乙肝感染肝衰竭患者骨髓干细胞的初步研究与应用
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染 ， 用 自体 骨 髓 干 细胞 移植 治 疗肝 衰 竭 完 全 可 行 。 利
【 关键 词】 Ｈ Ｖ感染 ； 肝功能 衰竭 ； 骨髓干细胞 ； 单个核干细胞 ； 核 酸检 测 Ｂ
大量研究表 明， 乙肝 病 毒 主 要 呈 嗜肝 性 ， 感 染 者 外 周 血 中 在 可 以分 离 出 完 整 的 Ｈ Ｖ 颗 粒 。 但 是 ， 于 感 染 者 本 身 的 造 血 系 Ｂ 对 统 及 骨 髓 干 细 胞 是 否 感 染 则 报 导 极 少 。 本 研 究 拟 通 过 对 慢 性 乙 ＨＢ Ｄ Ａ≤５×１ Ｃ ＰＥ ／ Ｖ Ｎ ０ Ｏ Ｉ Ｓ Ｌ测 定 有 效 。
还鲜见报导。为此 ， 笔者采集 ８例 乙肝肝衰竭患者动员 至血 中之
富 含 骨 髓 于细胞 的单 个 核 细 胞 ， 过 裂 解 、 取 Ｈ Ｖ Ｎ 通 提 Ｂ Ｄ Ａ并 应 用 Ｐ Ｒ法 检 测 其 Ｈ Ｖ Ｎ 以探 讨 乙 肝 肝 功 能 衰 竭 患 者 骨 髓 干 细 Ｃ Ｂ Ｄ Ａ， 胞 乙肝 病 毒 感染 状 态 。 本 实验 从 ８例 乙肝 肝 衰竭 患 者 骨 髓 千 细 胞 无 ＨＢ Ｄ Ａ 测 出 Ｖ Ｎ 结 果初 步说 明 ， 漫 长 的 乙 肝 感 染 过 程 中 ， 髓 干 细 胞 并 非 为 嗜 在 骨 乙肝 病 毒 性 细胞 ， 自体 骨 髓 千 细 胞 不 存 在 乙肝 感 染 问 题 。此 外 ， 经 过 系统 抗 病 毒 治 疗 并 达 到 基 本 目标 （ Ｂ Ｄ Ａ ＜１０Ｘ１３１ Ｈ ＶＮ ． ０ ／ ）
ｇ ｎ ｔｒｃ ｌ ｒ ｍ ｏ ｅ ｍａｒ ｗ ｄ ｆ ｒｎ ｉ ｔ ｉｔ ｕ ｃ ｉｎ ｌｈ ｐ — ｅ ｉ ｅｌ ｆｏ ｂ ｎ ｒ ｉ ｅ ｅ ｔ ｅ ｎ ｏ ｆ ｎ ｔ ａ ｅ ａ ｏ ｓ ｏ ｆ ａ ｏ
冻存 （ 每管３ １待检 。Ｐ Ｒ定 量检测 ， Ｐ Ｒ时循 环程序设 置 ０ ） Ｃ 将 Ｃ
以同样 条件设 ２管 阴性对照 ， 管 临界值对 照和 ４管阳性 作标 １ 准； 萤光信号设定为 Ｆｒ 荧光素 ； ａ ｏ 萤光信 号收集 设定 为 ６ ０℃并设
定 阳性 Ｓ Ｎ Ｔ Ｄ拷 贝数 ， 见样 本设 定 为 Ｕ Ｋ 检 定 结 果 分 析 条 件 待 Ｎ Ｎ， 设 定 Ｃ 值 ： ００ 检 定 结果 判 定 Ｈ Ｖ Ｎ ｔ ４．， Ｂ Ｄ Ａ拷 贝数 为 １０×１ １ ． ０／ ≤
衰竭病例 ， 龄 ４ ５ 年 Ｏ～ ５岁 ， 合 ２ ０ 符 ０５年 ５月 中华 医 学 会 感 染 病 学 分 会 肝 衰 竭 与人 下 肝 学 组 在 肝 衰 竭 的 诊 治 指 南 。
细胞 ， 与细胞再 生 ， 参 从而 治疗肝损 伤 。笔者 利用这一 结果 ， 将患者 自体骨髓干细胞作 为供体 在体外 分离纯 化后移植 患者肝 内， 应用于慢性肝衰竭治疗 。但肝衰竭患 者多数为乙肝 病毒感染 所致 ， 其骨髓干细胞是 否感 染乙肝病 毒是这一治疗 技术 开展 的关 键 。乙肝病 毒为 Ｄ Ａ病毒 ， Ｎ 其对肝 细胞具有 独特 的宜侵性 ， 故称 其为嗜肝病毒。也有研究证实它不但对肝细胞具有易感性 ， 尤其
用 自体 骨髓 干 细胞 移 植 治 疗 肝 衰 竭 完 全 可 行 ， 用 担 心 再 感 染 乙 不
１ ｉ； ２ ０ ｌ ０ｒｎ 加 ０ 乙醇（ ６ ～１０ ） ａ ９％ ０ ％ 混匀 ， 把全 部移入 柱 内； 将
上 清 移 人 ＱＡ ｍ Ｓ ｉ Ｉａ Ｐ ｐｎ性 内 ， ２ ｍ 放 １的 收 集 管 中 ， ０ （ ６ ０ ０ ｇ 约
ｆ ｍ ｏ ｅｍｏ ｒ ｗ ｃ ｌ ｃ ｆ ｒｒ ｄ ａｉｎ— ｉｄ ｃ ｄ ｍｙ ｌａ ｒ ｏ ｂ ｎ ｒｏ ｅｌ ｉ ｍｉｅ ａ ｅ ａ ｉｔ ｓｎ ｔ ｏ — ｎ ｕ ｅ ｅｏ ｂ ｌｔ ｎ ａｉ ．Ｈｅ ａｏｏ ｙ， ０ ０，３１ ３ ｏ ｐ ｔｌｇ ２ ０ ：２ ５—２ ０． ４
上 清 ， ２ ０Ｉ Ｂ 用 ０ ｌ Ｓ重悬沉淀 ， ｘＰ 析 至 １５ｍ 离心管 中。加 ２ ｌ ． ｌ ０
蛋 闩 酶 Ｋ 和 ２ ０ Ｉ ｕｆ Ａ 试 剂 充 分 震 荡 后 放 ７ ℃ 温 育 ０ Ｌ Ｂ ｆ ｒ Ｃ ｌ ｃ ０
后， 在血 中、 巴细胞及其 它单 核细胞中亦无 乙肝病毒 。因此 ， 淋 利
肝病毒 问题 ， 至于机制方面 尚有待进一步探讨 。
参 考 文 献
９０ ０ｒｍｎ ０ ｉ离心 】ｒｎ弃 滤液和收集 管 ， ／ ａ ｉ 将柱放入 新收集 管 中加 ５０Ｉ ｕｆ ０ ｌ ｆ ｒ试 剂 ２０ ０ ｇ离 心 ３ ｉ 柱 干燥 ； 心 将 柱 放 ｘ Ｂ ｅ ０ ａ ｒ ｎ使 小
一
【 收稿 日期 】 ２ １ ０ ０ ０— ８—１ ０
（ 文编辑 ： 本 程旭 然 ）
３ ～ ０
［ ］ ｅ Ｄ， ｕ Ｋ， ａｇ— ｅｇＪ ｅａ．Ｉ ｉｏｈｐｔ ｉｅ ３ Ｌ ｅＫ Ｋ ｏ Ｔ Ｗｈ ｎ Ｐ ｎ ， ｔ １ ｎｖ ｒ ｅ ａｃｄ ｆ － ｔ ｉ ｆｒ
ｅ ｔａｉ ｎ ｏ ｕｍａ ｅ ｅ ｃ ｙ ａ ｓｅ ｃ ｌｓ Ｈｅ ａ ｏｏ ｙ，２０ ４， ｎ ｉｔｏ ｆｈ ｎ ｍ ｓ ｎ ｈ ｍ ｌ ｔｍ ｅ ｌ． ｐ ｔｌ ｇ ０ ４０： ２ １ ７５ — １ ８ ２ ４．
１ｍ ｎ 洗 ２次） 再用 ２０ Ｉ 去离子水重复洗 １ ， 置 １ｍｉ ｉ（ ； ０ ｌ ｘ 次 静 ｎ以 ６００ｒｍｎ离心ｌｒｉ， ０ ｉ ／ ｎ 分别装 ２ 离心管中（ ． １ ， ２ ａ 个 １５ｍ ） 一 ０ｃ Ｃ
［ ］ｃ ｗ ｒ Ｅ，Ｒ ｙｓＭ， ｏｄｅＬ ｔ １ ２ Ｓｈ ａｔ Ｒ ｚ ｅｅ Ｋ ｏｉ ，ｅ ａ．Ｍｕ ｉｏ ｎ ｄ ｌｐｏ ｈｐｔ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｔ —
观察对象标本检测 Ｄ Ａ均 阴性 。结论 慢 乙肝肝 功能 衰竭 患者 骨髓干 细胞无 乙肝病毒 Ｈ Ｖ感 Ｎ Ｂ
对象， 集落刺激 因子 （ Ｇ—Ｃ Ｆ 诱导骨髓干细胞至周 围血 中后 ， 以梯度 离心 方法富集外周 血 中单 个核 细胞 ， Ｓ） 再 并提取 乙肝病毒 核酸 ， 最 后 用 Ｐ Ｒ法进行 核酸检 测。结果 Ｃ
周血单个 核细胞 ， 达到要求后应用血细胞分离机对外周血干 细胞 进行分离。
分 离 后 立 即进 行 细 胞数 测 定 ， 取 １ｍ 单 个 核 细胞 放 一８ 并 ｌ Ｏ℃ 冻存 。核 酸 提 取 过 程 如 下 ： 一８ 取 ０℃ 冻 存 的单 个 核 细 胞 管 立 即 放入 ３ ７℃ 水 浴 中充 分 震 荡 至 完 全 溶 解 ； １ １ 心 管 中 加 入 在 ５ｍ 离 ｌ ｌ Ｂ ， 加 入 溶 解 的 细 胞 ， 匀 ，５０ ０ｒｍｎ离 心 ５ ｒｎ 弃 ０ｍ Ｓ 再 Ｐ 混 １ ０ ／ ｉ ｉ； ａ
３Ａ型， ３ 试剂 由深圳 匹基生物 工程有限公司提供 ） Ｈ Ｖ核 酸提取 ，Ｂ 试剂盒为德国 Ｑ Ａ Ｅ Ｉ Ｇ Ｎ产品 ， 北京众磊生物科技有 限公司提供 。
１３ 方 法 ． 对 ８例 临 床 确 诊 患 者 先 行 抗 病 毒 治 疗 （ 苷 或 核 苷 核 酸 类 似 物 ） 待 外 周 血 Ｐ Ｒ定 量 检 测 ＨＢ ， Ｃ Ｖ含 量 ＜１０Ｘ１３Ｃ Ｐ ． ０ Ｏ — ＩＳ １ Ｅ ／ 后再 每 日给予 ２ ０—３ ０ ｇｄ ０ ０ ／ Ｇ—Ｃ Ｆ皮 下 注 射 ， 在 此 期 Ｓ 并 间监 测患 者外 周 血 单 个 核 细 胞 增 长 状 态 。于 注 射 ３～ 查 外 ４ｄ后
中外 医 学研 究
２１ ０ ０年 １ 第 ８卷 １月
第２ ５期
Ｃ Ｉ Ｅ ＥＡ Ｄ Ｆ Ｒ ＩＮ Ｍ ＤＣ ＬＲ Ｓ Ａ Ｃ Ｈ Ｎ Ｓ Ｎ Ｏ Ｅ Ｇ Ｅ ＩＡ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ
胎
ｙ－ ｌ 誊 薯宰 ＿ ㈡。 ｜ｊ 誊 － ０ ｌ － ｌ ｜ ◆ 。 ０ 爹 ｆ 宠 孝 ｌ 曩 誊ｓ ｜ 誊 ｜ ： 癸 ≯ ∞ 誊ｌ Ｉ 一 ｌ ｌ薯 蟊 曩 蘩 ｌ
在 大单 核 细 胞 能 够 检 出 阳性 标 志 物 ， 在 骨髓 干 细胞 中 是 否 感 染 但
１２ 试剂与仪器 ．
ＭＣ Ｒ多功能细胞采集仪 （ 国血液技术公 司 Ｓ 美
Ｍ ｅ ｏｅｃ 产 品 ） 荧 光定 量 Ｐ Ｒ 扩 增 仪 （ ａｍ ｎｔｓ ｉ ， Ｃ 日本 大 和 产 品 Ｆ Ｄ一 Ｑ
源自文库
骨髓于细胞用于人类肝 脏疾病 治疗是 人们关 ， 问题 和 目 ｔ的 ２
８例 观 察 对 象 系 ２ ０ ０ ６～２０ ０９年 慢性 乙肝 肝 功 能
１１ 一般资料 ．
标 ，ｈｉ Ｔ ｅｓ ｅ等…报道 ， 骨髓干细胞存体 内不但 能分化为肝 细胞 ， 而
且 能 分 化 为 胆 管 细 胞 。大 量 研 究 表 明 ， 骨髓 干 细胞 能 够 分 化 为肝
为３ ７℃ ５ｒｎ ９ ｉ，４℃ １ ｉ ，５℃ ５ ｅ 、 ０Ｓ（４ 循环 ； ａ ｎ９ ａ ｒ ９ｓｃ６ ｏ ３ ・ ２个 ０Ｃ ｅ，
取 反 应体 系溶 液 ３ ｌ 待 检 样 品 ２ Ｉ （ 测 前 放 室 温 解 冻 ） ９ 加 ｌ检 ｘ 并
ｔｃ ｔ ｏ ｙｅ—ｌ ｅ ｃ ｌ ．Ｊ Ｃ ｉ ｎ ｅ ｔ ０ ２，１ ９：１ ９１—１ ０ ． ｉ ｅｌ ｌ Ｉ ｖ ｓ ，２ ０ ｋ ｓ ｎ ０ ２ ３ ２
１５ｍ 收 集 管 中加 ２ ０ Ｉ 去 离 子 水 静 置 １ｍｉ ６ ０ ｒｒ ｎ离 心 ． ｌ ０ ｌ ｘ ｎ ０ ／ ｉ ａ
［ ］ ｈｉ Ｄ， ａｖ ， ａｅａＲ，ｅ ａ．Ｄ ｒ ａｏ ｆ ｅａ ｃｔ １ Ｔ ｅ ｅＮ Ｂ ｄｅＳ Ｓｘｎ ｓ ｔ １ ｅ ｖｔ ｎｏ ｐｔ ｙ ｓ ｉ ｉ ｈ ｏ ｅ
乙肝 感 染 肝 衰 竭 患 者 骨 髓 干 细 胞 的 初 步 研 究 与 应 用
曲 乃 方 张 璞 樊 美香 哈 尔滨 市传 染病 院 （ 黑龙 江
【 摘要】 目的
金 贞子 刘 屹 东 哈 尔滨 １ ０ ０ ） ５ ０ ０
探讨慢 乙肝肝功能衰竭 患者骨髓干细胞 乙肝病 毒（ Ｖ） 染状 态。方法 选择慢 性 乙肝 肝 衰竭 患者作 为研 究 ＨＢ 感
２ 结果
本 检 测 ８例 乙 肝 肝 功 能 衰 竭 患 者 Ｈ Ｖ Ｎ Ｂ Ｄ Ａ样 品 的 Ｃ ＰＥ Ｏ ＩＳ 均 ＜１０×１ Ｌ 无 阳性 结 果 。 ． ０／ ，
３ 讨 论
肝肝功能衰竭 Ｈ Ｖ的感 染状 态 ， 骨髓 干细胞移 植治 疗肝 功能 Ｂ 为
衰竭重要依据。
１ 资 料 与 方 法
【 关键 词】 Ｈ Ｖ感染 ； 肝功能 衰竭 ； 骨髓干细胞 ； 单个核干细胞 ； 核 酸检 测 Ｂ
大量研究表 明， 乙肝 病 毒 主 要 呈 嗜肝 性 ， 感 染 者 外 周 血 中 在 可 以分 离 出 完 整 的 Ｈ Ｖ 颗 粒 。 但 是 ， 于 感 染 者 本 身 的 造 血 系 Ｂ 对 统 及 骨 髓 干 细 胞 是 否 感 染 则 报 导 极 少 。 本 研 究 拟 通 过 对 慢 性 乙 ＨＢ Ｄ Ａ≤５×１ Ｃ ＰＥ ／ Ｖ Ｎ ０ Ｏ Ｉ Ｓ Ｌ测 定 有 效 。
还鲜见报导。为此 ， 笔者采集 ８例 乙肝肝衰竭患者动员 至血 中之
富 含 骨 髓 于细胞 的单 个 核 细 胞 ， 过 裂 解 、 取 Ｈ Ｖ Ｎ 通 提 Ｂ Ｄ Ａ并 应 用 Ｐ Ｒ法 检 测 其 Ｈ Ｖ Ｎ 以探 讨 乙 肝 肝 功 能 衰 竭 患 者 骨 髓 干 细 Ｃ Ｂ Ｄ Ａ， 胞 乙肝 病 毒 感染 状 态 。 本 实验 从 ８例 乙肝 肝 衰竭 患 者 骨 髓 千 细 胞 无 ＨＢ Ｄ Ａ 测 出 Ｖ Ｎ 结 果初 步说 明 ， 漫 长 的 乙 肝 感 染 过 程 中 ， 髓 干 细 胞 并 非 为 嗜 在 骨 乙肝 病 毒 性 细胞 ， 自体 骨 髓 千 细 胞 不 存 在 乙肝 感 染 问 题 。此 外 ， 经 过 系统 抗 病 毒 治 疗 并 达 到 基 本 目标 （ Ｂ Ｄ Ａ ＜１０Ｘ１３１ Ｈ ＶＮ ． ０ ／ ）
ｇ ｎ ｔｒｃ ｌ ｒ ｍ ｏ ｅ ｍａｒ ｗ ｄ ｆ ｒｎ ｉ ｔ ｉｔ ｕ ｃ ｉｎ ｌｈ ｐ — ｅ ｉ ｅｌ ｆｏ ｂ ｎ ｒ ｉ ｅ ｅ ｔ ｅ ｎ ｏ ｆ ｎ ｔ ａ ｅ ａ ｏ ｓ ｏ ｆ ａ ｏ
冻存 （ 每管３ １待检 。Ｐ Ｒ定 量检测 ， Ｐ Ｒ时循 环程序设 置 ０ ） Ｃ 将 Ｃ
以同样 条件设 ２管 阴性对照 ， 管 临界值对 照和 ４管阳性 作标 １ 准； 萤光信号设定为 Ｆｒ 荧光素 ； ａ ｏ 萤光信 号收集 设定 为 ６ ０℃并设
定 阳性 Ｓ Ｎ Ｔ Ｄ拷 贝数 ， 见样 本设 定 为 Ｕ Ｋ 检 定 结 果 分 析 条 件 待 Ｎ Ｎ， 设 定 Ｃ 值 ： ００ 检 定 结果 判 定 Ｈ Ｖ Ｎ ｔ ４．， Ｂ Ｄ Ａ拷 贝数 为 １０×１ １ ． ０／ ≤
衰竭病例 ， 龄 ４ ５ 年 Ｏ～ ５岁 ， 合 ２ ０ 符 ０５年 ５月 中华 医 学 会 感 染 病 学 分 会 肝 衰 竭 与人 下 肝 学 组 在 肝 衰 竭 的 诊 治 指 南 。
细胞 ， 与细胞再 生 ， 参 从而 治疗肝损 伤 。笔者 利用这一 结果 ， 将患者 自体骨髓干细胞作 为供体 在体外 分离纯 化后移植 患者肝 内， 应用于慢性肝衰竭治疗 。但肝衰竭患 者多数为乙肝 病毒感染 所致 ， 其骨髓干细胞是 否感 染乙肝病 毒是这一治疗 技术 开展 的关 键 。乙肝病 毒为 Ｄ Ａ病毒 ， Ｎ 其对肝 细胞具有 独特 的宜侵性 ， 故称 其为嗜肝病毒。也有研究证实它不但对肝细胞具有易感性 ， 尤其
用 自体 骨髓 干 细胞 移 植 治 疗 肝 衰 竭 完 全 可 行 ， 用 担 心 再 感 染 乙 不
１ ｉ； ２ ０ ｌ ０ｒｎ 加 ０ 乙醇（ ６ ～１０ ） ａ ９％ ０ ％ 混匀 ， 把全 部移入 柱 内； 将
上 清 移 人 ＱＡ ｍ Ｓ ｉ Ｉａ Ｐ ｐｎ性 内 ， ２ ｍ 放 １的 收 集 管 中 ， ０ （ ６ ０ ０ ｇ 约
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上 清 ， ２ ０Ｉ Ｂ 用 ０ ｌ Ｓ重悬沉淀 ， ｘＰ 析 至 １５ｍ 离心管 中。加 ２ ｌ ． ｌ ０
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肝病毒 问题 ， 至于机制方面 尚有待进一步探讨 。
参 考 文 献
９０ ０ｒｍｎ ０ ｉ离心 】ｒｎ弃 滤液和收集 管 ， ／ ａ ｉ 将柱放入 新收集 管 中加 ５０Ｉ ｕｆ ０ ｌ ｆ ｒ试 剂 ２０ ０ ｇ离 心 ３ ｉ 柱 干燥 ； 心 将 柱 放 ｘ Ｂ ｅ ０ ａ ｒ ｎ使 小
一
【 收稿 日期 】 ２ １ ０ ０ ０— ８—１ ０
（ 文编辑 ： 本 程旭 然 ）
３ ～ ０
［ ］ ｅ Ｄ， ｕ Ｋ， ａｇ— ｅｇＪ ｅａ．Ｉ ｉｏｈｐｔ ｉｅ ３ Ｌ ｅＫ Ｋ ｏ Ｔ Ｗｈ ｎ Ｐ ｎ ， ｔ １ ｎｖ ｒ ｅ ａｃｄ ｆ － ｔ ｉ ｆｒ
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１ｍ ｎ 洗 ２次） 再用 ２０ Ｉ 去离子水重复洗 １ ， 置 １ｍｉ ｉ（ ； ０ ｌ ｘ 次 静 ｎ以 ６００ｒｍｎ离心ｌｒｉ， ０ ｉ ／ ｎ 分别装 ２ 离心管中（ ． １ ， ２ ａ 个 １５ｍ ） 一 ０ｃ Ｃ
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观察对象标本检测 Ｄ Ａ均 阴性 。结论 慢 乙肝肝 功能 衰竭 患者 骨髓干 细胞无 乙肝病毒 Ｈ Ｖ感 Ｎ Ｂ
对象， 集落刺激 因子 （ Ｇ—Ｃ Ｆ 诱导骨髓干细胞至周 围血 中后 ， 以梯度 离心 方法富集外周 血 中单 个核 细胞 ， Ｓ） 再 并提取 乙肝病毒 核酸 ， 最 后 用 Ｐ Ｒ法进行 核酸检 测。结果 Ｃ
周血单个 核细胞 ， 达到要求后应用血细胞分离机对外周血干 细胞 进行分离。
分 离 后 立 即进 行 细 胞数 测 定 ， 取 １ｍ 单 个 核 细胞 放 一８ 并 ｌ Ｏ℃ 冻存 。核 酸 提 取 过 程 如 下 ： 一８ 取 ０℃ 冻 存 的单 个 核 细 胞 管 立 即 放入 ３ ７℃ 水 浴 中充 分 震 荡 至 完 全 溶 解 ； １ １ 心 管 中 加 入 在 ５ｍ 离 ｌ ｌ Ｂ ， 加 入 溶 解 的 细 胞 ， 匀 ，５０ ０ｒｍｎ离 心 ５ ｒｎ 弃 ０ｍ Ｓ 再 Ｐ 混 １ ０ ／ ｉ ｉ； ａ
３Ａ型， ３ 试剂 由深圳 匹基生物 工程有限公司提供 ） Ｈ Ｖ核 酸提取 ，Ｂ 试剂盒为德国 Ｑ Ａ Ｅ Ｉ Ｇ Ｎ产品 ， 北京众磊生物科技有 限公司提供 。
１３ 方 法 ． 对 ８例 临 床 确 诊 患 者 先 行 抗 病 毒 治 疗 （ 苷 或 核 苷 核 酸 类 似 物 ） 待 外 周 血 Ｐ Ｒ定 量 检 测 ＨＢ ， Ｃ Ｖ含 量 ＜１０Ｘ１３Ｃ Ｐ ． ０ Ｏ — ＩＳ １ Ｅ ／ 后再 每 日给予 ２ ０—３ ０ ｇｄ ０ ０ ／ Ｇ—Ｃ Ｆ皮 下 注 射 ， 在 此 期 Ｓ 并 间监 测患 者外 周 血 单 个 核 细 胞 增 长 状 态 。于 注 射 ３～ 查 外 ４ｄ后
中外 医 学研 究
２１ ０ ０年 １ 第 ８卷 １月
第２ ５期
Ｃ Ｉ Ｅ ＥＡ Ｄ Ｆ Ｒ ＩＮ Ｍ ＤＣ ＬＲ Ｓ Ａ Ｃ Ｈ Ｎ Ｓ Ｎ Ｏ Ｅ Ｇ Ｅ ＩＡ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ
胎
ｙ－ ｌ 誊 薯宰 ＿ ㈡。 ｜ｊ 誊 － ０ ｌ － ｌ ｜ ◆ 。 ０ 爹 ｆ 宠 孝 ｌ 曩 誊ｓ ｜ 誊 ｜ ： 癸 ≯ ∞ 誊ｌ Ｉ 一 ｌ ｌ薯 蟊 曩 蘩 ｌ
在 大单 核 细 胞 能 够 检 出 阳性 标 志 物 ， 在 骨髓 干 细胞 中 是 否 感 染 但
１２ 试剂与仪器 ．
ＭＣ Ｒ多功能细胞采集仪 （ 国血液技术公 司 Ｓ 美
Ｍ ｅ ｏｅｃ 产 品 ） 荧 光定 量 Ｐ Ｒ 扩 增 仪 （ ａｍ ｎｔｓ ｉ ， Ｃ 日本 大 和 产 品 Ｆ Ｄ一 Ｑ
源自文库
骨髓于细胞用于人类肝 脏疾病 治疗是 人们关 ， 问题 和 目 ｔ的 ２
８例 观 察 对 象 系 ２ ０ ０ ６～２０ ０９年 慢性 乙肝 肝 功 能
１１ 一般资料 ．
标 ，ｈｉ Ｔ ｅｓ ｅ等…报道 ， 骨髓干细胞存体 内不但 能分化为肝 细胞 ， 而
且 能 分 化 为 胆 管 细 胞 。大 量 研 究 表 明 ， 骨髓 干 细胞 能 够 分 化 为肝
为３ ７℃ ５ｒｎ ９ ｉ，４℃ １ ｉ ，５℃ ５ ｅ 、 ０Ｓ（４ 循环 ； ａ ｎ９ ａ ｒ ９ｓｃ６ ｏ ３ ・ ２个 ０Ｃ ｅ，
取 反 应体 系溶 液 ３ ｌ 待 检 样 品 ２ Ｉ （ 测 前 放 室 温 解 冻 ） ９ 加 ｌ检 ｘ 并
ｔｃ ｔ ｏ ｙｅ—ｌ ｅ ｃ ｌ ．Ｊ Ｃ ｉ ｎ ｅ ｔ ０ ２，１ ９：１ ９１—１ ０ ． ｉ ｅｌ ｌ Ｉ ｖ ｓ ，２ ０ ｋ ｓ ｎ ０ ２ ３ ２
１５ｍ 收 集 管 中加 ２ ０ Ｉ 去 离 子 水 静 置 １ｍｉ ６ ０ ｒｒ ｎ离 心 ． ｌ ０ ｌ ｘ ｎ ０ ／ ｉ ａ
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乙肝 感 染 肝 衰 竭 患 者 骨 髓 干 细 胞 的 初 步 研 究 与 应 用
曲 乃 方 张 璞 樊 美香 哈 尔滨 市传 染病 院 （ 黑龙 江
【 摘要】 目的
金 贞子 刘 屹 东 哈 尔滨 １ ０ ０ ） ５ ０ ０
探讨慢 乙肝肝功能衰竭 患者骨髓干细胞 乙肝病 毒（ Ｖ） 染状 态。方法 选择慢 性 乙肝 肝 衰竭 患者作 为研 究 ＨＢ 感
２ 结果
本 检 测 ８例 乙 肝 肝 功 能 衰 竭 患 者 Ｈ Ｖ Ｎ Ｂ Ｄ Ａ样 品 的 Ｃ ＰＥ Ｏ ＩＳ 均 ＜１０×１ Ｌ 无 阳性 结 果 。 ． ０／ ，
３ 讨 论
肝肝功能衰竭 Ｈ Ｖ的感 染状 态 ， 骨髓 干细胞移 植治 疗肝 功能 Ｂ 为
衰竭重要依据。
１ 资 料 与 方 法