3]有时有机相乳化较为严重,这时可用饱和食盐水洗涤,并可延长静置时间,必要时可离心。
[4]可水浴加热,温度不宜太高,以恰好使有机物沸腾为准。
[5]如咖啡较粗,煮沸时间可适当延长。
[6]粗咖啡的咖啡因产率没有细咖啡高,可能原因是粗咖啡的浸渍效果不如细咖啡的好。
六、讨论与研究
1 .茶叶中的天然物质
茶是我国的传统饮品,茶具有的种种功能都与茶叶中所含的天然物质有关。茶的鲜叶中含有 75%-80% 的水分,干叶中含量为 20%~25%。干叶中包含许多种化合物,分为蛋白质、茶多酚、生物碱、氨基酸、碳水化合物、矿物质、维生素、色素、脂肪和芳香物质等。
茶叶中的生物碱类,包括咖啡碱、茶碱、可可碱、腺嘌呤等。茶叶中咖啡碱含量最高,占% %泡
茶时有 80%的咖啡碱能溶于水中,是苦味成分之一。咖啡因是弱碱性化合物,易溶于氯仿、水、热苯等。
咖啡因具有提神醒脑、消除疲劳之功效。咖啡因是嘌呤的衍生物,化学名称是
1,3,7- 甲基-2 , 6- 二氧
嘌呤,其结构式与茶碱、可可碱类似。
茶叶中的氨基酸具有独自的特点,包含一种在其他生物中没有的氨基酸——茶氨酸。氨基酸在茶叶中有二三十种,包括多种人体必需的氨基酸。在茶叶的氨基酸中,茶氨酸的含量最高,占氨基酸总量的一半以上,具有甜味和鲜爽味。它和其他氨基酸通过种种途径参与茶叶香、味的形成,从而影响茶叶的品质水平。
茶叶中有约 30 种矿物质,主要成分是钾,约占矿物质总量的50%,磷约占 15%,其次是钙、镁、铁、
锰、氯、铝,还有微量成分,如锌、铜;、氟、钠、镍等。与其他植物相比,茶叶中钾、氟、铝等含量很高。夏天流汗过多时喝茶可以补充矿物质及水分,故喝茶解渴是有根据的。
茶叶中含有十多种维生素(A、Bi 、B2、B3、Bs、B6、C、D、E、K--),其中 A、D、E、K 属于脂溶性维生素,不溶于水,故难以从喝茶中摄取,不过可由茶叶制成的糕点中获得。而其他维
生素则为水溶性,可从饮茶过程中获得。一般人每天喝三到五杯的绿茶可获得足够的维生素C,在蔬菜水
果不足的地方是相当重要的。
茶叶中的脂肪类包括磷脂、硫脂、糖脂、甘油三酯等,都是人体必需的脂肪酸,是脑磷脂、卵磷脂的主要组成部分。此外还有香气成分,成品茶中被确认的香气成分达700 种。不同的茶类,其香气成分
的种类和含量不同。
茶一般可以分为红茶、绿茶、花茶、乌龙茶、紧压茶五种,其中绿茶的主要成分是维生素以及具有药理作用的茶多酚、生物碱、脂多糖、黄酮、水分及灰分等。
2.茶多酚茶叶中健康功能最大、含量很高的成分是茶多酚。茶多酚是茶叶中30多种酚类化合物的总称,是多酚类化合物复合体。茶多酚包括儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等四大类物质。茶多酚的含量占茶叶嫩
稍干总质量的20%^ 35%
在茶多酚总量中,儿茶素约占 70%,它是决定茶叶色、香、味的重要成分。黄酮类物质又称花黄素,是形成绿茶汤色的主要物质之一,含量占于物质总量的1%~20%;)花青素呈苦昧,如果花青素多,茶叶品质不好,造成红茶发酵困难、绿茶滋味苦涩;茶叶中酚酸含量较低,包括没食子酸、茶没食子素、绿原酸、咖啡酸等。
茶多酚含有很多的多酚性羟基,易氧化成醌类而提供质子H+,具有很强的抗氧化性。茶多酚对活性
氧自由基有很强的清除作用,其清除能力比维生素E和维生素C强得多。其中儿茶素(EGCG)青除氧自由
基的能力是维生素 C的67倍,茶多酚复合体清除氧自由基的能力是维生素C的64倍。茶多酚的主要功
能有:抗脂质过氧化,预防衰老;降“三高”(高血压、高血糖、高血脂),有助于抑制心血管疾病,具有强心功能;有助于预防和抗癌;能保护肾脏和肝脏;有助于预防和治疗辐射伤害;具有防龋固齿、清除口臭的作用;能减轻烟酒对人体的损伤;舒缓肠胃紧张,具有防炎止泻和利尿的作用以及抗菌抗病毒作用;能降脂助消化;促进维生素 C 的吸收,防止坏血病;改进人体对铁的吸收,有效防止贫血;还有美容护肤、提神解乏、提高免疫力等功
能。