胰岛素和肾上腺素对血糖的影响

胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响

年级2010 班级11 学号28 实验小组6 姓名：唐俏龄

实验原理和目的：

目的：1.掌握各种激素（胰岛素和肾上腺素）对血糖的调节作用。

2.掌握血糖的定义、正常值及其测定的原理。

基本原理：葡萄糖在有机酸溶液中能与某些芳香胺类化合物如苯胺、联苯胺、邻甲苯胺等起缩合反应，生成希夫氏（Schiff)碱式有色衍生物，再通过分光光度计比色测定

得到葡萄糖浓度。本实验用的是邻甲苯胺法。邻甲苯胺不与非还原性糖物质显色，

而与已醛糖显色。葡萄糖的醛基在热醋酸溶液中与邻甲苯胺的氨基互相缩合成兰

绿色的希夫氏碱，该兰绿色在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。此法测得正常人

的空腹血糖值为70-100mg/100ml,兔约为130mg/100ml左右。

实验动物：健康饥饿家兔2只

实验仪器与药品：试管，刀片，酒精，棉球，注射器，烧杯，蒸馏水，微量移液器，离心机，分光光度计，肝素，胰岛素，肾上腺素

实验方法和操作步骤：

1．采血前准备：取四支试管，编号1，2，3，4，分别加入肝素抗凝剂0.0lml。取健康饥饿家兔两只，分别编号a和b，称体重并记录。

2．注射前采血（用耳静脉采血法）：剪去兔耳静脉处的毛，并用酒精擦拭兔耳部静脉，在其周围抹上凡士林(防止污染、润滑），用刀片轻轻挑破边缘耳静脉，放血入含

抗凝剂的试管（1）和（2），约需2-3ml，边滴边摇，以防凝固。取血完毕，

用干棉球压迫血管止血 .

3.注射激素并再采血：a兔腹部皮下注射胰岛素，剂量按4单位／kg计算，一小时后于心脏

取血入抗凝管（3），测定血糖。将2号兔腹部皮下注射0.1%肾上腺素液，

剂量为每公斤体重0.4ml，观察兔子情况。30min后，心脏取血入抗凝管（4）

中。心脏采血法：将10ml注射器肝素化后，将家兔仰卧，固定四肢，

在左侧胸壁3－4肋间，用左手食指摸到心搏最明显处（颈静脉切迹与胸骨

剑突中点旁）垂直进针（不可左右前后摆动针头），深度约3cm，当有落空

感时，可感觉到针尖随心搏而动，固定针头，采血8ml左右，放入抗凝管中。

4.测定注射前后的血糖

将收集的4管血液离心10分钟(2500r/min)，取上层清液，分别制成胰前(1)、

胰后(3)、肾前(2)、肾后(4) 4管标本。取6支干燥试管，编号，1.2为空

白管和标准管，3为胰前，4为胰后，5为肾前，6为肾后并按表操作。

按下式计算葡萄糖含量。

葡萄糖mg/100ml 血浆=（测定管吸光度/标准管吸光度）x100

观察的项目和指标：6支试管的光度值

实验预期结果：注射胰岛素后血糖含量下降，注射肾上腺素后血糖含量上升。

可能遇到的问题及解决方法：

1.离心机的使用：离心前一定要配平，使用时离心机的盖子一定要盖紧，要等离心机完全静止后才能打开盖子，防止发生危险。

2.微量移液器的使用

3.取血时的注意事项

⑴.注射器、刀片的使用。

⑵.注射器在取血前要肝素化。

⑶.心脏取血时要注意进针的位置和深度。

⑷.注意不要将空气注入动物体内。

⑸血液放入试管中时要先将注射器的针头取下，以防溶血。

4.邻甲苯胺具有毒性和腐蚀性，操作时要注意安全。