消毒与灭菌 ppt课件

（三） 湿热灭菌技术
3高压蒸汽灭菌法 ▪ 由于蒸汽有很强的穿透能力，湿热灭菌
对耐热芽孢杆菌来说，温度升高10 ℃时， 灭菌速度常数可增加8～10倍，对营养细 胞更高。
▪ 蒸汽来源方便，价格低廉，灭菌效果可 靠，是目前最为常用的灭菌方法。因此 实验室、工厂化生产中广泛采用湿热灭 菌。湿热灭菌有经济快速等特点
• 主要针对必须保持干燥的实验器具或材料 （培养皿、接种针、固定化细胞用的载体 材料等）。
（二）火焰灭菌法
利用火焰直接杀死微生物的灭菌法称 为火焰灭菌法。该法方法对设备要求 低，操作简单，灭菌彻底，但使用范 围有限，仅适用于接种针、玻璃棒、 三角瓶口等的灭菌。
（三） 湿热灭菌技术P11
▪ 湿热蒸汽比干热空气穿透力大，易使菌 体蛋白变性而使微生物死亡。利用饱和 蒸汽进行灭菌的方法称为湿热灭菌法。
• 臭氧：原理（常温常压下）O3=O2+O(单个氧原子）。特点： 不存在任何有毒残留物，称为无污染消毒剂。适用：环境消 毒

• 去垢剂：新洁尔灭 （苯扎溴铵、溴化苄烷 铵）
新洁尔灭是表面活性剂类洁净消毒剂。它 在水溶液中以阳离子形式与菌体表面结合， 引起菌体外膜损伤和蛋白变性。10 min能 杀死营养细胞，但对细菌芽孢几乎没有杀 灭作用。一般用于器具和生产环境的消毒， 不能与合成洗涤剂合用，不能接触铝制品。
消毒不一定能达到杀菌的要求，而灭菌能 达到消毒的要求。
思考：消毒与灭菌的概念及区别
第一节 化学灭菌方法P19
• 原理：某些化学药剂能与微生物细胞物质 发生反应而具有杀菌作用。如甲醛、氯 （或次氯酸钠）、高锰酸钾、环氧乙烷、 季铵盐（如新洁尔灭）等。
• 适用范围：化学药剂适于接种室、培养室 等环境的灭菌，接种操作前小型器具的灭 菌等。
▪ 简易消毒法，适用与消毒餐具、衣裤等 的消毒
（三） 湿热灭菌技术P11
2间歇蒸汽灭菌法。 ▪ 100℃流通蒸汽加热30min，培养箱内常
温过夜或24h后芽孢萌发成营养体，再用 蒸汽灭菌。反复三次即可。可达到完全 灭菌的目的。
▪ 适用于不耐高温的物品，如血清培养基 的灭菌。
（三） 湿热灭菌技术P11
戊二醛 在酸性条件下，不具有杀死芽孢的
能力，只有在碱性条件下，才具有杀死芽 孢的能力，常用2％的溶液，常用于器具、 仪器和工具等灭菌。
6氧化剂：
• 高锰酸钾 高锰酸钾溶液的灭菌作用是使蛋白质、氨基酸 氧化，使微生物死亡，一般用0.1％～0.25％的溶液。
• 氯气 Cl2+H2O HClO+HCl 次氯酸 盐酸
第四章 消毒与灭菌技术
教学情境：
注射前皮肤消毒 晒被子 熏蒸食醋预防感冒 等生活经历
第四章 消毒与灭菌技术 P19
灭菌：利用物理和化学方法杀灭或除去物 料及设备中所有微生物的过程，包括繁殖体 和芽孢。
消毒：用物理或化学方法杀死物料、容器、 环境中的一切病原微生物，一般只能杀死营 养细胞而不能杀死芽孢。
• 2酸： 乳酸（丙醇酸、乙羟基丙酸)，乙酸， 过氧乙酸 过氧乙酸是强氧化剂，它是广谱、 高效、速效的化学杀菌剂，对营养细胞、细 菌芽孢、真菌孢子和病毒都有杀灭作用。
• 3碱：石灰水 （熟石灰的水溶液） • 4易酚污类染：环苯境酚，（且石水炭溶酸性、差C，6H使6O应）用毒受性到较限大制，，
而酚类衍生物的使用，扩大了作为消毒剂的 使用范围。来苏儿（甲酚皂溶液）
• 实际应用时，对一些要求保持干燥的实验器具和 材料可以采用干热灭菌法
（一）干热灭菌法
• 是一种极端的手段，温度高、时间长。 • 原理：氧化作用是干热灭菌的主要根据。
• 160-170℃持续2h或170-180℃持续1h； 180℃45min, 180℃持续2h或250℃45min； 140℃持续3h； 160℃保温1 h。自然降温 至60℃才能开启箱门取出材料。
• 化学药品的灭菌使用方法，根据灭菌对象 的不同有浸泡、添加、擦拭、喷洒、气态 熏蒸等。
• 1醇：70-75％酒精溶液 75％酒精溶液的杀 菌作用在于使细胞脱水，引起蛋白质凝固变 性。对营养细胞、病毒、霉菌孢子均有杀死 作用，但对细菌的芽孢杀死作用较差。常用 于皮肤和器具表面杀菌。苯氧乙醇2%水溶液
▪ 3高压蒸汽灭菌法。一般我们所说的湿热 灭菌法指的就是高温蒸汽灭菌法。常用 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 。 条 件 为 121 ℃ ， 101KPa，15—30 min，因为蒸汽穿透 能力强，灭菌效果好，所以湿热灭菌为 最基本的灭菌方法。
▪ 原理：借助于蒸汽释放的热能使微生物 细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的 化学键，特别是氢键受到破坏，引起不 可逆的变性，使微生物死亡。
• 5醛：甲醛 甲醛(HCHO)是强还原剂，它能 与蛋白质的氨基结合，使蛋白质变性，对 氨基和蛋白质的变性有较强活性，这是用 甲醛作为灭菌剂的根据。使用时可以以2份 37％甲醛溶液与1份KMnO4混合，或者将 37％甲醛溶液直接加热，产生气态甲醛用 于灭菌。甲醛灭菌的缺点是穿透力差。
福尔马林（甲醛30-40%水溶液）
▪ 1流通蒸汽法。只能杀死营养体而不能杀 死芽孢
▪ 2间歇蒸汽灭菌法。适用于不耐高温的物 品，可达到完全灭菌的目的。
▪ 3高压蒸汽灭菌法。彻底迅速的灭菌方法， 最常用。
（三） 湿热灭菌技术P11
1流通蒸汽法。将材料置于蒸锅或蒸锅的笼 屉上，盖好盖，待有蒸汽均匀冒出后， 持续15min。只能杀死营养体而不能杀 死芽孢。
• 过氧化氢，环氧乙烷，漂白粉（含氯消毒剂），
• 漂白粉：（次氯酸钠、氯化钙、氢氧化钠的混合物） 漂白粉 的化学名称是次氯酸盐(次氯酸钠，NaOCl)，它是强氧化剂， 也是廉价易得的灭菌剂。它的杀菌作用是次氯酸钠分解为次 亚氯酸，后者不稳定，在水溶液中分解为新生态氧和氯，使 细菌受强烈氧化作用而导致死亡，对杀死细菌和噬菌体均有 效。
第二节 物理灭菌的方法P13
（一）干热灭菌法
• 进行干热灭菌时，微生物细胞发生氧化，微生物 体内蛋白质变性和电解质浓缩引起中毒等作用， 其中氧化作用导致微生物死亡是主要依据。
• 由于微生物对干热的耐受力比对湿热强得多，故 干热灭菌所需的温度要高，时间要长，一般 160～170 ℃，1～1.5 h。