木瓜蛋白酶

木瓜蛋白酶的应用



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2.在医药行业中的应用：治疗水肿、炎症、驱 虫、已经清除创面，加速伤口愈合…… 3.在纺织行业中的应用：可用于处理羊毛、蚕 蛹脱胶、蚕丝精炼，能达到手感柔软、舒适、 抗收缩、抗张强度等效果。 4.在皮革行业中的应用：利用木瓜蛋白酶制成 脱毛剂，鞣制皮革，具有毛孔细腻，皮纹光亮 效果。
木瓜蛋白酶的作用机制

在His-159作用下Cys-25去质子化，而 Asn-158能够帮助His-159的咪唑环的摆 放，使得去质子化可以发生；然后Cys25亲核攻击肽主链上的羰基碳，并与之 共价连接形成酰基－酶中间体；接着酶 与一个水分子作用，发生去酰基化，并 释放肽链的羰基末端。
木瓜蛋白酶的提取工艺



取新鲜乳汁→搅拌使其液化并过滤→加入等量 含0.2 mmol/ EDTA, 1 mmol/ NaCl 和 0.04mol/ Cys的溶液,并混均→加入已溶解的 丹宁溶液至浓度达到0.1%,静置→用盐酸调pH 至3.4 → 离心→沉淀→真空干燥→粉碎后即得 粗酶。（用该法制备木瓜蛋白酶设备简单,投 资少, 而且酶稳定性好,适合用于食品及制革等对酶 纯度要求不高的工业。） 实验室用酶需进一步纯化
木瓜蛋白酶的固定化研究




固定化酶是近代生物技术的重要手段,利 用不同载体制备固定化木瓜蛋白酶,可以 大大节约用酶,并能反复利用。 我国在这一领域主要有两个方面 1.纤维素固定化木瓜蛋白酶的研究 2.琼脂固定化木瓜蛋白酶的研究
木瓜蛋白酶的应用

1.在食品行业中的应用：肉类嫩化，啤 酒澄抗寒……
木瓜蛋白酶活性测定方法及特点



1.以酪蛋白为底物的紫外分光光度法 （操作简 便,成本低,适于酶纯化过程中的活性比较、系 列产品的酶活性测定） 2.茚三酮显色法（操作烦琐,但所需仪器简单, 在条件简陋的地区也可以用） 3. BAEE(苯甲酰-L-精氨酸-乙酯)法（反应稳 定、重复性好,适于酶学性质的理论研究和试剂 酶的活性测定。 ）
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶的基本信息

木瓜蛋白酶（papain）简称木瓜酶，又 称为木瓜酵素，别名番木瓜酶,木瓜朊酶, 番瓜酵素，是一类琉基蛋白酶，广泛地 存在于番木瓜(Carie a p a p a y a)的根、 茎、叶和果实内其中在未成熟的乳汁中。 它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生 安全等特点 。
木瓜蛋白酶的组成结构

木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为 23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸 残基。至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性 中心部位，他们分别是Cys25、His159和 Asp158。
木瓜蛋白酶的理化性质
木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下 均能分解蛋白质的蛋白酶。木瓜蛋白酶外观为 白色至浅黄色的粉末，微有吸湿性；木瓜蛋白 酶溶于水和甘油，水溶液为无色或淡黄色，有 时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等 有机溶剂。木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链 内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛 的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等 有较强的水解能力，但几乎不能分解蛋白胨。