2食用菌接种室无菌操作及管理细则

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无菌接种操作注意事项

无菌接种操作注意事项
嘿，朋友们！今天咱来聊聊无菌接种操作那些事儿，这可太重要啦！就好比你要去一个特别干净的地方，得把自己收拾得干干净净的，不能带一点儿脏东西进去。

无菌接种啊，首先得把环境整得特别干净。

你想想，要是周围脏兮兮的，那细菌不就像小调皮一样到处乱跑啦！所以啊，操作的地方得认真打扫，该消毒的可一点儿都不能马虎。

然后呢，工具也得好好准备。

那些接种的工具就像是战士的武器，可不能有毛病呀！要是工具不干净，那不就相当于给细菌开了大门嘛。

还有啊，自己的手也得洗得干干净净的。

这手就像是细菌的小乐园，要是不洗干净，它们可就跟着你到处捣乱啦！你说你总不能带着一群小捣蛋去干这么精细的活儿吧。

在操作的时候，可得小心再小心。

就像走钢丝一样，得稳稳当当的。

动作不能太粗鲁，不然把什么细菌都给招惹来了。

你得轻手轻脚的，像对待宝贝一样对待那些要接种的东西。

哎呀，你想想，要是不小心把细菌带进去了，那不就像在一锅好汤里掉进了一粒老鼠屎，全完蛋啦！这可不是开玩笑的呀！
而且啊，接种的时候要专注，不能分心。

不能一会儿想着别的事儿，一会儿又来干这个。

就像开车一样，得全神贯注，不然就容易出事儿。

还有哦，做完了接种，也不能就不管啦。

还得看看有没有什么问题，有没有细菌偷偷跑进去了。

这就像是考试完了要检查一遍试卷一样，可不能马马虎虎的。

总之啊，无菌接种操作可不是闹着玩的，这是一件特别严肃认真的事儿。

咱们得像保护宝贝一样保护那些要接种的东西，不能让细菌有一点儿可乘之机。

要是不注意这些，那后果可不堪设想啊！大家可一定要记住啦！。

无菌室操作程序及要求

无菌室操作程序及要求
1、接种检样前要做以下准备工作：
将台面、地面消毒（7 5%酒精），再清洁。

将所有要用的灭菌玻璃器皿、灭菌培养基等摆放好。

要备好酒精灯、酒精棉球（75%、95%）等。

准备完毕打开紫外线灯，消毒30分钟。

2、带检样进入无菌室，换鞋、更衣、戴帽。

进入后不可随便进出。

手用75%酒精消毒后再进行样品的称量、均质、操作等操作。

接种时要用吸耳球吸样，不可用口直接吸。

若无均质器则用灭菌剪刀（擦拭95%酒精后通过灼烧消毒）最大可能的将样品剪碎。

做样时在旁边要放有一条沾有消毒水的毛巾，当样液不当心溅出时可以即时擦拭。

做样时要把标识清楚：测样的编号、稀释倍数，以免发生化验室事故。

工作完毕后对台面、地面进行消毒（7 5%酒精消毒），再清洁。

打扫完毕后打开紫外线灯灭菌30分钟。

接种室操作管理规则

接种室操作管理规则1接种室消毒；接种室在放入经过灭完菌的瓶袋后，先要用消毒液室内空间喷洒消毒，然后打开紫外线灯再用气雾消毒剂双向消毒，服装鞋帽也要放在缓冲间同时消毒。

消毒液要经常更换，不要长时间使用同一种消毒液，消毒时间需要40分钟至1小时。

2接种箱消毒；接种室消毒完毕后，接种工作人员要同时进入缓冲间，不要隔一会进一个，工作人员进入后不得随意外出。

工作人员穿好服装鞋帽，戴上手套口罩，长发的一定要在头上盘好，不要露在帽子外面，然后打开接种箱把待接种的瓶袋、接种用具同时放入接种箱中，接种箱密封后操作人员从接种箱袖口伸进双手把气雾消毒剂点燃，或用紫外线灯光消毒40分钟以上。

3接种操作；接种箱消毒完毕后工作人员用75%酒精擦拭双手和需要用的菌种瓶、管的外壁进行消毒，然后把菌种瓶、管从接种箱的袖口放入接种箱，再次用75%的酒精擦拭双手及菌种瓶、管。

点燃酒精灯灼烧接种用具，再拿掉菌种瓶、管的棉塞，用火焰灼烧菌种瓶管的口部，待接种用具冷却后伸入菌种瓶、管中，轻轻刮下上部的老菌种块和部分菌种扔掉，再次灼烧接种工具冷却后放入菌种瓶、管中待用。

打开待接种的瓶袋，拔掉棉塞后瓶子也要在火焰上灼烧消毒，然后用接种工具取出一些菌种在火焰的上方快速的放到待接的瓶袋中，接完种后把棉塞放在火焰上灼烧后重新塞好，再次重新灼烧接种工具放入菌种瓶中，以待下次使用，这样一次接种程序工作完成。

需要注意的是，接种操作一定要在火焰的上方的2----5公分内，不得超出规定范围。

接种期间接种工具不得碰到瓶、管外壁和任何地方，如不小心碰到需要认真用酒精擦拭接种工具后用火焰灼烧。

4 卫生管理；接种完毕后把接完种的瓶袋摆放在培养室中培养，接种箱和接种室的废弃物都要清理干净，接种箱的底部、顶部和四周要用。

无菌室管理使用规程

无菌室管理使用规程
1 目的建立无菌室管理使用规程，保证操作者正确使用。

2 范围适用于无菌室操作。

3 责任者操作人员、无菌室管理人员。

4 内容
4．1无菌室应严禁放置杂物，无关人员严禁入内。

4．2 无菌室应严格保持整洁，防止污染，定期用甲醛熏蒸消毒（每月一次），使用前用0.1%新洁尔灭控式消毒净化工作台。

4．3 实验人员进入无菌室，必须更换无菌衣、帽、鞋等，操作前用0.1%新洁尔灭菌或75%酒精进行手消毒。

4．4 使用前开启紫外灯照射60分钟，同时打开吹风净化工作台，操作完毕及时清理，再开紫外灯照射30分钟。

4．5检验过程严格按照无菌操作规程操作，爱惜室内用具，使用完毕，整理检品及各种用具并清洁工作台面。

4．6 接种环在每次使用前后，必须通过火焰灭菌冷却后方可接种培养物。

4．7 所有带菌实验用品，须经有效的消毒灭菌处理后再洗刷。

严禁污染下水道。

4．8 无菌室定期进行洁净度测试检查沉降菌（在室内打开肉汤琼脂平皿30分钟，经37℃培养48h），100级平均菌落数不得过1个/皿，如超过应进行清洁消毒。

4．9 无菌室进出程序如下：
无菌室进出程序
虚线为出室程序。

接种室操作管理规则

接种室操作管理规则
接种室是指在无菌的环境下进行植物材料转接、培养物转移、试管苗继代的房间。

接种环节要求：
1.非工作人员禁止进入接种室。

2.接种工作人员进入接种室工作前，需用肥皂将手仔细清
洗干净，并及时剪除指甲，进入接种室必须更换鞋子和
工作服。

3.接种室每天使用前，提前打开紫外灯和臭氧消毒机进行
消毒灭菌半小时，接种操作员进入前提前半小时关闭紫
外灯和臭氧消毒机并打开室内日光灯，待臭氧气味散尽
后方可进入。

4.超净工作台风机和紫外灯使用前需提前半小时打开才能
使用，接种操作工作员坐好位置后需用75%的酒精擦拭
双手和超净工作台面以及内部四壁。

5.接种操作工作人员在接种室内禁止随意进出走动、聊天
喧哗、玩手机。

6.接种室每天使用后，必须及时清理接种过程中产生的垃
圾和废弃物，地面清扫后用消毒液拖地，扫把、拖把等
清洁工具必须接种室专用，使用后及时清洗干净并用消
毒液消毒。

7.定期用消毒液擦拭超净工作台外部四壁、接种小推车等
设备，接种室的空间需定期用臭氧消毒机消毒1～2小时。

食用菌接种室如何消毒灭菌

食用菌接种室如何消毒灭菌食用菌接种室如何消毒灭菌食用菌的接种室需要消毒灭菌才能更好地保证食用菌的成长环境。

以下是小编给大家介绍的食用菌接种室的消毒灭菌的方法，一起来看看吧。

食用菌接种室的消毒灭菌：超净工作台无菌操作规程(1)保持清洁超净工作台应放在干燥清洁的房间内,经常保持清洁。

每次使用前将接种材料和接种工具有序地放在工作台上,并检查是否齐全,然后进行紫外线照射30分,杀菌消毒。

(2)净化操作接种前先开动机器,以净化操区的空区空气气环境,待机器正常运转20分,操作区空气净化后,再进行接种。

(3)规范操作接种人员穿无菌工作服和鞋,戴好口罩和帽子,接种用具放在台面两侧,操作人员的手置于接种材料的下风侧。

工作时严禁搔头,接种时力求敏捷,尽量减少污染的机会,用过的火柴杆、棉球和掏出的老菌皮放入容器内,不得乱放。

(4)接种接种完毕,将已接种的试管或瓶(袋)贴好后处理标签,放进培养室(箱)进行培养,用杀菌药液擦净台面及地面。

(5)甲醛定期熏蒸该管理程序同接种室、(箱)处理。

食用菌接种室的消毒灭菌：接种室(箱)无菌操作规程(1)保持清洁经常打扫卫生,保持接种室(箱)内外清洁。

(2)严格消毒使用前将试管或料瓶(袋)和接种工具有序地放在室(箱)内和工作台上,并检查是否齐全,衣帽和口罩挂在缓冲室衣帽钩上,然后进行紫外线照射或药物熏蒸消毒。

1小时后,操作人员进入缓冲室,用肥皂水洗手后进行更衣、换鞋,戴上口罩、帽子,进接种室或把手伸进接种箱后再用消毒大王喷雾降尘除菌,准备接种。

(3)规范操作工作人员接种前用75%的酒精棉球擦手、擦接种工具和瓶袋,防止交叉感染。

接种时用酒精灯灼烧接种工具,棉塞、试管口、瓶(袋)口不离开火焰区,如棉塞不慎着火,用湿布盖住让其缺氧熄灭。

接种时动作要敏捷,配合要默契,工作时严禁搔头和其他人在室内快步走动,以降低发尘量。

用毕的火柴杆、棉球及掏出的老菌皮应放入容器内,不得乱放。

(4)接种后处理接种完毕,将已接种的试管或瓶(袋)贴好标签,放进培养室(箱),进行培养,将废弃物拿出室(箱)外焚烧或埋掉,将室(箱)内打扫干净。

无菌技术操作规程及评分细则

无菌技术操作规程及评分细则一、无菌技术操作原则1.操作环境清洁且宽敞①操作室应清洁、宽敞、定期消毒；无菌操作前半小时停止清扫、减少走动，避免尘埃飞扬。

②操作台清洁、干燥、平坦，物品布局合理。

2.工作人员仪表符合要求无菌操作前，工作人员应着装整洁、修剪指甲、洗手、戴口罩，必要时穿无菌衣、戴无菌手套。

3.无菌物品管理有序规范①存放环境:适宜的室内环境要求温度低于24C，相对湿度＜70%，机械通风换气4～10次/小时；无菌物品应存放于无菌包或无菌容器内，并置于高出地面20m、距离天花板超过50cm、离墙远于5cm处的物品存放柜或架上，以减少来自地面、屋顶和墙壁的污染。

②标识清楚:无菌包或无菌容器外需标明物品名称、灭菌日期；无菌物品必须与非无菌物品分开放置，并且有明显标志。

③使用有序:无菌物品通常按失效期先后顺序摆放取用。

必须在有效期内使用，可疑污染、污染或过期应重新灭菌。

④储存有效期:使用纺织品材料包装的无菌物品如存放环境符合要求，有效期宜为14天，否则一般为7天；医用一次性纸袋包装的无菌物品，有效期宜为30天；使用一次性医用皱纹纸、一次性纸塑袋、医用无纺布或硬质密封容器包装的无菌物品，有效期宜为180天；由医疗器械生产厂家提供的一次性使用无菌物品遵循包装上标识的有效期。

4.操作过程中加强无菌观念进行无菌操作时，应培养并加强无菌观念:①明确无菌区非无菌区、无菌物品、非无菌物品，非无菌物品应远离无菌区。

②操作者身体应与无菌区保持定距离。

③取、放无菌物品时，应面向无菌区。

④取用无菌物品时应使用无菌持物钳。

⑤无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内；⑥手臂应保持在腰部或治疗台面以上，不可跨越无菌区，手不可接触无菌物品。

⑦避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。

⑧如无菌物品疑有污染或已被污染，即不可使用，应予以更换。

⑨一套无菌物品供一位病人使用。

二、无菌技术操作评分细则。

2.食用菌接种室无菌操作及管理细则

食用菌接种室无菌操作及管理细则为规范接操作，提高接种成活率，特制定此细则，本细则适用于接种室接种操作人员，菌种室及相关人员参照执行。

1、接种室接种操作人员应有强的无菌操作意识，任何不规范或无意识的操作及行为都有可能给接种带来污染隐患，因此所有接种室操作及行为都应此细则为标准执行，细则之外的操作及行为经咨询主管人员并经同意后方可用于接种作业，同时我们将根据实际情况对本细则进行补充和完善。

2、接种室、缓冲间的消毒接种室为高度无菌区，每天接种前2.5~3小时时段必须对接种室进行较为严格的消毒处理，消毒之前所有接种所需物件、菌种等必须一次性准备到位。

2.1菌种消毒挑选好的菌种在接种室开始消毒之前应对菌袋表面进行药浴消毒，消毒所用药品为0.1%高锰酸钾溶液，消毒时将菌袋浸入溶液中，并用抹布进行擦试，袋壁、袋颈、袋口及棉塞露于空气中的部位都应擦到，将擦洗完毕的菌种马上放到接种室即可以进行接种室的空间消毒作业。

2.2接种消毒方法接种室消毒时臭氧机开机时间为2小时，同时点3大包菇保一号辅导清毒；缓冲间5小包菇一号进行薰蒸。

接种室消毒开始时间为每天早上的5：00~5：15，下午为11：15~11:30,接种时间上午不晚于8：10，下午不晚于14：10。

臭氧机关时间将由时控开关自动控制，消毒人员不再进入缓种间手动关闭。

3、接种前准备接种室、缓冲间均采用统进统出方式，严禁分批及无序进出，进入前所有操作人员必须将个人事情处理好，一旦进入直至接种完毕中途不得出入，进入缓种间后必须更换工作服、戴工作帽、穿专用鞋，换好后蘸取消毒液将双手洗净，然后同时进入接种室开始接种作业，进入缓冲间和接种室均应注意随手把门关好不留空隙。

4、接种操作进入接种间先用75%酒精把手、接种铲、剪刀及工作台面、垫板擦拭一遍并将接种铲、剪刀在酒精灯火焰上进行灼烧，然后可进行以下操作。

4.1将菌种袋棉花塞、套环拔掉用灼烧后的接种铲将料上表面0.5cm左右的菌种刨掉弃之不用，所弃之菌种集中剩放于小桶内，做好后将菌袋倒置，并将袋口上折放于塑料筐内，注意袋口的密封，菌种不可暴露于空气中。

无菌接种操作规程

无菌接种操作规程1. 引言无菌技术是实验室中常用的技术之一，无菌接种是指将无菌培养基接种菌种的操作。

正确的无菌接种操作能够有效地避免细菌污染，确保实验结果的准确性和可靠性。

本文档旨在介绍无菌接种操作的规程，以提高实验室人员的操作技巧和无菌实验的成功率。

2. 实验前准备在进行无菌接种之前，需要做一些准备工作，以确保操作环境的无菌和工具的清洁。

具体步骤如下：1.准备工具和材料：–灭菌培养皿–灭菌玻璃制品（如试管、移液管等）–灭菌培养基–支架、燃烧器和酒精灯–灭菌无菌手套2.检查工作台面的清洁程度，并进行清洁消毒。

3.打开无菌操作台，启动紫外线杀菌灯，进行紫外线辐射消毒，持续15分钟。

4.检查待使用的培养皿、玻璃器皿等是否有裂纹或污垢，如有，应更换。

5.检查培养基的质量，防止出现变质或污染现象。

3. 无菌接种操作步骤无菌接种操作需要遵循一定的操作规程，以确保操作的无菌性。

下面是一般的无菌接种操作步骤：1.装备操作台：根据需要，在无菌操作台上设置好所需的实验器材、培养基和试剂。

2.点火杀菌：使用火柴或打火机点燃酒精灯，对锥形瓶口、试管口和其他需要进行无菌操作的工具进行火焰消毒，确保火焰完全覆盖所需灭菌部位。

注意，火焰应呈蓝色，无明显的黄色或红色，否则表示火焰不完整。

3.手部消毒：穿戴无菌手套，并用酒精洗手液彻底清洗双手。

4.接种菌株：将菌株培养液摇匀后，通过火焰消毒的玻璃杆取出适量菌液，均匀涂抹在无菌培养基的表面上。

注意每次接种前都要将玻璃杆进行火焰消毒。

5.盖好培养皿盖：接种完成后，迅速将培养皿盖放回，避免外部微生物的污染。

6.清洁工作台：接种完成后，用70%酒精棉球擦拭工作台面，以清除表面的细菌。

7.清洁和消毒工具：使用完后的用过的培养皿、瓶口盖等，将其彻底清洗和消毒，以备下次使用。

4. 注意事项在进行无菌接种操作时，需要注意以下几点：•操作尽量在无菌操作台上进行，确保操作环境的无菌。

•严格遵守无菌操作的规范和步骤，以确保操作的无菌性。

二级菌种接种规程

接种箱使用规程1、接种箱必须放在清洁环境中使用。

使用前，先用清水擦洗外壁，再用2%来苏尔溶液清洗内壁和接种用具。

2、按甲醛10mL/m3+高锰酸钾7g/m3对接种箱进行熏蒸处理。

先将高锰酸钾倒入容器中，再加甲醛，迅速盖好箱盖，利用产生的甲醛气体密闭熏蒸12小时以上。

3、打开箱门通风30分钟，无明显刺激性气味时准备装箱。

4、接种完毕要及时清扫掉落在箱内的培养物和棉球等杂物，擦拭干净接种用具，并用清水擦拭箱内壁，再用甲醛10mL/m3+高锰酸钾7g/m3熏蒸接种箱，以备再用。

接种的无菌操作规程1、接种前对接种箱进行彻底消毒，并准备好接种工具。

2、操作人员用肥皂或消毒液洗手后装入菌包、菌种、接种工具等必须物品，点燃菇保，立即关闭箱门进行消毒。

3、操作人员工作前换好工作服，并戴口罩，手套。

4、操作人员在接种箱外用75%酒精棉擦拭双手，双手伸进箱内后，再用75%酒精棉球擦拭双手，接种工具及菌种，点燃酒精灯，进行接种。

在接种过程中，不能向箱内传递物品，以免造成杂菌污染。

5、酒精灯火焰不可过小，否则会缩小无菌区范围。

6、二级菌种袋口需要用酒精灯火焰无菌区封闭，接种必须在无菌区内进行，注意避免烧伤菌种。

7、接种工具在使用前，应用火焰灼烧灭菌，接种工具需要进入菌袋的部分，不得与未灭菌的物体接触，棉塞塞入袋口的部分拔出后不得与未灭菌的物体接触。

8、接种要做到“轻、快、准”：“轻”指接种动作幅度不要太大，尽量减少空气流动；“快”指接种动作要快，避免菌种和培养料在空气中停留的时间过长；“准”指接种动作要准确到位，接种工具放置有序。

9、接种过程中，不得把手伸出接种箱。

二级种接种操作的具体过程1、将接种物品搬进接种箱菌包摆在接种箱的左侧（左撇子放在右侧，下面的左右均互换），摆好接种用具，向箱内喷新吉尔灭。

2、将检查好的菌种用消毒液擦拭或喷洒后，放入接种箱内。

3、用菇保熏箱25分钟后，接种。

4、接种前，操作人员戴好口罩、手套，在接种箱外用75%酒精棉擦拭双手，双手伸进接种箱后，再次用75%酒精棉擦拭双手，特别是手指及指尖。

食用菌制种过程中干热无菌区接种法技术操作要领

食用菌制种过程中干热无菌区接种法技术操作要领食用菌制种过程中干热无菌区接种法技术操作要领：(一)材料及用具蜂窝煤炉一个，工作台(与炉同高)，坐椅，空周转箱，支架，接种针、铲、镊子，专用接种器，刀片，绳子，护筒(用铁皮做成长20cm直径与原种瓶外径相当)，0.1%升汞棉球，75%酒精棉球。

(二)操作要点在无菌接种室煤炉生火后，微启风门，这样就形成了一个干热气流即干热无菌区域。

①母种分离将巳灭菌的琼脂斜面试管、谷类试管等，将其4~5支用绳子绑成一组，放支架上试管口正对干热区。

用右手食拇指拨下管口棉塞(不能弃掉)，在无菌区内用酒精棉球将试管棉塞外表消毒，然后左手将消过毒的刀递给右手的大拇指与食指拿好，左手将要分离的巳经用升汞消过毒的食用菌子实体，放入右手的三指和四指间夹住，左手进行子实体再次消毒，再放回左手;用刀片切开子实体，取柄部中心0.5cm见方的组织，再用无菌接种针挑起，经过干热无菌区伸入试管培养基面上，再塞好棉塞即可。

就依照同样方法依次接完一组，再进行第二组、第三组分离接种。

②转接母种和原种制备将已用升汞棉球外壁灭菌的试管母种，放支架上管口伸入干热无菌区，拔去棉塞。

再用无菌接种铲取试管内母种一小块，经过干热无菌区，伸进另一支已灭过菌的母种培养基面上，达到转管转接母种的目的。

母种转接原种的方法是一致的，不必重复说明。

③栽培种制备用支架将护筒固定在干热无菌区上方横卧，将要被接种的已灭菌的栽培种瓶伸入护筒内，瓶口伸入干热区内，再用无菌专用接种器取原种瓶内原种，经过干热无菌区伸入被接栽培种培养基瓶挤出，然后盖上棉塞，这样—瓶栽培种就转接好了。

依照此法完成所有栽培种转接工作。

(三)注意事项①母种、原种、栽培种、被分离子实体都分别要消毒灭菌处理;②接种室、工具、辅助材料都要统—消毒灭菌;③整个操作始终不得离开炉火干热区接种;④炉子风门微启，如果太热了可以短暂关闭;⑤各级种剩装容器必须为玻璃器件;⑥接种室要设无菌缓冲间和空气对流无菌缓冲窗。

食用菌栽培技术之接种室操作规程

接种操作规程1 杂菌无处不在，接种是一个严格无菌操作的过程，是一个与杂菌作斗争的过程，所有接种操作人员都必须要竖立严格的无菌操作意识，按规程要求进行接种作业。

2 熟练的接种操作技术对接种成功率有着直接影响，所有操作人员都必须尽力提高自己的接种操作技术水平。

3 接种室开放式接种的接种量对接种成功率有着较大的影响，接种量大，菌种覆盖均匀成品率相对较高，接种人员不得贪图简便少接或接入不均。

4 接种室是一个与外界环境相对隔离的区域，人员要同进同出，尽量减少与外界空气的交换。

5 进入缓冲间后更换工作服、鞋、帽，戴口罩。

在自动净手器下喷洒酒精对双手进行消毒后，一同进入无菌操作间开始接种作业。

6 进入无菌操作间应先开启电子净机对空间进行净化作业，人员操作需在净化机无菌区域内进行。

7 使用预先配制好的消毒溶液对菌包进行外表消毒，一次性处理完毕待用。

消毒时要注意观察菌种有无污染或长势异常。

8 使用75%酒精对双手、接种工具进行擦拭消毒，接种工具擦拭后在酒精灯火焰上来回转动灼烧3~4圈，稍冷却。

9 将菌种拔除棉花塞，并刨去料面上0.5厘米左右的菌种，然后用接种勺将菌种刨碎（小麦粒大小）即打开菌包接入菌种。

菌种必须用完一袋处理一袋，每袋菌种使用完毕后接种工具和手都必须重新消毒一次。

10 每袋菌包接入菌种三勺，大约25克。

菌包接种孔必须接入菌种，如接种孔有堵塞的可用接种勺向下捅入。

接入料面的菌种一定要注意分布均匀，不均匀的可适当摇动使其均匀。

11 接种中，待接种菌包的棉花塞要用右手小指和手掌将其夹住，不得放置于操作台面上。

塞回时要在酒精灯火焰上转动一圈后塞入。

12 接好一筐种后，端上架子车前套环棉塞要侧向压倒，切忌压倒时棉花塞触碰到料面，棉花在携带杂菌，常压灭菌很难将其杀灭干净，触碰料面易引起菌包污染。

13 接种操作要力求快速敏捷，尽量减少开袋后菌包在空间的暴露时间。

14 接种时如发现有菌种被污染的要将菌种袋拧紧密封，单独放置，并重新对手和工具进行严格的消毒。

食用菌接种操作方法

食用菌接种操作方法
食用菌接种操作方法主要包括以下几个步骤：
1. 培养基准备：准备适合菌种生长的培养基，可以根据不同菌种的要求使用不同的培养基。

2. 培养器具消毒：使用高温高压灭菌器或其他合适的方法将培养器具进行消毒处理，确保无菌。

3. 菌种准备：将所需的菌种提取，并进行培养。

4. 培养物接种：将培养基倒入培养器具中，然后将菌种接种到培养基上。

5. 培养条件控制：控制培养环境的温度、湿度、光照等条件，促进菌丝生长。

6. 观察和维护：定期观察培养基上的菌丝情况，确保菌株的健康生长。

如果发现异常，及时采取措施修复。

7. 菌丝扩展和移植：当菌丝生长到一定程度时，可以将菌丝转移到新的培养基上，以实现扩展菌株的目的。

8. 收获：根据不同的菌种和培养目的，可以在菌丝形成子实体（如菌盖）或者
孢子时进行收获。

注意事项：
1. 操作过程要保持无菌，避免外界杂菌污染。

2. 对于不同的菌种，可能需要不同的培养基和生长条件，要根据具体菌种要求进行操作。

3. 在进行操作时要注意个人安全，避免接触有毒或有害的菌种。

4. 注意培养器具的清洁和消毒，以免造成交叉感染。

5. 在操作完成后及时清理工作区域，防止菌种外溢和传播。

接种室操作规程

接种室操作规程要求：严格消毒、查种仔细、操作严谨、保持卫生1.熏蒸前的准备工作要做充分：⑴菌种不允许积压，不允许使用前一日剩余的菌种，菌种必须药浴消毒。

⑵必须把接种所需的物品全部备齐，并摆在合理的位置，以备接种使用，避免进入接种室后发现缺少物品。

接种工具放在接菌室内。

⑶消毒物品要准备充分，接种间与缓冲间都必须消毒。

⑷工作服、鞋、帽放在缓冲间，要清洗干净，准备随时使用。

2.接种前熏蒸：用烟雾消毒剂（按4克/立方米标准计算用量）对接种间提前3.5小时（不少于3.5小时）进行熏蒸同时开启臭氧机。

接种前0.5小时关闭臭氧机，同时开启空气过滤器并打开制冷机对接种间制冷。

3.接种人员必须同进同出，必须穿专用的接种服，额前头发不许外露，必须戴口罩，进入接种室要把门关严，尽量减少在接种室内来回走动，更不允许接种人员来回出入接种室，直至接种结束。

4.接种时菌包开口时间不准超过5秒钟。

5.菌种袋处理：先去袋口，然后将菌种表面去掉2-3cm,袋口必须始终平放于酒精火焰之上，并用酒精灯火焰封口。

6.接种过程中胳膊不准压在菌棒上面。

7.拔棉塞时不允许手碰到套环的边缘。

8.棉塞必须在酒精灯火焰上灼烧消毒，棉塞要能看见灼烧的痕迹。

9.接种过程中应将菌种刮碎，菌种块大小不准超过0.5厘米，接种量不允许过少，必须均匀铺撒在料面上，棉塞必须塞紧，接好后的菌棒棉塞不允许碰到料面。

10.在接种过程中，接种勺碰到菌种袋和套环内壁以外的任何物品和地方，接种勺都必须重新用酒精灯灼烧消毒，每次灼烧接种勺的时间不低于20秒。

11.接种过程中将整筐菌包放在接菌架上，一手拿种子，一手拔棉塞，将拔掉棉塞的菌包接入菌种（至少3勺），然后将棉塞在酒精灯火焰上灼烧一圈消毒。

12.任何环节都必须轻拿、轻放、轻推，不允许刮破菌袋。

13.每接完一袋菌种，接种用的所有工具及新的菌种包括手必须全部用75%酒精擦拭消毒，处理菌种时，必须仔细观察菌种是否合格，如有疑问一律不用。

蘑菇接种室无菌操作及空气消毒方法

蘑菇接种室无菌操作及空气消毒方法平菇、香菇、金针菇到鸡腿蘑、口蘑、滑子菇等蘑菇均为传统的食料之一，向来以“味道鲜美，营养丰富”诸城。

近些年来，蘑菇需求量越来越大，全国每年消费蘑菇千万吨，随之广大蘑菇种植户的种植热情愈发愈高，但由于无菌操作及空气消毒方法不当，导致蘑菇品相不好或产量偏低。

对蘑菇而言，除要求培养的菌类以外的微生物都统称为杂菌，在蘑菇生长过程中一旦感染杂菌，杂菌就会迅速繁殖，与蘑菇争夺养料和空间，甚至分泌毒素或寄生在蘑菇上，影响蘑菇的正常生长发育，从而给生产造成经济损失。

因此，在蘑菇的制种和栽培中，应保证菌种优良纯正无杂，并且在接种过程要树立严格的无菌观念，掌握和运用消毒、灭菌技术，严防杂菌污染，以此降低微生物对蘑菇的正常生长发育的影响。

据专业从事食品杀菌技术研发和设备制造的上海康久消毒技术有限公司经理毛杉女士认为：由于蘑菇种类的不同，对培养基质、工具、环境中的无菌程度要求也不同。

因此，可以根据生产情况选用不同的方法，如灭菌、消毒、防腐。

灭菌是指在一定范围内用物理或化学的方法，彻底杀灭物料、容器、用具和空气中的一切微生物，包括微生物的营养体和休眠体，使物料成为无菌状态。

消毒是采用物理或化学的方法，杀灭或清除基质中、物体表面及环境中的部分微生物。

除菌是一种机械方法（如过滤、离心分离、NICOLER动态杀菌技术等），除去液体或气体中微生物的方法。

防腐是用来防止或抑制微生物生长繁殖的技术，是一个抑菌过程。

杀菌泛指杀死微生物菌体，通常不包括芽孢，有这种作用的药剂称为杀菌剂。

毛杉女士继续说道：消毒灭菌是排除杂菌干扰，为蘑菇创造洁净生长环境的重要保证，也是蘑菇生产中的一项基本技术，是蘑菇生产成败的关键环节，其分别为：一、无菌操作环节1、接种室应保持清洁，用煤粉酚皂液擦洗台面及墙壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。

每次使用前，均应用紫外灯灭菌；使用过程中，采用“NICOLER”动态杀菌机，此机器在工人上班时开机、过程中持续杀菌不允许关机，工人下班后同步关机，对人体无害处的同时，时时在线灭杀空气中的霉菌、枯草杆菌、沙门氏菌等杂菌。

香菇开放式接种场地、接种程序、接种注意事项

香菇开放式接种场地、接种程序、接种注意事项
香菇是世界第二大食用菌，也是高蛋白、低脂肪的营养保健食品，在民间素有“山珍”之称。

香菇开放式接种是近几年来总结创新的一项新技术，具有省时省工、不用接种箱、节约成本等优势，接下来专业人士就来具体说说香菇开放式接种技术要点。

一、接种场地选择
1、接种场地要选择避风、密封性好、干燥、附近50米内无杂菌污染源的房间，作为香菇开放式接种场所。

2、香菇接种室，在菌棒搬入前一天，打扫干净，并做好消毒工作。

二、茵棒处理
1、常压灭菌：在100度高温下保持14个小时后，将无机械破损的菌棒移到接种室，然后覆盖薄膜，以防防灰尘及杂菌孢子降落
2、将菌棒堆放在接种室中间，堆放高度不宜超过1.2米。

3、等菌棒冷却到25度以下的时候，采用气雾消毒剂消毒2个小时，然后才可以进行接种。

三、接种程序
1、将菌种、接种工具等用75%酒精消毒后备用。

2、接种部位要涂抹消菌剂或多菌灵配制药剂。

3、在涂擦处打孔，每段菌棒打3～4个孔，孔深4～5厘米，需要注意的时，打孔的时候千万不要打穿了。

4、将生产种掰成块塞入孔内，要求接种块和菌棒结合紧实，但是不能用力挤压，以防杂菌从空隙侵入。

5、当温度升高到25度的时候，揭开薄膜进行通风换气，及时翻堆，防止高温烧菌。

四、注意事项
1、接种须选择在低温、晴朗、干燥的天气进行。

2、接种场地必须清洁、干净、卫生。

3、接触菌种人员的手及打孔机械须用75%酒精消毒。

关于香菇开放式接种的内容就讲到这里，欢迎阅读百度文库其他农业内容。

无菌操作规程

无菌操作规程（一）无菌技术操作原则1、环境要清洁。

进行无菌技术操作前半小时，须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。

治疗室每日用紫外线照射消毒一次。

2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。

帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。

3、无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌物品一经使用后，必须再经无菌处理后方可使用，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。

4、无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。

无菌包在未被污染的情况下，可保存7-14天，过期应重新灭菌。

5、取无菌物品时，必须用无菌钳（镊）。

未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区。

6、进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用，应更换或重新灭菌。

7、一套无菌物品，只能供一个病员使用，以免发生交叉感染。

（二）准备质量标准1、工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲。

2、备齐用物。

3、治疗盘、无菌持物钳或镊，浸泡于消毒溶液内，无菌溶液、无菌包布、无菌容器及物品、无菌手套、弯盘、75%酒精、无菌棉签。

4、查对无菌物品、灭菌日期及手套号。

5、用物排放有序，符合无菌操作要求。

（三）操作流程质量标准1、选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作。

2、解开无菌包系带卷放在包布下边。

3、用拇指和食指先揭左右两角，最后揭开内角，注意手不可触及包布的内面。

用无菌钳（镊）取出一块无菌巾放于治疗盘内，剩余部分按原折痕包起扎好，并注明开包时间。

4、铺无菌盘：单巾铺盘：双手拇、食指捏住治疗巾两上角外面，轻轻抖开，双折铺于治疗盘上，内面为无菌区，盖的半幅成扇形折到对面无菌盘上，开口边向外，放入无菌物品后，边缘对齐盖好。

将开口处向上翻折两次，两侧边缘向下翻一次，以保持无菌。

双巾铺盘：双手捏住无菌巾的左右两上角的外面，轻轻抖开，由远向近铺于治疗盘上，无菌面向上，放入无菌物品。