毛细管进样技术

7 HPLC／CE联用进样技术
毛细管电泳进样端制成锥形，毛细管电泳的几 样由气动阀控制缓冲液的横流来实现。通常情况 下，加高压时，由横流带着样品由色谱柱流向废 液口，阻止样品进入毛细管电泳部分，在进样的 时侯，电压降到0，但仍保持横流，以防止运行电 压变为进样电压过程中样品进入毛细管电泳。然 后通过转换气动阀来停止横流，电动进样，撤出 进样电压后，横流继续送样品到废液口，通过一 阵缓冲液，把夹缝处多余的样品清除后，再加分 离电压，避免了峰的拖尾现象。
优点：（1）分离时间短，只需要几秒钟或者几分钟，有文 献报道，在140ms内实现了4种荧光标记的氨基酸的分离； （2）高分离效率，由于进样量只有几个皮升，可以达到几 十万的理论塔板数。
缺点：（1）这也是一种电动进样，因此存在进样偏向； （2）荧光减灭的效率比较低，只有80％左右。
流动门进样
装载样品的毛细管与分离 毛细管距离的间隙大概是75 微米， 流动泵时，样品毛细 管出口处的样品被流动的缓冲 液带走，无法进入分离毛细管 柱。当流动泵关闭时，样品由 于电动力学效应而被引入分离 毛细管中。这种进样的标准偏 差小于4％，流动相流速控制 79nL/min~1μL/min ，特 别适于超微分析。
8 FI/CE联用进样技术
传统的电动进样是由静态的均相溶液中引入样 品，在流动注射毛细管电泳中，样品的引入是在不 断流动的非均相溶液中进行的。它是在流动注射和 毛细管电泳入口之间加了一个带锥形入口的流通池。 两个蠕动泵，分别输送缓冲液和样品。引入样品的 时侯，样品充满采样环，多余的样品溶液，在采样 时，启动进样阀，采样环中的样品就被缓冲液带进 分离毛细管进行分离。流动注射毛细管电泳可以实 现连续进样而体系不停止流动。
优点
进样时，样品体积变 小，管壁影响力减弱，在 线进样不受外界干扰，可 用源自文库封闭体系，可以实现 毛细管电泳与其它分析仪 器的联用。
5 高速毛细管电泳的进样技术
高速毛细管电泳是上世纪90年代发展 起来的采用细内径和较短的毛细管来实现 高速分离的一种分离技术。与传统毛细管 电泳相比，它的特点就是分析时间很短。
光学门进样
荧光标记后的样品在高 压的驱动下进入分离毛细管， 当样品到达毛细管的“前门” （entrance）时，用第一 束激光（gating beam） 来减灭大部分荧光标记的样 品，只允许很窄宽度的样品 塞通过，实现分离后用激光 致荧光检测器检测。
由于样品引入是采用光学形式而不是机械控制的，样 品塞宽度很小，同时可以在维持高压状态下进样。
毛细管进样技术
1 流体力学进样
利用流体力学进样的 技术通常有虹吸进样法， 毛细管进样端加压法，和 毛细管尾端抽真空进样法 三种形式。进样量大小的 控制是通过改变毛细管进 出两管口之间位差或压差， 以及作用时间来实现的。
2 电动力学进样
毛细管的进样端先不和缓冲液接触，而直接置于样品
溶液中，然后再很短的时间内施加进样电压，使样品通过 电迁移进入毛细管，在这种情况下，样品进样的迁移率有 两部分组成：μ＝μep＋μeo 其中μep是进样条件下单个 组分的迁移率（淌度），μeo则是电渗流引起的淌度。
由于试样各组分具有不同的μep，淌度大的组分进入
毛细管内的质量要比淌度小的组分多，因此导致了电渗流
进样方式的最大一个不足之处――样品进样时存在组份歧
视。
电动力学进样的动力来自电泳介质本身，因此可用于
高粘度样品的分析，从而扩展了分析样品类型的范围。
场放大技术
在分析一些含量极小的组分时，为了提高分析的灵敏 度通常采用了场放大进样技术，这是电动力进样的扩展。 该方法是将样品溶于电导较小的缓冲液，当进样时，在 离子强度低的稀缓冲液中的组分，就处于电场强度较高 的状态，运动比在管内大部分高电导的缓冲液中要快多。 于是，样品中的阳离子(如果进样端为正极时) 就会迅速 迁移至样品液与缓冲液的边界上，随后速度开始下降， 阳离子便堆积在这一界面上形成一个被浓缩了的区带， 中性离子仍分布于整个样品液，而阴离子则浓缩在样品 液的尾部与后续缓冲液的界面附近。
场畸变的能力。同时，也可用于毛细管凝胶电泳及
电色谱进样。但该种扩散方法使得工作效率大大减
慢了，该方法应用得并不普遍。
4 直接在线进样
在线进样由一个微交叉的组件通过高压转换来实现。 它的取样毛细管于分离毛细管相垂直，样品在取样毛细 管电渗流的作用下进入取样毛细管，并充满微交叉部分， 然后使分离毛细管两端的缓冲池之间产生电压梯度，样 品进入分离毛细管进行分离。如果采样时，分离毛细管 中没有电流，则交叉部分充满样品，进样时这部分样品 完全进入分离毛细管。如果在采用过程中使得两分支分 离毛细管中产生一个小于采样毛细管中的电流使很小的 液流流向交叉部分，其叠加的结果是样品在交叉部位形 成针形。
3 扩散进样
扩散进样方式通过调整样品池高度,使其液面
与毛细管出口端的液面严格水平，利用进样端管口
处样品溶质与毛细管中电解质缓冲液存在浓度梯度
的原理使样品组分直接扩散进入管内。因为该进样
方法不采用电压，所以在一定程度上，克服了因淌
度不同产生的组分岐视。并且该方法具有较好的定
量特性，较强的抗样品基质干扰和一定的抗区带电