第六章 化妆品的安全性评价

毒性 极毒 剧毒 中等毒 低毒 实际无毒
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法
(二) 急性经口毒性试验
当化妆品成分的皮肤毒性低时, 很难测得其经皮肤的LD50, 为 了解该化学物质与已知毒物的相对毒性, 以及由于婴幼儿误服化妆 品的可能, 进行经口毒性试验也很必要。
1. 定义: 系指受试物一次经口饲予动物所引起的不良反应。 剂量表示法同急性皮肤毒性试验。
一、化妆品安全性评价程序 第二阶段: 亚慢性毒性和致畸试验 1. 亚慢性皮肤毒性试验 2. 亚慢性经口毒性试验 3. 致畸试验 第三阶段: 致突变、致癌短期生物筛选试验 1. 鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验) 2. 体外哺乳动物细胞染色体畸变和SCE检测试验 3. 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变率检测试验 4. 动物骨髓细胞微核试验 5. 小鼠精子畸形检测试验
凡是试验过程中死亡的动物和有毒性反应的动物, 均应进行尸检和肉 眼观察。当肉眼可见病变时, 还应进行病理组织学镜检。
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法 (一) 急性皮肤毒性试验
7. 结果评价:
兔 半数致死量
LD50<5 44≥LD50＞5 350≥LD50＞44 2180≥LD50＞350 LD50＞2180
第六章 化妆品的安全性评价
容貌变“雪白粉嫩” 无异于“饮鸩止渴”
事件回放:
不久前，中国《北京晨报》的一则报道令人记忆犹新：一 位31岁的女士应用一家美容院出售的增白祛斑霜一个月后，皮 肤发生了“翻天覆地”的变化，像婴儿皮肤一样细嫩。但只要 停用这种祛斑霜面部立即变黑，肤质比美容前还差，为了维持 效果，6年里她花了不下10万元。后来，她由于常感头晕目眩 而“检测”了该祛斑霜和自己，才发现祛斑霜汞含量超标7.4万 倍，而自己体内汞含量超标41倍！她患上了慢性汞中毒。
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法
(一) 急性皮肤毒性试验
5. 剂量和分组: 将两种性别的实验动物分别随机分为5-6组, 若用赋 形剂, 需设赋形剂对照组。每组最好10只动物。各剂量组间要有适当的组 距, 以使各剂量组产生一系列的毒性反应或死亡率。最高剂量可达 2000mg/kg。
1. 凡属于化妆品新原料, 必须进行五个阶段的实验。 2. 凡属于含药物化妆品必须进行动物急性毒性试验、 皮肤 与粘膜试验和人体试验, 但是根据化妆品所含成份的性质、使用 方法和使用部位等因素, 可分别选择其中几项甚至全部试验项目。 3. 凡属于化妆品新产品必须进行动物急性毒性试验、 皮肤 与粘膜试验和人体试验, 但是根据化妆品所含成份的性质、使用 方法和使用部位等因素, 可分别选择其中几项甚至全部试验项目。 4. 凡进口化妆品应由进口单位提供安全性评价资料。
“天然的”≠“安全的”
增白化妆品中大量应用的三种天然成分： 一、果酸：它是从各种天然蔬果等天然物质中 提取的有机氢氧基酸。
果酸的“美容换肤”原理：以酸腐蚀皮肤， 使表皮剥落，同时一些浅表的暗斑、痤疮、细 小皱纹等也被去除了，而新表皮长出后皮肤就 变得细嫩了。
不安全性在于：果酸浓度掌握不好会发生 灼伤、果酸被皮肤吸收后可以引起过敏反应。
实验动物应在动物笼内观察3-5天, 使其适应环境, 并观察其健 康状况。
正式给药前24h, 将动物背部脊柱两侧毛发剪掉或剃掉, 注意不 要察伤皮肤,因为损伤能改变皮肤的渗透性, 受试物涂抹处, 不应少 于动物体表面积的10%。 各类动物体表面积计算方法见附录A。
4. 受试物的配制: 若受试物是固体, 应磨成细粉状, 并用适量 水或无毒无刺激性赋形剂混匀, 以保证受试物与皮肤良好的接触。 常用的赋形剂有橄榄油、羊毛脂、凡士林等。若受试物是液体, 一 般不必稀释。
2. 动物的准备: 分别选用两种性别的成年小鼠和/或大鼠。小 鼠体重18-22g,•大鼠180-200g, 或选择其它敏感的动物。
实验前, 一般禁食16h左右, 不限制饮水。
3. 受试验溶液的配制: 常用水或食用植物油为溶剂。 若受试 物不溶于水或油中, 可用羧甲基纤维素、明胶、淀粉做成混悬液。 给药最大体积,小鼠不超过0.4ml/20g体重,大鼠不超过1.0ml/100g体 重。
因此，消费者不要频繁、长期使用果酸化 妆品。
二、熊果苷（对一羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷） ：它多是从沙梨树、虎耳 草等植物中提取的化学物质，能抑制人体酪氨酸酶的活性。但熊果苷具有 高度的光敏感性，因而其化妆品中要添加大量防晒剂，容易加速皮肤老化， 敏感肌肤者更不宜使用；此外，熊果苷浓度较高时，反而会引起皮肤细胞 内的黑色素增加。
第六章 化妆品的安全性评价
一、化妆品安全性评价程序 第一阶段: 急性中毒和动物皮肤、粘膜试验
1. 急性毒性试验 (1) 急性皮肤毒性试验 (2) 急性经口毒性试验 2. 动物皮肤、粘膜试验 (1)皮肤刺激试验 (2)眼刺激试验 (3)皮肤变态反应试验 (4)皮肤光毒和光变态反应试验
第六章 化妆品的安全性评价
2、银戒判断铅多少 在使用一种化妆品之前先在手背或者耳根上试用，这两
个部位是人体感知最敏感的区域，均匀涂抹之后，将手边的 银戒指(其他银制品也可代替)在涂抹区域稍用力摩擦，如呈 现黑色或有浅黑色痕迹，说明其中含有铅等重金属物质。
口红中都含有铅，选择口红时要尽量找那些含铅少的， 而且要越少越好。然而，怎样能知道口红中含铅量的多少呢？ 同样可以用这个方法来判断：在购买口红时，将口红样品抹 在自己的手背上，然后用银戒指在上面磨擦，边磨边观察口 红的颜色变化，口红变黑说明口红中含铅，黑色越深，含铅 量越大。
6. 试验方法: 将受试物均匀地涂敷于动物背部, 并用油纸和两层纱布 覆盖, 再用无刺激性胶布或绷带加以固定, 以防脱落和动物添食受试物, 共敷药24h。试验结束后,可用温水或适当的溶剂清除残留的受试物。一般 观察一周。若给药4天后仍有动物死亡时, 仍需继续观察一周。
给药后注意观察动物的全身中毒表现和死亡情况, 包括动物皮肤、毛 发、眼睛和粘膜的变化, 呼吸、循环、自主和中枢神经系统、四肢活动和 行为方式等的变化。特别要注意观察震颤、惊厥、流涎、腹泻、嗜睡、昏 迷等现象。
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二. 化妆品安全性评价试ຫໍສະໝຸດ Baidu方法
2. 试验方法
(1) 急性皮肤刺激试验(一次皮肤涂抹实验)
A. 试验前24h, 将实验动物背部脊柱两侧毛剪掉, 不可损伤表 皮, 去毛范围左右各约3×6cm。
B. 取受试物0.1ml(g)滴在2.5×2.5cm大小的四层纱布上敷贴在 一侧皮肤上,或直接将受试物涂在皮肤上,然后用一层油纸覆盖,再用 无刺激性胶布或绷带加以固定。另一侧涂赋形剂作为对照。敷用时 间一般为24h, 亦可一次敷用4h。试验结束后用温水或无刺激性溶剂 除去残留受试物。
受试物最高剂量可达5000mg/kg体重。
5. 试验方法: 正式试验时,将动物称量,并随机分组, 然后用特 制的灌胃针头将受试物一次给予动物。若估计受试物毒性较低, 一 次给药容量太大, 可在24h内分成2-3次给药, 但合并作为一日剂量 计算。
给药后, 密切注意观察并记录动物的一般状态、中毒表现和死 亡情况, 并进行LD50的计算。
第六章 化妆品的安全性评价
一、化妆品安全性评价程序 第四阶段: 慢性毒性和致癌试验 1. 慢性毒性试验 2. 致癌试验 第五阶段: 人体激发斑贴试验和试用试验
第六章 化妆品的安全性评价
一、化妆品安全性评价程序 以上程序和方法适用于在我国生产和销售的一切化妆品原料
和化妆品产品, 但并非所有的原料或产品都要做所有项目的试验, 国家标准对此作了规定:
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法 (一) 急性皮肤毒性试验 人体接触化妆品主要途径是皮肤。当评价化妆品及其成分对人
体健康的可能危害时, 进行皮肤毒性的研究是必不可少的。 1. 目的: 确定受试物能否经皮肤渗透和短期作用所产生的毒性
反应, 并为确定亚慢性试验提供实验依据。 2. 定义: 系指受试物涂敷皮肤一次剂量后所产生的不良反应。 剂量表示方法: 以敷用受试物的质量(g、mg)•或以实验动物平
均单位体重敷用受试物的质量(mg/kg)来表示。 一次敷用受试物引起50%受试动物死亡的剂量, 称为半数致死量
(LD50)。 LD50值的单位为mg/或g/kg体重。
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法
(一) 急性皮肤毒性试验
3. 动物的准备: 选用两种性别成年大鼠、豚鼠或家兔均可。 建议试验起始动物体重范围为大鼠200-300g, 豚鼠350-400g, 家兔 2.0-3.0kg。
皮肤刺激是指皮肤接触受试物后产生的可逆性炎性症状。 1. 试验方法的原则 (1)受试物应以一次剂量或多次剂量涂(敷)于健康的无破损的皮 肤上。 (2)每种受试物至少要用4只健康成年动物(家兔或豚鼠)。 (3)试验均采用自身对照。 (4)受试物使用浓度, 一般情况下, 液态受试物采用原液或预计 人应用的浓度。固态受试物则用水或合适赋形剂(如花生油、凡士林、 羊毛脂等), 按1:1浓度调制。 (5)凡具有高度皮肤毒性, 或pH<2或pH>11.5的化学物质,均不进 行本项实验。
增白化妆品
一是含汞类，也是最常见的有毒增白化妆品。 二是含铅类。 三是氢醌。
氢醌可抑制酪氨酸酶，减少皮肤黑色素形成，还明显抑 制细胞DNA合成。氢醌局部应用可引起红斑、炎症，皮肤色 素缺失与沉着共同出现，高浓度使用可导致褐黄病、耳聋、 关节炎、白细胞减少等。此外，氢醌是苯在体内的主要中间 代谢物之一，与苯的致白血病等恶性肿瘤性质直接相关。动 物实验表明，在皮肤上每日涂抹氢醌丙酮溶液总量达20mg时， 容易导致皮肤癌。
三、曲酸（5-羟基-2-羟甲基-4-吡喃酮 ）：它是从酱曲等物质中提取出来 的。在人体皮肤中，酪氨酸在酪氨酸酶的催化作用下，与氧自由基经复杂 的氧化、聚合，最后合成黑色素。曲酸能抑制酪氨酸酶的合成，因而可以 强烈抑制皮肤黑色素的形成，不会产生白斑后遗症，所以曲酸已被配入化 妆水、面膜、乳液、护肤霜中，制成能有效治疗雀斑、老人斑、色素沉着、 粉刺等的高档美白化妆品。20ug/ml浓度的曲酸就可抑制多种酪氨酸酶 （或称多酚氧化酶PPO）的70～80%的活力，在化妆品中一般添加量为 0.5～2.0%。
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法
(二) 急性经口毒性试验
6. 结果评价
半数致死量
大鼠
LD50<1 1≥LD50＞50 50≥LD50＞500 500≥LD50＞5000 LD50＞5000
毒性 极毒 剧毒 中等毒 低毒 实际无毒
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法 (三) 皮肤刺激试验
但研究认为，曲酸有致癌性，使用时浓度不能过高。——北京日化研 究所高级工程师杨能章。
化妆品选用小TIPS
1、带pH试纸去买洗面奶 人体的皮肤是呈弱酸状的，皮肤表面有一层弱酸膜，如
果被破坏就会使皮肤变得脆弱，产生很多肌肤问题，导致细 菌在碱性的环境下滋生。因此选用弱酸的洗面奶对清洁皮肤 有着很好的帮助。如何检测洁肤产品是否呈碱性？一张pH试 纸就能解决问题，将少量的产品涂于试纸上，几分钟后如果 试纸变成深蓝色，则表明该物质中碱性成分过多。
第六章 化妆品的安全性评价
使用化妆品的目的, 是为了保持人体清洁、卫生和健康, 美化容颜。可是, 如果化妆品中含有有害的成分, 皮肤在吸 收有益成分的同时, 就很可能将有害的成分也吸收进去, 其 结果将会事与愿违。因此, 我们必须提出化妆品的安全性问 题。
化妆品与外用药相比, 外用药在达到治疗效果的同时, 如有某些副作用, 只要其与治疗作用相比较轻, 在多数情况 下是容许的。但化妆品是较长期、连续、直接与人体皮肤接 触的, 所以不容许产生副作用。这就要求对化妆品从原料到 产品的化学、物理和生物学性质, 特别是对皮肤的作用做出 安全性的评价。
第六章 化妆品的安全性评价
二. 化妆品安全性评价试验方法
(二) 急性经口毒性试验
4. 剂量和分组: 一般分为5-6个剂量组。每组动物数5-10只, 根据所选LD50计算方法而定。各剂量组间间距大小, 随受试物的毒 性作用带宽窄而异。通常以较大组距和较少量动物进行预测, 找出 其粗略致死剂量范围, 然后再设计正式试验的剂量组。