选修I生物技术实践知识点

ⅠB模块的知识点

注意：1，熟记这些知识点，特别是带*的表示重点。

2，选修1和2中的每章内容后面有《本章小结》，我们应该读熟背诵！

3，选考部分因为是09年才出现的题目，所以还不知道什么命题规律。但是根据有关的规定和精神可知，题目一定是不难的，以考查书本的内容为主，可能就是书本内容的填空题，所以复习时一定要看书。看书时要根据《教学指导意见》和《考纲》，做好删减工作，一些选学的或不考的内容可以不看；《教学指导意见》上不做要求的，但《考纲》做要求的可以不看。看时要特别注意的是跟必考内容（如生态、酶、免疫、代谢等内容）有紧密联系的内容，选修1和选修2之间有联系的内容（如生物工程的发酵工程和植物组织培养、微生物等）。

选修1 生物技术实践

第一部分微生物的利用（是重点）

一、课标内容：进行微生物的分离和培养

二、教学要求：

1，微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核，只有一环状DNA分子（拟核）。以分裂（二分裂）的方式繁殖，分裂速度很快。用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌（革兰氏染液染色后，再脱色处理，细菌仍保留染色液的颜色）和革兰氏阴性菌两大类，区别在细胞壁的成分不同。大肠杆菌是革兰氏阴性（细胞壁薄，有荚膜）、兼性厌氧的肠道杆菌。

*2，细菌的分离方法有两种：划线分离法和涂布分离法。是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线的过程中菌液逐渐减少，细菌也逐渐减少，。划线最后，可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培养基培养10～20小时后，一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞，形成菌落，不会重叠。在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。用于基因工程的大肠杆菌的工程菌，可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。由于工程菌的质粒中通常有抗性基因（如抗氨苄青霉素基因），如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素，由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因，所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。

涂布分离时，需要先将培养的菌液稀释，通常稀释到10-5～10-7之间，然后去0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿中有20个以内的单菌落为最合适。将每个菌落分别接种在斜面上扩增培养后，再做功能性实验。

划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂。

3，在培养微生物时，必须进行无菌操作。其首要条件是各种器皿必须是无菌的，各种培养基也必须是无菌的，转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无菌（防止杂菌

污染）。进行恒温培养时，要将培养皿倒置，是因为培养基中的水分会以水蒸气的形式蒸发，倒放培养皿会使水蒸气凝结成水滴后，落入培养基的表面并且扩散，菌落中的细菌也会随水扩散，菌落见相互影响，很难在分成单菌落，达不到分离的目的。

4，细菌扩大培养要用LB液体培养基（通用培养基、常用于做生理学研究和发酵工业），划线分离要用LB固体培养基（常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存）。“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。尽管培养基的配方各不相同，但其基本成分都一样（五类）。（复习时注意联系微生物的有关内容）

第二部分酶的应用

考纲要求

知识要点

酶是细胞合成的生物催化剂，几乎所有的生命活动都离不开酶。随着生物科学技术的发展，酶已走进人们的生产和生活。

一、果胶酶在果汁生产中的作用

制作果汁要解决两个主要问题：一是果肉的出汁率低，耗时长；二是榨取的果汁浑浊、黏度高，容易发生沉淀。因此，在生产上，人们使用果胶酶、纤维素酶等来解决上述问题。

果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物，不溶于水。在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不是特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

在食品工业，果胶酶主要应用于水果加工业，主要有：①水果中的果胶经果胶酶水解后，可降低果汁的粘度，有助于压榨并提高出汁率；②在进行果汁沉降和离心时，能破坏果汁中悬浮物的稳定性，使其凝聚沉淀，果汁得到澄清；③经果胶酶处理的果汁比较稳定，不再发生混浊；④在葡萄酒酿造中加入果胶酶能起到澄清作用，还可促使葡萄汁中的酒石酸发生沉淀；⑤果胶酶可用于桔子脱囊衣，制造果粉和低糖果冻。

在饲料工业，果胶酶也有着广泛的应用，主要有：①果胶酶与纤维素酶、半纤维素酶等配合，可降解植物细胞壁中果胶和纤维，促使淀粉、脂类、维生素和蛋白质等释放出来，从而提高了饲料的营养价值；②果胶酶可降低饲料的粘度，促进饲料在动物消化道内的消化吸收。

二、加酶洗衣粉在洗涤中的作用

当你自己动手洗衣服时，会发现有油渍、汗渍或血渍的衣服很难彻底洗干净，其实油渍、汗渍或血渍等中的成分也无非就是蛋白质、脂质、淀粉和纤维素等。而相应的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶等就能将其水解为小分子物质，从而将其清除。

加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶制剂可以使奶渍、血渍等多种蛋白质污垢降解成易溶于水的小分子肽。碱性蛋白酶的主要产生菌是某些芽孢杆菌。

衣物上脂质污垢的主要成分是甘油三酯。甘油三酯很难被一般洗衣粉中的表面活性剂乳化，而留在衣物上的甘油三酯容易发生氧化反应，使纺织品变黄变脆。碱性脂肪酶制剂能将甘油三酯水解成容易被水冲洗掉的甘油二酯、甘油单酯和脂肪酸，从而达到清除衣物上脂质污垢的目的。碱性脂肪酶的主要产生菌是某些青霉。

这些酶制剂不仅可以有效地清除衣物上的污渍，而且对人体没有毒害作用，并且这些酶制剂及其分解产物能够被微生物分解，不会污染环境。所以，加酶洗衣粉受到了人们的普遍欢迎。