鸡胚成纤维细胞(CEF)制备

取9~11日龄SPF鸡胚，分别用碘酒和酒精棉由鸡胚中央向四周擦拭消毒，然后放入超净台，将有气室的部位朝上，小心地用无菌镊子磕破蛋壳，沿气室边缘夹掉蛋壳，注意不让蛋壳碎屑落入蛋内，换用新的无菌镊子揭开尿囊绒毛膜，再用弯头镊子深入胚内夹住鸡胚颈部取出，放入平皿中，将取出的鸡胚去脑、四肢、内脏，放入一小烧杯中，然后用眼科手术剪刀仔细将组织反复剪碎，直到成1 mm3左右的小块，再用PBS清洗3遍，至组织块发白为止。

将剪碎的组织块移入另一小烧杯中，加入适量的（1ml左右）0.5%胰酶和9mlPBS，于37℃水浴中消化10min左右。

倒掉PBS和胰酶混合液然后加入生长液25ml终止消化，用枪头充分吹打成单个细胞。

再用8层灭菌纱布过滤，将过滤的得到的细胞悬浮液稀释10倍，使细胞终浓度达到50万个/ml，每个细胞瓶加入8ml。

放入CO2培养箱中，37℃培养24小时，直至细胞长成单层致密，及可以接毒。