临床检验技师微生物培养基讲义

第八章培养基

本章内容

一、培养基的组成成分

二、培养基种类

三、分离培养基的选择

培养基

人工配制专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。

组成成分：

1.营养物质

2.凝固物质

3.抑制剂或指示剂

培养基的组成成分

营养物质：应含有氮源、碳源、无机盐类和生长因子等。

（1）蛋白胨提供氮源。

（2）肉浸液可提供氮源和碳源。

（3）牛肉膏营养价值低于肉浸液，但因无糖可用作肠道杆菌鉴别培养基的基础成分。

（4）糖类除葡萄糖、蔗糖主要作为碳源和能源的基本成分外，其他糖类和醇类主要用于鉴定细菌所做的发酵反应。

（5）血液既含有营养物质，又能提供生长因子，所以用于培养营养要求较高的细菌。另外，还可根据细菌在血液培养基中的溶血现象而进行鉴定。

（6）无机盐类提供各种元素，如：钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。

（7）鸡蛋和动物血清仅用于制备一些特殊的培养基。如培养结核分枝杆菌的鸡蛋培养基和培养白喉杆菌的吕氏血清培养基等。

（8）生长因子常在培养基中加入维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生长因子。

凝固物质

最常用的凝固物质为琼脂，特殊情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。

抑制剂和指示剂：用于选择、鉴定及判断结果。

1.抑制剂：必须具有选择抑制作用。目的在于抑制非检出菌（非目的菌）的生长，以利于检出菌（目的菌）的生长。常用胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。

2.指示剂：在培养基中加入一定种类的指示剂，是为了观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。亚甲蓝常用作氧化还原指示剂。

培养基种类

1.基础培养基：肉汤。含牛肉浸液和蛋白胨。广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。

2.营养培养基：基础培养基中加入特殊成分，供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。如血琼脂平板、巧克力血平板。

3.鉴别培养基：观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物通过指示剂显示来鉴别细菌。如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。

4.选择培养基：加入抑制剂抑制标本中杂菌生长，有助于所选择的细菌种类生长（SS琼脂）。

5.特殊培养基：厌氧培养基和细菌L型培养基（疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基、高渗培养基）等。

分离培养基的选择

根据标本来源、培养目的、可能存在的病原菌。

1.营养肉汤：标本及各类细菌的增菌培养。

2.血平板：各类细菌检验标本的分离。

3.巧克力血平板：疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标本。

4.中国蓝平板或伊红亚甲蓝平板：筛选革兰阴性细菌；鉴别发酵型革兰阴性杆菌菌种。

5.麦康凯平板：筛选革兰阴性杆菌和非发酵菌。

6.SS琼脂：筛选肠道致病菌，如志贺菌和沙门菌。

7.碱性琼脂或TCBS琼脂：从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。

8.血液增菌培养基：用于从血液、骨髓中分离常见病原菌。

血琼脂平板是

A.选择培养基

B.基础培养基

C.营养培养基

D.特殊培养基

E.鉴定培养基

『正确答案』C

『答案解析』血琼脂平板是营养培养基，是在基础培养基的基础上加入了血液。

在培养基中加入某种化学成分或抗生素以抑制某些细菌的生长而有助于需要的细菌生长，此培养基称为

A.基础培养基

B.鉴别培养基

C.选择培养基

D.营养培养基

E.特殊培养基

『正确答案』C

『答案解析』选择培养基：加入抑制剂，抑制标本中杂菌生长，有助所选择的细菌种类生长（SS琼脂）。

下列哪种为鉴别培养基

A.血平板

B.普通营养琼脂

C.克氏双糖铁琼脂（KIA）

D.SS琼脂

E.巧克力平板

『正确答案』C

『答案解析』克氏双糖铁琼脂（KIA）为鉴别培养基，其加入的是指示剂。

用于培养肠道致病菌的强选择性培养基是

A.SS平板

B.中国蓝平板

C.双糖铁培养基

D.乳糖发酵管

E.巧克力平板

『正确答案』A

『答案解析』SS平板是用于培养肠道致病菌的强选择性培养基。

用于志贺菌及沙门菌分离的培养基是

A.血平板

B.麦康凯平板

C.营养肉汤

D.SS琼脂

E.TCBS琼脂

『正确答案』D

『答案解析』SS琼脂：筛选肠道致病菌如志贺菌和沙门菌。

分离培养流感嗜血杆菌的常用培养基为

A.血平板

B.巧克力培养基

C.SS培养基

D.TCBS培养基

E.EMB培养基

『正确答案』B

『答案解析』巧克力血平板：疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等的标本。

患者女，哺乳期，右侧乳房出现红肿痛，并形成脓肿，无菌抽取脓液做细菌培养时，首选的分离培养基是

A.肉汤培养基

B.营养琼脂

C.血平板

D.巧克力平板

E.麦康凯培养基

『正确答案』C

『答案解析』患者可能为金黄色葡萄球菌引起的乳腺炎，因此应选用血平板进行分离培养。

观察细菌动力最常使用

A.液体培养基

B.半固体培养基

C.固体平板培养基

D.固体斜面培养基

E.厌氧培养基

『正确答案』B

『答案解析』半固体培养基最适用于观察细菌动力。

在肠杆菌科的细菌鉴定中，选择性培养基的选择主要取决于

A.标本类型

B.取材的时间

C.标本量的多少

D.患者年龄

E.临床症状

『正确答案』A

『答案解析』在肠杆菌科的细菌鉴定中，选择性培养基的选择主要取决于标本类型。

KIA琼脂一般不用于观察

A.乳糖发酵

B.葡萄糖发酵

C.硫化氢产生

D.产气现象

E.动力

『正确答案』E

『答案解析』KIA琼脂常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力，而不用于观察动力。