HPLC手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体

巴氯芬 （ 化学名 一 一 一 ４ 氯一 氨基丁酸 ） 是应用于临床的选择性 Ｇ Ｂ ＡＡ
２
受体激动剂，其化学结构见图 ｌ 目 ，临床使用的仍是巴氯芬外消旋体 。 。 前 据文献报道 Ｒ一一 （ 巴氯芬的生理活性是 ｓ（ ） 巴氯芬的 １０ ） ＋ 一 ０ 倍“ 。现有拆分
方 法有 毛细管 电泳法 、柱前 衍 生化 法 和手 性 固定相 法㈣ ，但 用 ＨＰ Ｃ 手 性 Ｌ ｃ Ｉ
卢建 国 ，王立艳 ，苏立强
（ ．黑龙江农垦职业学 院，哈尔滨 １０ ２ ；２ １ ５ ０ ５ ．齐齐哈尔大学 化学与化学工程 学院 ，黑 龙汀 齐齐哈尔 １ １０ ６０ ６）
摘要 ： 建立 了以羧 甲基一 一 环糊精为手性流动相添加剂 ，在反相液谱条件下拆分 巴氯芬对映体 的方法 。研究了手
学试 剂公 司 ）；羧 甲基 一 一 环糊 精 （ 验室 自己合成 ）；巴氯芬原 料 药 （ 实 武汉 祥 和精细 化工 有限公 司 ）。 １２ 羧 甲基 一 一 糊精 的 制备 ． 环
参照文献【 的方法合成羧甲基一 环糊精 ， ５ １ 一 并进行红外表征和取代度的 定 。 ４
性添加剂的种类及 浓度 、流动相组成 、ｐ 值及流速等 崇对拆分的影响 。流动千 为 甲醇 、乙腈 、水 ，体积 比为 Ｈ Ｈ ９ ５： ，其中含 ２ ０ｇ Ｍ一 Ｃ ０： ５ ． ＬＣ 口一 Ｄ，ｐ ０ ／ Ｈ值 ５９ ，流速 ０６ ｌｍｎ ５ ０ｍｄ ｉ，检测波 长 ２ １ ｍ，分离度为 １ １ ３ ｎ ． 。该方 法 ３
作者 简介 ：卢建 国 （１５ 一 ） ９ ７ ，男 ，河 南新 野 人 ，副 教 授 ，主要从 事食 品化 学教学 与研 究工 作 ，ｓ ２２ ６ ｏ ｌ ０ ＠１３ ｍ。 ｑ
第４ 期
ＨＬ Ｐ Ｃ手性 流动 相添加剂法拆分 巴氯芬 对映体
２２ 手 性添 加剂 的选 择 ．
考察以 一 Ｄ 、Ｃ — Ｄ作添加剂对巴氯芬对 映体拆分 的情况 （ Ｃ Ｍ— Ｃ 见图 ２ ）。巴氯芬对映体在 一 Ｄ Ｃ 体系中不能分离 ， Ｃ 一３ Ｃ 在 Ｍ ／一 Ｄ体系中达到 良好分离。可能是由于 一 Ｄ在普通溶剂中溶解度小 ， ｃ 改性后 Ｃ 一 Ｃ Ｍ 一 Ｄ溶解度增加 ，利于选择性的提高 ；其次 ，羧甲基化后环糊精空腔高度略有增加 ，对客体的包合 ＞ 、 Ｅ 一 蟊 ∽ 能 力增强 ；再者 ，巴氯 芬结 构 中胺 基可 与 Ｃｍ 一 Ｄ 空 腔边 缘 的羧 甲基产 生 氢键 甚至 静 电作 用 。３种 因 ’ Ｍ一 ０ Ｃ 如 ∞ 加 素使得 Ｃ 一 Ｃ Ｍ 一 Ｄ可与拆分的分子形成更加稳定的包合物 ，同时，加大 了两对映体的差别 ，成功拆分。
ＣＯＯＨ
流动相添加剂法拆分 巴氯芬对映体还未见报道。
图Ｉ巴 芬 结 氯 的 构
本文以羧甲基一 环糊精 （ Ｍ一 Ｃ 为手性流动相添加剂 ，拆分巴氯芬对映体 。在优化条件下 ， 一 Ｃ 一 Ｄ） 对 映体分 离度 达 １ ， 法无 需 昂贵 的手性 柱 ， 无需 繁琐 的柱前衍 生 化 ， 法简便 快 速 ， ． 此 ３ 也 方 相对 标 准偏差小 。
０
２８ ．
４８ ６ ８ ８ ８ １ ． ｌ ｌ ８ ． ． ０ ８ ２８ ４
１ 实验部分
１１ 仪器 与试剂 ．
高效液相色谱 （ Ｐ Ｃ） Ｈ Ｌ 系统 （ 大连依利特分析仪器有限公司 ） ２０Ｉ ：Ｐ ０ 高压恒流泵 、Ｕ ２０ ｌ Ｖ ０ Ⅱ紫外可 变波长检测器 、 ｅｒ ９ 色谱工作站 ；Ａ ３２ 超声波清洗器 （ Ｅ ｈｏ ８ ｍ Ｓ １０ 天津奥特赛恩斯仪器有限公司 ） 。 甲醇 、乙腈 （ 色谱纯 ， 天津市科密欧化学试剂开发中心 ） 一 ； 环糊精 （ 一 Ｄ，中国医药集团上海化 Ｃ
１４ 实验方 法 ．
准确称取 巴氯芬 Ｏ ｌ ｇ ． Ｏ ，置于 １ Ｌ容量瓶 中，加入少量三乙胺 ，超声溶解并稀释至刻度 ，进样前 Ｏ ０ ０ｍ 经 ０ ５ｍ微孔滤膜过滤。在 １ 条件下进行巴氯芬对映体的拆分。 ．￣ ４ｔ ． ３
２ 结果 与讨论
２１ 羧 甲基 一 一 糊精 的红 外 表征 ． 环
１３ 色谱条 件 ．
色谱分离柱 ：Ｏ ＳＨ ｐｒ ｌ ４ Ｉ Ｄ ｙｅ ｉ（ ． Ｔ ２ ０ Ｈ， ｐ ， ｓ ６ ｌ ０ ｍ ｌ ５ ｒ 大连依利特公司 ）；流动相 ：甲醇 、乙腈 、 ｍ× ｏ 水体 积比为 ９ ５： ２ ０ ／ Ｍ 一 Ｄ） Ｈ ５ ５ ０： ５（ ． ＬＣ ～ Ｃ ｐ ＝ ． ；流速 ０ ０ Ｌ・ ｉ ；紫外检测波长 ２ １ ｍ。 ０ｇ ９ ． ６ ｍ ｒｎ ａ ～ ３ｎ
简便 、快 速 、相对偏差小 。
关键词 ：羧甲基一Ｂ一 环糊精 ；流动相添 加剂 ；高效液相色谱法 ；巴氯芬 ；对映体
中图 分 类 号 ：０ ５ ． ２ ６ ７７ 文献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １０ — ８ Ｘ２ １）４ ０６ — ３ ０ ７ ９ ４ （０ １ — ０ ０ ０ ０
第 ２ 卷第 ４ ７ 期
２ １ 年 ７月 ０１
齐 齐 哈 尔 大 学 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｉ ｈ ｒ ｉｅ ｓｔ ｏ ｒ ａ ｑｉａ ｖ ｒｉ ｏＱ Ｕｎ ｙ
ห้องสมุดไป่ตู้
Ｖｏ． ７ Ｎ ． １ ． ｏ４ ２ Ｊ ｌ ，０１ ｕ ｙ２ ｌ
Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ手性流 动相添加剂法拆分 巴氯芬对 映体
对合成的 Ｃ 一 Ｃ Ｍ 一 Ｄ进行红外表征 ，Ｃ 一 Ｃ Ｍ 一 Ｄ的 Ｉ Ｒ谱图中新增 了ｌ １ ，１ ０ ，１ ３ ｍ 的醚键 ７ ２ ５ｃ ４ ６ ３ 吸收峰，证明有羧 甲基 的存在 ，与文献结论一致 。经测定平均取代度为 ０ ５ ．。 ８
收稿 Ｅ期 ：２ １ － ３ ２ ｔ ０ １０— ５