磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷

磷钼蓝分光光度法测定海水中的活性磷酸盐无机磷

1 适用范围和应用领域

本法引自海洋监测规范，适用于海水中活性磷酸盐的测定。

水样经0.45 μm 滤膜过滤后贮于聚乙烯瓶中。若样品采集后不能立即分析，则应快速冷冻至-20℃保存，样品熔化后立即分析。

2 方法原理

在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于882 nm 波长测定吸光值。

3 试剂及其配制

除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为二次水或等效纯水。

3.1 硫酸溶液：c (H 2SO 4)=6.0 mol/L

在搅拌下将300 mL 硫酸(H 2SO 4，ρ=1.84 g/mL)缓缓加到600 mL 水中。

3.2 酒石酸锑钾-钼酸铵混合溶液

钼酸铵溶液：

溶解28 g 钼酸铵〔(NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O 〕于200 mL 水中。溶液变混浊时，应重配。 酒石酸锑钾溶液：

溶解6 g 酒石酸锑钾(C 4H 4KO 7Sb·2

1H 2O)于200 mL 水中 ，贮于聚乙烯瓶中。溶液变混浊时，应重配。

混合溶液:

搅拌下将45 mL 钼酸铵溶液加到200 mL 硫酸溶液中，加入5 mL 酒石酸锑钾溶液，混匀。贮于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。

3.3 抗坏血酸溶液

溶解20 g 抗坏血酸(C 6H 8O 6)于200 mL 水中，盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存，可稳定1个月。

3.4 磷酸盐标准贮备溶液：ρp =0.300 mg/mL

称取1.318 g 磷酸二氢钾(KH 2PO 4)，优级纯，在110～115℃烘1～2 h)溶于10 mL 硫酸溶液及少量水中，全量转入1 000 mL 量瓶，加水至标线，混匀，加1 mL 三氯甲烷(CHCl 3)。此溶液1.00 mL 含0.300 mg 磷。置于阴凉处，可以稳定半年。

3.5 磷酸盐标准使用溶液：ρp =3.00 μg/mL

量取1.00 mL 磷酸盐标准贮备溶液至100 mL 量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCl 3)。此溶液1.00 mL 含3.00 μg 磷。有效期为一周。

4 仪器及设备

分光光度计。

5 分析步骤

5.1 绘制标准曲线

5.1.1 量取磷酸盐标准使用溶液0，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00 mL于50 mL具塞比色管中，加水至50 mL标线，混匀。各浓度依次为0，0.030，0.060，0.120，0.180，0.240 mg/L。

5.1.2 各加1.0 mL混合溶液，1.0 mL抗坏血酸溶液，混匀。显色5 min后，注入5 cm测定池中，以蒸馏水作参比，于882 nm波长处测定其吸光值A i。其中零浓度为标准空白吸光值A0。

5.1.3 以吸光值(A i-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。

5.2 水样测定

量取50 mL经0.45 μm微孔滤膜过滤的水样至具塞比色管中，按标准曲线绘制的步骤测定吸光值A w。

同时量取50 mL水按相同步骤测定分析空白吸光值A b。

6 记录与计算

据(A w-A b)值在标准曲线上查得水样的磷酸盐浓度(mg/L)。

7注意事项

磷钼蓝颜色在4 h内稳定。