菝葜组织培养及植株再生体系的建立

菝葜组织培养及植株再生体系的建立

本研究对菝葜组织培养快速繁殖技术进行了探索。以菝葜的带芽茎段、茎段及叶片为材料,系统地研究了菝葜组织培养直接和间接器官发生途径的各个培养

阶段中基本培养基、生长调节剂和活性炭等因素的影响,筛选出了各阶段的适宜

培养基,成功地获得了菝葜再生植株,建立了系统的菝葜植株再生体系。

试验结果如下:①菝葜外植体最佳取材时间是4月初,启动率高,污染率和褐

化率相对其他月份较低。带芽茎段、茎段和叶片的启动率分别是:93.33%、75.00%、53.33%;污染率分别是:13.33%、16.67%、21.67%;褐化率分别是:35.00%、43.33%、

51.67%。

②菝葜带芽茎段和茎段的最佳灭菌时间是0.1%HgCl₂处理5min,叶片最佳灭菌时间是0.1%HgCl₂处理3min。③防褐化处理:叶片切割

成1.0×1.0cm²大小有利于减轻褐化,褐化率为35.00%;外植体进行

暗培养10天后,带芽茎段、茎段和叶片三种外植体的褐化率都降到最低,分别为

20.00%、26.67%、30.00%。

④带芽茎段腋芽的诱导:以当年生枝条上的带芽茎段为外植体,最适合带芽

茎段腋芽诱导的培养基配方是:MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.01mg/L+IBA 0.05mg/L,

诱导率为75.00%,褐化率为16.67%。⑤愈伤组织的诱导:当年生枝条上的茎段和

叶片诱导愈伤组织失败,而以无菌苗的茎段和叶片作外植体成功地诱导出了愈伤

组织。

适合无菌苗茎段和叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方分别

是:MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.05mg/L+2,4-D2.00mg/L和

MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L+2,4-D2.00mg/L,出愈率分别为36.67%和43.33%。

⑥腋芽的增殖培养:适合腋芽增殖的最佳培养基配方

是:MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L,增殖倍数4.30,有效苗数 2.40。

⑦愈伤组织的增殖与分化:适合愈伤组织增殖培养的最佳培养基配方

是:MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L+2,4-D3.00mg/L,增殖率是60.00%;适合愈伤组织分化的最佳培养基配方是:MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L,分化率是

48.89%。⑧壮苗与生根培养:适宜菝葜生根的最佳培养基配方

是:1/4MS+NAA3.00mg/L+AC1.00g/L,生根率为80.00%,平均生根数为 4.00。

添加活性碳的培养基对生根诱导的效果更好。⑨炼苗与移栽:适合菝葜炼苗的最佳基质为珍珠岩、蛭石、河沙=3:2:1的方案,移栽苗成活率达到最高,为86.67%。