呕吐毒素毒性以及检测培训讲学
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呕吐毒素毒性以及检
测
呕吐毒素毒性以及检测
呕吐毒素(vomitoxin),又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),化学名为3?, 7?, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮,属单端孢霉烯族化合物。由于它可以引起猪的呕吐而得名,对人体有一定危害作用,欧盟分类标准为三级致癌物。
呕吐毒素是什么?
呕吐毒素主体成分为DON(deoxynivalenol, 脱氧雪腐镰刀菌烯醇),属于单端孢霉烯族化合物,主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、拟枝孢镰刀菌、粉红镰刀菌、雪腐镰刀菌等镰刀菌产生。另外,头孢菌属、漆班菌属、木霉属等的菌株都可产生该毒素。单端孢霉烯族毒素共有150多种,是一类强有力免疫抑制剂,所引起典型症状是采食量降低,所以这类毒素又叫饲料拒食毒素。呕吐毒素(DON)是其中最重要一种毒素,主要来自镰刀菌属(Fusarium),尤其是禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)和黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)。由于它可以引起猪的呕吐,故又名呕吐毒素(vomitoxin,VT)。
呕吐毒素的污染分布
有调查显示,中国饲料和原料霉菌毒素污染超标的比例为60%~70%,其中呕吐毒素的超标比例接近70%,在被检的玉米、麸皮和DDGS样品中呕吐毒素的检出率均高达90%以上,分别为92.9%、92.3%和100%。豆粕的检出率较低为54.5%。麸皮和豆粕中呕吐毒素未见超标,其平均含量分别为
0.44mg/kg和0.05mg/kg,属于轻度污染。玉米中呕吐毒素的超标率为57.1%,毒素平均含量为
1.01mg/kg,其最高含量为
2.13mg/kg,属于中度污染。DDGS中呕吐毒素的超标率为88.2%,毒素平均含量为1.36mg/kg,最低含量为0.85mg/kg,最高含量为1.72mg/kg,属于中度污染。玉米和DDGS 中呕吐毒素的平均含量极显著高于麸皮和豆粕(P<0.01),DDGS中呕吐毒素的平均含量显著高于玉米(P<0.05),麸皮中呕吐毒素的平均含量极显著高于豆粕(P<0.01)。被检配合饲料中呕吐毒素的检出率为97.4%,仔猪料、中猪料、妊娠母猪料和哺乳母猪料的检出率高达100%。其中,乳猪料呕吐毒素未见超标,其平均含量为0.28mg/kg,显著低于其他种类全价料(P<0.05),属于轻度污染。仔猪料、中猪料、大猪料、妊娠母猪料和哺乳母猪料均有不同程度的超标,超标率分别为14.3%、14.3%、22.2%、10.0%和2
3.1%,其最高含量分别为2.31、1.14、1.44、1.45mg/kg和
1.52mg/kg,属于中度污染。
呕吐毒素的毒性
DON具有很强的细胞毒性,它对于原核细胞、真核细胞、植物细胞、肿瘤细胞等均具有明显的毒性作用。Prelusky等发现,猪喂给呕吐毒素,能提高脑中5-羟色胺(serotonin)和5-羟引哚乙酸(5-Hydroxyindoleaceticacid)的浓度,对脑神经产生麻痹作用。而且,即使是低剂量的DON就能引起猪脑中5-羟引哚乙酸水平的提高。Rizzo等发现不同浓度DON对于大鼠红细胞的溶血作用,其溶血作用有一个阈值,低于此浓度红细胞不会发生溶血反应。DON可能通过3种不同的方式对原核细胞产生毒性作用:
(1)通过渗透磷脂双层,作用于亚细胞水平;
(2)通过与细胞膜相互作用;
(3)通过自由基介导的脂质过氧化作用。DON可能以一种以上的方式同时发挥作用。
呕吐毒素的检测方法
三方圆呕吐毒素酶联免疫试剂盒:呕吐毒素酶联免疫试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被呕吐毒素抗原,样本中的呕吐毒素和微孔条上预包被的抗原竞争抗呕吐毒素抗体(抗试剂),同时抗呕吐毒素抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光度值与其所含呕吐毒素量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中呕吐毒素的含量。