稻曲病菌田间接种方法研究

件进行优化 以获得最佳接种时期、 接种病原菌体和接种方法。试验表明， 在水稻破 口前 ４ｄ注射接种 茵丝 一分 生孢 子的混合 菌体 为最佳组合方法， 此时病粒率最高， ｌ．５％ ； 达 ３７ 始穗期和齐穗期发病率均为 ０ 。为稻 曲病 的侵染 时期 、 染路径研 究提供 应用 基 侵
础。
ＤＡＩ Ｈａ— ｉ Ｚ ｌｘａ， ＨＡＮＧ ｉ ‘， Ｕ ｉｈ ａ ＧＯＮＧ ｏ ｓ ｕ Ｍ ｎ Ｗ Ｚｈ — ｕ ， Ｇｕ － ｈ
（ ｅａｔｅｔ ｆＰａｔ ａ ｏ ｇ ，ｉｈａ ｇｉ ｌ ｒ ｎ ｅｓｙ ５ｃｕｎＹ ’ｎ６ ５ １ Ｃ ａ Ｄ ｐｒ ｎ ｌｎ ｔ ｌ ｙＳｃｕｎＡ ｒ ｕｔ ａ Ｕ ｉ ｒｔ，ｉ ａ ａ ａ ２ ０４，￣ｎ ） ｍ ｏ Ｐｈｏ ｃ ｕｌ ｖ ｉ ｈ
稻 曲病 菌 田 间接 种 方 法 研 究
代海 霞， 张 敏 ， 智 华 ， 国淑 伍 龚
６５１） ２ ０４
（ 四川 农业 大 学 植 物病 理 学 系 ， 四川 雅 安
摘
要： 根据水稻不同生长期的特征 ， 在水稻箭叶与倒二叶叶舌齐平 时套袋处理。用 正交试验对影响人工接种稻 曲病发 病率的条
破 口后接 种 方法 ： 水 稻 破 口后 的始穗 期 和 齐 在 穗期 ， 全 随机 的喷雾接 种 ３种 不 同的病 原菌 菌体 ， 完
Ｐ 液 为对照 。 Ｄ
表 ２ 正 交 试 验 设 计 方 案 与 结 果
Ｔ ｂ ｅ ２ Ｔ ｅ ｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｅ ｔｏ ｃ ｅ ｎ ｅ ｕ ｔ ａ ｌ ｈ ｒｈ ｇ ｎ ｌｔ ｓ ｆｓ ｈ ｍｅ ａ ｄ ｒ ｓ ｌ
１２ ３ 接种 时期 和 方 法 ．． 接 种 时 间 均选 择 在 下 午 ４点 以后 进行 。根据 水 稻 生 长 特 性 ， 验 分 为破 口 试
前 和破 口后两 部 分 进行 。破 口前 接 种 方 法 ： 次 试 本 验 对破 口前 ３个时 期 及 破 口期 ， ４个接 种 时 期 ， ３个 计数板 计 数 ， 丝 接 种 量 以 单 位 容 积 菌 丝 湿 重 计 菌 算 ㈣。 接 种菌 体和 ３种接 种 方 法 进行 拟 水 平 正 交设 计 ， 选
Ｉ 期
代 海 霞 等 ： 曲病 菌 田间 接 种 方 法研 究 稻
表 １ 稻 曲病 菌 田 间接 种 试 验 因素 水 平 表
Ｔａ ｌ Ｔｈ ａ ｔｒｌ ｖ ｌｏ ｎ ｃ ｌｔｏ ｓｉ ｇ ｎ ｉｅ ｉｅ ｎ ｆ ｌ ｂｅ １ ｅ ｆ ｃｏ ｅ ｅ ｆｉ ｏ ｕ ａ ｉｎ Ｕ ｔ ａ ｉ ｏ ｄ ａ ｖ ｎ ｉ ｉ ｄ ｌ ｘ ｅ
ｗ ｔ ｒ ｏ ｏ ａ ｅｉｎ ｂ ａ ｓｏ ｒｉｃａ ｎｃ ｌｔ ｎｏ ｅｄ ｈ ｅｒｓ ｌ ｈ ｗｅ ｈ ｔ ｈ ｐｉ ｌｖ ｃｉａｉｎｐ ｒ ｄ，ｔｅｂ ｓ ｔｏ ｆ ｉｈｏｔ ｇ ｎ ｄ ｓｇ ｙｍｅ ｎ ｆａｔ ｉｌ ｏ ｕａｉ ｎ ｆ ｌ．Ｔ ｅｕｔ ｓ ｏ ｄｔａ ｅｏ ｔ ｈ ｌ ｉ ｆ ｉ ｏ ｉ ｓ ｔ ｍａ ａ ｃｎ ｔ ｅｉ ｏ ｏ ｈ ｅ ｔ ｍｅｈ ｄ ｏ ｉｏｕａ ｏ ｎ ａｃｎ ｉｎ ｐ ｔｏ ｅ ｓｔａｌ ｗｅｅａ ｏｌｗｅ ｎ ｃ ｌｔ ｎ ａ ｄ ｖ ｃ ｉ ｏ ａｈ ｇ ｎ ｈ ｌ ｒ ｓｆｌ ｉ ａｔ ｉ ｏ ｄ：ｆｒｔｅｈｇ ｎ ｉｅ ｃ ｆｄｓａｅ ｉ ｊｓｂ ｆｒ ｒｖｓｅｗｈ ｎ ｍｉｔｒ ｏ ｈ ｉｈ ｉｃｄ ｎ ｅｏ ｉｅ ｓ ｎ４ ｄｉ ｅｏ ｃｅ ａｓ ｅ ｘｕ ｅｏ ｙ ｅ ｆ
西
１Ｏ ｌ
南
农
业
学
报
２１ ０ １年 ２ ４卷 １ 期
Ｖｏ ． ４ １２ Ｎｏ ．１
Ｓ ｕｈ ｓ ｉａＪ ｕ ａ ｆＡｇｉｕｔｒｌＳ ｉｎ ｅ ｏ ｔｗｅｔＣｈｎ ｏ ｒ ｌ ｒｃ ｌ ａ ｃｅ ｃｓ ｎ ｏ ｕ
文章 编号 ： ０ — ８９ ２ １ ） １ １０— ３ １ １ ４ ２ （０ １ ０ —０ １ ０ ０
、
二、 四列 ， 验 因素水平 见 表 １ 正 交试 验设 计 方 试 ，
案见表 ２ 。最 后 用统 计 学 的方 法 将 结 果 进 行 综 合 ，
以接种 Ｐ Ｄ液 为对 照 。
９ ５ ／ ０ Ｌ， 入 １０ ｍ ８ １ｇ １ ０ｍ 加 ０ Ｌ无菌 水捣 碎备用 。 分生 孢 子 接 种 ： 养 １ 培 ０ｄ的 １０ｍＬ震 荡 液通 ０ 过 ８ 纱 布过 滤 ， 无菌 水 冲洗 ， 层 用 冲洗 干净菌 丝上 附 着 的分 生 孢 子 ， 节 孢 子 量 为 ７ ５×１ ｍＬ备 调 ． ０ 个／
毒素不 但影 响种子发 芽 ， 降低 水稻产量 和稻谷 品质 ， 而且对 人 畜有 致 畸作 用 ， 人 们 的健 康构 成 直接 的 对
危 害 ， 为生产 上亟 待解 决 的问题 。 成
１ 材 料 与 方法
１ １ 供试 材料 ．
供试 菌株 ： 曲病菌 （ ｓｌ ｉ ｉｅ ｉｎ ， 四 稻 Ｕｔａ ｎ ｄ ａｖ ｅ ） 由 ｉｇ ｏ ｒ
用 Ｌ （ 正 交 设 计 表 ， 验 因 素 分别 安 排 在 中 第 】 ４） 试
一
菌 丝 接种 ： 培养 ８ｄ的 １０ ｍ ０ Ｌ震荡 液 通过 ８层 纱布过 滤 ， 用无 菌水 冲洗 ， 清洗 干净 菌丝上 附着 的分
生孢 子 ， 下 菌 丝 称 量 湿 重 ， 丝 定 量 为 湿 重 ３ 取 菌 ．
关 键 词 ： 曲病 菌 ； 种 ； 种体 ； 交 设计 稻 接 接 正
中图分类号：４５ １ １４ ￥３ ． １． ９
文献标识码 ： Ａ
Ｉ ｏ ｕ ａ ｉ ｎ Ｍ ｅ ｈ ｄ ｆ Ｕｓｉ ｇｎｏｄ ａ ｖｒ ｎ ｉ ｅｄ ｎ ｃ ｌ ｔｏ ｔ ｏ ｓｏ ｔｌ ｉ ｉ ｅ ｉｅ ｎ Ｆｉｌ ａ
ｈｐ ａ ｎ ｏｉｉｗ ｒ ｏｕａ ｄｂ ｊ ｔ ｇ Ｔ ｅ ｐ ｍ ｍ ｐｒｅｔｇ ｆ ｉ ａｅｇ ｉｓ ａ ３ ７ ｙ ｈｅａｄｅｎｄａ ｅ ｉ ｌｅ ｙｉ ｅ ｉ ． ｈ ｔ ｕ ｃｎ ｅｏ ｓ ｓ ａｎ ｓ ．５％ ： ｈ ｃ ｅｃ ｉ ａｅＷ ｅ ｎ ｃ ｔ ｎｃｎ ｏｉ ｅ ａ ｄｅ ｒ ｗ １ ｔｅｉ ｉ ｎ ｅ ｆ ｓ ｓ ａ ０％ ｎｄ ｏｄ ｅ ｓ
ｉ ． ｒ ｅ ｃ
Ｋ ｅ ｒ ｓ Ｏｓｉ ｇｉｏ ｌ ｉｅ Ｉｏｕａｉｎ；ｎ ｃ ｌ ；Ｏ ｔｏｏ ａ ｅｔ ｙｗｏ ｄ ： ｔ ａ ｎ ｆｅ ｖｒｎ；ｎ ｌｔ ｌ ａ ｃ ｏ Ｉｏｕ ａ ｒｈ ｇ ｎ ｔｓ ｌ
稻 曲病 （ ｉ ａ ｅＳ ｔＲ Ｓ 是 一种世 界性水 Ｒｃ Ｆ ｌ ｍｕ，Ｆ ） ｅ ｓ 稻真菌病 害 ， 曲病 菌 ［ ｓｌ ｉ ｉｅ ｉ ｎ（ ｏｋ ） 稻 Ｕｔａ ｎ ｄａｖｅｓ Ｃｏｅ ｉｇ ｏ ｒ Ｔ ｋｈｓｉ 在水稻 穗部 为 害 ， ａ ａａｈ ］ 产生 稻 曲球 。近 年来 ，
Ａｂ ｌａ ｔ Ａｃ ｏ ｄ ｎ ｏｔ ｅ ｄｆｅ ｅ ｔ ｒ ￣ ｈ ｐ ｒｏ ｓｏ ｅ ｒｃ ｉ ｌ ｓ ｒ ｃ ： ｃ ｒ ｉ ｇｔ ｈ ｉ ｒ ｎ ｏ ｅ ｉｄ ｖ ｒ ｅｆ ｄ．ｔ ｅｅ ｐｅ ｍｅ ｔ 邶 ｃ ｎ ｕ ｔｄ ｂ ａ ｇｎ ｌ ｔ ｎ ｗｈ ｎｔ ｅｌ ｕ ｅ ｏ ｌ ｇ ｇ ｉ ｅ ｈ ｘ ｒ ｎ ｗｌ ｏ ｄ ｃｅ ｙｂ ｇ ｉ ｇｔ ｍｅ ｔ ｅ ｈ ｉ ｌ ｆｆ ｉ ￣ａ ｇ ａ
川农业大 学农 学 院植 物病理 学研究 室提供 。
水稻 供试 品种 ： 冈优 ３ ５ 籼 型 三 系 杂 交水 稻 ， ０，
由四川隆平 高科种业 有限公 司提供 。
１ ２ 试 验方 法 ．
接 种 技术 是开 展 稻 曲病 田间初 侵染 源 、 原 菌 病
收 稿 日期 ：００一ｌ ０ ２１ ０— ｌ
由于气候 、 品种 和稻草还 田等栽培 技术 的变化 ， 加之
侵染时期 、 侵染过程 、 品种 （ 材料 ） 的抗性鉴定 、 化学防 治关键 时期 和生 物防治等方面研究 的保 障 ， 验对 本试
病原菌接种体 ， 接种生育期 和接种方法进行 了研究 。
对 稻曲病 的防治 没有 得 到足 够 的重 视 ， 曲病逐 渐 稻 跃升 为地方 性 主要病 害之 一 ， 引起严 重 的经 济损失 ， 同时 ， 曲病 菌还 可 产生 一 种毒 素 Ｕ ｔｏｉ 稻 ｓｌ ｎ ｉｘ ， 该
稻破 口前 ４ｄ接种 菌丝 一 子液 的混合 菌 体发 病效 孢 果最好 ， 这与 张君成 － 等稻 曲病 接 种试 验 结 果 中在 ６
数 和病 粒数 ， 最后做 统计学 分析 。
２ 结 果 与 分 析
２ １ 破 口前接种 结果分 析 ．
由表 ２可知 ， 最高病 粒率达 １．４ ６％ ， ３ ７９ 即在破
１２ １ 田间套 袋 ．．
一
在水 稻幼穗 分化期进 行套 袋 ， 每
基金项 目： 科技部科技支持计划（ ０６ Ａ ０ Ａ ５ ； ２０ Ｂ Ｄ ２ ０ ） 四川省公益 性 项 目（０ ８ Ｇ ０ ７ ２０ Ｆ ０ １ ） 作者简介 ： 代海霞 ， ， 女 四川农业大学植物病理学研究生， 为通 讯作者。
ａ ａｌ ａ ｎ ｔｇ ｎ ｄｆｌ ｈ ａ ｉｇｓａ ｅ Ｉ ｐｏ ｉｅ ａｉ ｏｒｓ ｄ ｉｇｔｅｉｆｃｉｎｐ ｒ ｄ ａ ｄｔｅｉｆ ｔｏ ａｅｏ ｓｉ ｇｎ ｉｅ ｉｅ ｎ ｔｅ ｒ ｅ ｒ ｇ ｓ ｅａ ｙ ｉ ａ ｕｌ ｅｄｎ ｔ ．ｔ ｒｖｄ ｄｂ ｓｓｆ ｔ ｙｎ ｈ ｎｅ ｔ ｅ ｉ ｎ ｈ ｎｅ ｉｎｇ ｔ ｆＵ ｔａ ｉｏｄ ａｖｒｎ ｏ ｇ ｕ ｏ ｏ ｃ ｌ
１２ １
西
南
农
业
学
报
２ ３卷
１ ２ ４ 调 查方 法 ．．
在 水 稻蜡 熟 期逐 一 调查 谷粒 总
水稻 破 口前 接种 ， 花发 病 率 明显 ， 颖 而破 口期 、 始穗期 、 穗期 接 种 ， 花发 病 率几 乎 全 为 Ｏ 推 测 齐 颖 ， 稻 曲病菌侵染 寄主 的时期应是 在水 稻破 口前 。在水
用。
菌丝与 孢 子 的混 合 液 ： 培 养 １ 取 ０ ｄ的震 荡 液 ，
调节 孢子量 为 ７ ５×１ ｍ ， ． ０ 个／ Ｌ 菌丝 定 量 湿 重 为 ３ ．
水 平
—
因素 —
接 种 时期 Ａ
接种 菌体 Ｂ
接 种 方法 ｃ
９ ５ ／ ０ ， ８ １ｇ １０ｍＬ 加人 １ ０ｍ ０ Ｌ无菌 水组 织捣碎 备 用 。
ｌａ ａｄｔｅｔｐｓｃｎ ａ ｅ ｓｏ ｖｒ ｐ ｉｇ ｈ ｃｏｓ ｎｕ ｎｉ ｃ ｅｃ ａｅ ｆ ｉ ａ ｅｓ ｔ ｅ ｔｄｅ ｎ ｐｉｉ ｄ ｅｆ ｎ ｏｄｌ ｆ ｒ ｊ ｔ ｆ ｅ ａｐｎ ．Ｔ ｅｆ ｔ ｆ ｅｃｎ ｉ ｉ ｎｅｒｔ ｏ ｃ ｆ ｓ ｍｕ ｗ ｒ ｓ ｉ ａ ｄｏｔ ｚ ｈ ｏ ｅ ｅ ｗｅ ｕ ｏ ｌ ａ ｒｉｌ ｇｎｄ ｓ ｒｅ ｌ ｅ ｕ ｄ ｍｅ
水稻破 口前 ６wenku.baidu.com ９ｄ接种 发病效 果好 有所 不 同 ， 可 这 能与试验 设计 、 种方法 、 接 接种菌体 的不 同而造成 不 完 全一致 的 ； 与蔡洪 生 研究 的在水 稻破 口前 ３— ５
ｄ人工 接种观 察 试验 相 近 ， 同时 也与 王 国 良 研 究
口前 ４ｄ 菌丝 一孢子混合 液注射接种发病率最好 ， 经方差 分析见 表 ３ 接种 时期对 发 病率 影 响极显 著 ， ， 接种菌 体对发 病率 影 响显 著 ， 接种 方 法对 发病 率 不 显著 ， 照 区病 粒 率均 为 ０ 由表 ２可知 病 粒 率破 对 。
处理 分别在 生长一致 的植株 中随机选 择 １０株 。 ５
Ｉ２２ 接 种 菌体 准备 ．．
活 化后 的稻 曲病 菌 接种 在
含 １０ｍ Ｄ培 养 液 的三角 瓶 中 ，８℃ ，６ ｍ ｎ ０ ＬＰ ２ １０ｒ ｉ ／ 条件下 分别震荡 培养 ８ １ 。孢 子接种 量采用 血球 、０ｄ