β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸含量测定方法(nad)
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NAD分析方法
一、范围
本标准规定了β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的质量指标及检验方法。
结构式：
中文名：β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸
英文名称：β-Nicotinamide adenine dinucleotide
CAS号：53-84-9
分子式：C21H27N7O14P2
分子量：663.43
二、质量指标
项目指标
外观
pH(0.5mg/mL）
纯度%
含量%
水分%
三、检测项目
3.1 含量(HPLC)
仪器
岛津20AT HPLC
试剂
1.甲醇HPLC级
li-Q 水
3.三氟乙酸HPLC级
4.NAD对照品
色谱条件
色谱柱：Agilent SB-C18 5µm 4.6＊250mm
洗脱程序：梯度
初始流速：0.8 mL/min
分析时间：21 min
检测波长：260 nm
进样体积：5uL
柱温：25 ℃
保留时间：12.8min
梯度程序
流动相A
0.1%三氟乙酸：准确量取1 mL三氟乙酸溶于1L去离子水中，抽滤并超声脱气15 min后做为流动相A。
流动相B
HPLC 级甲醇
对照溶液
精密称取50 mg NAD标准品于100 mL容量瓶中，用去离子水溶解并定容至刻度。
样品溶液
精密称取50 mg NAD样品于100 mL容量瓶中，用去离子水溶解并定容至刻度。
进样程序
数据处理
，
样
样%100m n
f A %X A c f std
std ⨯••==
C std :：对照品浓度 A std ：对照品峰面积 A 样：样品峰面积 n ：稀释倍数
m 样：样品称样量 图谱
3.2 pH 值测定
精密称取50 mg NAD 样品于100 mL 容量瓶中，用去离子水溶解并定容至刻度，利用pHS-3C 型pH 计测定pH 值（操作见pHS-3C 型pH 计SOP ）。
3.3 水分测定
精密称取50 mg NAD 样品，放入卡尔费休水分滴定仪中（操作见卡尔费休水分滴定仪SOP ），记录结果。
起草人： 审核人： 批准人：。