医学形态学——实验课学习资料
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• 给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最后 一次给药24h之后处死并取材。
• 药物剂量：20% CCl4 0.1ml/20g • 特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
注射CCl4一个月后
正常组
CCL4 组
正确持镊法
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
缝
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形 ，较锋利，用于缝合皮肤 、软骨、韧带等坚韧组织 ，损伤性较大。
➢ 铲头针：临床较少用。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理。 7.爱护公共财物，节约各种试剂,每次实验结束后都要
轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
形态学实验（一）
实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
✓ 分子量153.84，微溶于水，可与乙 醇、乙醚、氯仿及石油醚等混溶。
✓ 操作注意事项：有毒，加强通风。
CCl4对肝脏损伤机理
CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后, 产生自由基CCl3-及Cl
CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能
肝纤维化、肝硬化
CCl4模型制备过程
实验课要求
1.进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序 ，手机要保持关闭或无声状态，以免影响他人。
2.必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果。 3.动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察
动物。 4.取及动物时，注意个人安全。
5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必
须及时清洗干净。
２）口服给药法：灌胃法 ３）其他途径：呼吸道给药
脊髓内给药 直肠内给药
麻醉效果的观察
➢呼吸：深慢而平稳 ➢反射活动：明显迟钝 ➢肌张力：全身肌肉松弛 ➢皮肤夹捏反应：皮肤夹捏反射消失
正确持剪刀法
为拇指和第四指分别插入剪刀柄的两环，中指放在第 四指环的剪刀柄上，食指压在轴节处起稳定和向导作 用，有利操作。
➢ 可先回抽注射器，确认 无血管或脏器刺破。
➢ 切勿用力过猛，以免刺 伤内脏器官。
动物术前准备
实验前动物需： 禁食 12-24小时 禁水 4-6小时
以免手术时出现呕吐及窒息死亡等现象
动物实验常用麻醉剂
（１）吸入性麻醉剂：乙醚、氯仿等 特点：a.麻醉量与致死量相差大；b.麻醉深度
易于掌握；c.麻醉后恢复快
针
圆针 铲头针
三角针 直针
器械打结法
肝硬化造模的主要方法
➢化学性肝硬化模型 ➢结扎胆总管肝硬化模型 ➢实验性免疫肝硬化模型 ➢血吸虫虫卵所致肝硬化模型 ➢转基因肝硬化模型 ➢复合法
化学性肝硬化模型
四氯化碳（ CCl4 ）：carbon tetrachloride
CCl4结构式
✓ 无色、易挥发、不易燃的液体。具 氯仿的微甜气味。化学性质稳定。
（２）非吸入性麻醉剂：巴比妥类、氨基甲酸乙酯 、水合氯醛、氯胺酮等
特点：优点是使用方法简便、麻醉过程平稳， 且一次用药便可维持较长时间等；缺点是动物的苏 醒较慢，麻醉深度和使用量较难控制。
5%水合氯醛，按0.2m1/20g腹腔注射
麻醉药给药途径
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
小白鼠的生物学特性
１）体型小，体重20-40g，寿命一般为2-3年。 ２）性情温顺，胆小怕惊，对外来刺激极为敏感。 ３）属杂食性，胃容量小，不耐饥饿。对温、湿度 变化敏感。 ４）性成熟早，繁殖力强。
小白鼠的捉拿与固定方法
先用右手将鼠尾抓住并提起， 将其旋转数周后放在实验台面 上，在小白鼠向前爬行时用力 向后拉尾，此时用左手的拇指 和食指捏住小白鼠两耳和头颈 部皮肤，然后将鼠置于左手心 中，拉直后肢并用左手无名指 和小指压紧尾巴和后肢，右手 即可作注射、灌胃等实验操作
CCL4 组
结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
切开 皮肤
切开 腹膜
正常人体胆总管解剖
小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端丝线结扎
切断胆总管、缝合
结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
术后１周后胆管明显扩张
肝脏
胆囊
wk.baidu.com
胃
术后１周后可见胆囊、胆 囊管及肝总管明显扩张； 皮肤、肝脏明显变黄
胆囊
胆囊管 肝总管
正常组
BDL组
BDL组
每个组 4只
正常组 1只 加药组 3只
考核方式:
1.平时成绩（平时实验操作能力，实验态度，出
勤率 ）
30%
2.实验报告书
70%
思考题
➢肝纤维化和肝硬化的病理特点？ ➢人体肝门部解剖特点？手术时注意事项？ ➢人体胆总管与十二指肠的关系？ ➢肝外胆汁淤积引起肝损伤的机理？ ➢胆漏的原因及临床表现？
常用给药途径与方法
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：饲料给药 胃管给药
腹腔注射方法
➢ 小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将 注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～1.0cm， 再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤 及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。
• 药物剂量：20% CCl4 0.1ml/20g • 特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
注射CCl4一个月后
正常组
CCL4 组
正确持镊法
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
缝
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形 ，较锋利，用于缝合皮肤 、软骨、韧带等坚韧组织 ，损伤性较大。
➢ 铲头针：临床较少用。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理。 7.爱护公共财物，节约各种试剂,每次实验结束后都要
轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
形态学实验（一）
实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
✓ 分子量153.84，微溶于水，可与乙 醇、乙醚、氯仿及石油醚等混溶。
✓ 操作注意事项：有毒，加强通风。
CCl4对肝脏损伤机理
CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后, 产生自由基CCl3-及Cl
CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能
肝纤维化、肝硬化
CCl4模型制备过程
实验课要求
1.进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序 ，手机要保持关闭或无声状态，以免影响他人。
2.必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果。 3.动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察
动物。 4.取及动物时，注意个人安全。
5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必
须及时清洗干净。
２）口服给药法：灌胃法 ３）其他途径：呼吸道给药
脊髓内给药 直肠内给药
麻醉效果的观察
➢呼吸：深慢而平稳 ➢反射活动：明显迟钝 ➢肌张力：全身肌肉松弛 ➢皮肤夹捏反应：皮肤夹捏反射消失
正确持剪刀法
为拇指和第四指分别插入剪刀柄的两环，中指放在第 四指环的剪刀柄上，食指压在轴节处起稳定和向导作 用，有利操作。
➢ 可先回抽注射器，确认 无血管或脏器刺破。
➢ 切勿用力过猛，以免刺 伤内脏器官。
动物术前准备
实验前动物需： 禁食 12-24小时 禁水 4-6小时
以免手术时出现呕吐及窒息死亡等现象
动物实验常用麻醉剂
（１）吸入性麻醉剂：乙醚、氯仿等 特点：a.麻醉量与致死量相差大；b.麻醉深度
易于掌握；c.麻醉后恢复快
针
圆针 铲头针
三角针 直针
器械打结法
肝硬化造模的主要方法
➢化学性肝硬化模型 ➢结扎胆总管肝硬化模型 ➢实验性免疫肝硬化模型 ➢血吸虫虫卵所致肝硬化模型 ➢转基因肝硬化模型 ➢复合法
化学性肝硬化模型
四氯化碳（ CCl4 ）：carbon tetrachloride
CCl4结构式
✓ 无色、易挥发、不易燃的液体。具 氯仿的微甜气味。化学性质稳定。
（２）非吸入性麻醉剂：巴比妥类、氨基甲酸乙酯 、水合氯醛、氯胺酮等
特点：优点是使用方法简便、麻醉过程平稳， 且一次用药便可维持较长时间等；缺点是动物的苏 醒较慢，麻醉深度和使用量较难控制。
5%水合氯醛，按0.2m1/20g腹腔注射
麻醉药给药途径
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
小白鼠的生物学特性
１）体型小，体重20-40g，寿命一般为2-3年。 ２）性情温顺，胆小怕惊，对外来刺激极为敏感。 ３）属杂食性，胃容量小，不耐饥饿。对温、湿度 变化敏感。 ４）性成熟早，繁殖力强。
小白鼠的捉拿与固定方法
先用右手将鼠尾抓住并提起， 将其旋转数周后放在实验台面 上，在小白鼠向前爬行时用力 向后拉尾，此时用左手的拇指 和食指捏住小白鼠两耳和头颈 部皮肤，然后将鼠置于左手心 中，拉直后肢并用左手无名指 和小指压紧尾巴和后肢，右手 即可作注射、灌胃等实验操作
CCL4 组
结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
切开 皮肤
切开 腹膜
正常人体胆总管解剖
小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端丝线结扎
切断胆总管、缝合
结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
术后１周后胆管明显扩张
肝脏
胆囊
wk.baidu.com
胃
术后１周后可见胆囊、胆 囊管及肝总管明显扩张； 皮肤、肝脏明显变黄
胆囊
胆囊管 肝总管
正常组
BDL组
BDL组
每个组 4只
正常组 1只 加药组 3只
考核方式:
1.平时成绩（平时实验操作能力，实验态度，出
勤率 ）
30%
2.实验报告书
70%
思考题
➢肝纤维化和肝硬化的病理特点？ ➢人体肝门部解剖特点？手术时注意事项？ ➢人体胆总管与十二指肠的关系？ ➢肝外胆汁淤积引起肝损伤的机理？ ➢胆漏的原因及临床表现？
常用给药途径与方法
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：饲料给药 胃管给药
腹腔注射方法
➢ 小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将 注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～1.0cm， 再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤 及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。