牛奶中塑化剂的检测方法

随着塑化剂的风波愈演愈烈，2011年6月1日卫生部将包含邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）在内的17种等邻苯二甲酸酯类物质列入《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单（第六批）》。

曾早在2008年建立了针对欧盟指令2007/19/EC 中禁止与食品接触的6 种邻苯二甲酸酯(BBP、DBP、DEHP、DNOP、DINP 和DIDP) 的RP-HPLC 测定方法，今将此方法与各位同仁共享，希望为邻苯二甲酸酯的检测提供一个新的分析路径。

牛奶中邻苯二甲酸酯的测定

发布人：周德振，

1 适用范围

适用于乳及乳制品中邻苯二甲酸酯的检测

2 样品准备/提取

2.1准确称取2.0g 牛奶样品置于具塞玻璃管中,分别加入2.0mL 甲醇、4.0mL 正己烷-甲基叔丁基醚( V/V = 1∶1) 后,涡旋振荡提取1min ,在3000 r/min 转速下离心2min ,取上清液,再用4.0mL正己烷-甲基叔丁基醚(V/V = 1∶1) 重复提取1 次,合并两次上清液,于45 ℃水浴中氮吹至干,用正己烷定容至4.0mL 、摇匀,加盖后冷冻30min ,然后在3000 r/min 转速下离心2min ,取上清液,再用正己烷定容至4.0mL 、混匀,后平分为2 份溶液,一份用作BBP、DBP 的净化,另一份用作DEHP、DNOP、DINP 和DIDP的净化。

3 样品净化

3.1 BBP、DBP 的净化分取2.0mL 上节中提取的样液,加入2.0mL 乙腈,涡旋振荡提取1min ,静置分层后弃去正己烷层,再加入1.0mL 正己烷,振荡、分层后弃去正己烷层,乙腈相氮吹至干,用1.0mL 甲醇定容、进样。

3.2 DEHP、DNOP、DINP 和DIDP 的净化- ProElut Silica 500 mg/3 mL

(1)活化：依次加入40 mL0.7%乙酸乙酯的正己烷溶液、5mL正己烷，流出液弃去；

(2)上样：加入2.0mL 上节中提取的样液，流出液弃去

(3)淋洗：加入3.0mL 0.7%乙酸乙酯的正己烷溶液，流出液弃去

(4)洗脱： 19mL 0.7%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱，收集流出液，于45 ℃水浴中氮吹至干,用1.0mL 甲醇定容、进样

4 分析条件

色谱柱： Platisil ODS，250 mm×4.6 mm，5μm（Cat.#99503）

流速： 1.0 mL/min

检测器：* UV 224nm

柱温： 30℃

进样量：20 μL

流动相：乙腈:水=99:1（体积比）

5 实验结果

牛奶样品固相萃取后的色谱图

标准品在Platisil ODS 柱( C) 上保留的色谱图

1-BBP 30μg/mL , 2-DBP 0.30μg/mL , 3-DE HP 1.5μg/mL , 4-DNOP 9.0μg/mL , 5-DINP 9.0μg/mL , 6-DIDP 9.0μg/mL