MMFSCNJ出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法

MM_FS_CNJ_007出口禽肉二氯二甲吡啶酚残留量丙酰化一气相色谱法外标法定量

MM_FS_CNJ_0070 出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法

1. 适用范围本方法适用于出口冻鸡中二氯二甲吡啶酚残留量的检验。

2. 原理概要用甲醇提取肉样中二氯二甲吡啶酚，经氧化铝柱净化，除去脂肪和色素。以丙酸酐反应，转化成相应的酯。用内径为毛细管柱气相色谱法(电子俘获检测器) 测定，外标法定量。

3. 主要试剂和仪器

. 主要试剂

无水硫酸钠：分析纯，经650°C灼烧4h。置于干燥器内备用；甲醇：分析纯，经全玻璃装置重蒸馏，收集64〜65C馏分；氧化铝：中性层析用，粒度100〜200筛目，在300C灼烧3h,放入干燥器中备用；

氧化铝：中性层析用，粒度100〜200筛目，在800C灼烧3h，并在130C 烘箱中烘烤1h后，放入干燥器中备用；

丙酸酐：分析纯。经全玻璃装置重蒸馏；吡啶：色谱纯；

助滤剂：Celite 545 ，使用前用甲醇洗涤两次，每次浸泡半小时；四硼酸钠：优级纯，干燥无水，在配制溶液前，应将此试剂在热溶液中重结晶一次；

四硼酸钠溶液：L。取四硼酸钠，溶于1000mL蒸馏水中；蒸馏水：取蒸馏水100mL用正己烷10mL提取，在应用的色谱条件下，取5 卩L提取液注入气相色谱仪内，该正己烷在色谱图上应无干扰被测组分的杂峰；

正己烷：分析纯。重蒸馏，收集67〜69C馏分。取500mL正己烷，通过填

充13cm高度中性氧化铝(在800C灼烧3h)层析柱〔20mm(id) x 200mr〕流速为

2mL/min；

丙酮：分析纯；

二氯二甲吡啶酚标准品：纯度》99%

二氯二甲吡啶酚标准溶液mL):溶解二氯二甲吡啶酚标准品于少量甲醇中，以甲醇准确定容至100mL摇匀，作为标准储备溶液。根据需要再配成适用浓度的标准工作溶液。

. 仪器气相色谱仪：配备电子俘获检测器和热式毛细管柱头进样器；微量注射器：10卩L，50卩L；高速组织捣碎机；康式振荡器；旋转蒸发器；恒温水浴锅；

净化柱：20mm(id) x 200mm玻璃柱。柱底部填约高脱脂棉〔脱脂棉经丙酮- 正已烷（2 + 3）抽取3h〕，装入16g氧化铝（在800C灼烧3h）轻轻敲打装实。用前经40mL甲醇淋洗；

带螺旋盖试管：15mL（13mm 130mm）具有聚四氟乙烯内衬的塑料螺旋盖；离心机：转速3000r/min ；氮气：纯氮（＞%）。

4. 试样的抽取与制备

. 检验批以不超过2500 件商品为一检验批。同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

. 抽样数量

批量（件）最低抽样数

1〜251

（件）

26〜1005

101〜25010

251〜50015

501〜100017

1001〜250020

抽样方法

按规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，原始样品总量不少于2kg,放入清洁容器内，加圭寸后，标明标记，及时送交实验室。

. 试样制备

从每袋原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均匀，充分混匀，用四分法缩分出不少于1000g试样。装入清洁的容器内，加圭后，标明标记。

. 试样保存

将试样于—18C冷冻保存。注：在抽样及制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5. 过程简述

. 提取

取经绞碎混匀的试样约20g（精确到于250mL具塞锥型瓶中，加入50mL甲醇和3g助滤剂于振荡器上提取30min。在平底漏斗内铺上2g助滤剂，抽滤提取液。用40mL甲醇分3次洗涤锥型瓶并将洗涤液移入平底漏斗。滤液定量转移到100mL 容量瓶中，用少量甲醇多次洗涤滤瓶，洗液收集于同一容量瓶中，用甲醇定容。

. 净化

用移液管准确吸取上述滤液20mL，移入氧化铝净化柱中，以2mL/min流速流出。用40mL甲醇洗柱内壁。滤液及洗液接收于100mL烧杯中，用50C水浴的旋转蒸发器或在50水浴中以氮气流将溶剂蒸干。用2〜3mL甲醇溶解残渣，并定量转入15mL带螺旋盖试管，用氮气流将甲醇浓缩至约。

. 酯化

在上述试管中依次准确加入4mL L四硼酸钠溶液，1mL正己烷，25卩L吡啶和50卩L丙酸酐。加塞，振摇1min。在3 000r/min 下离心5min，将上层正己烷移入另一干净具塞试管中，经加少量无水硫酸钠脱水后，供气相色谱分析。

. 标准物酯化

取适用浓度的标准工作溶液，用氮气将体积浓缩至，按进行酯化反应。

.测定

测定色谱条件：

毛细管色谱柱：BP10键合相，（id）x 30m熔融石英制；

柱温：165C；

进样口温度：250C；

检测器温度：250 C；

载气、尾吹气：氮气（＞%柱流量3mL/min；尾吹气流量33mL/min；进样方式：柱头进样方式。

色谱测定：分别准确注入1卩L经酯化后的样品溶液及标准工作溶液于气相色谱仪中，按条件进行色谱分析。响应值均应在仪器检测的线性范围之内。

二氯二甲吡啶酚丙酯的保留时间约为12mi n。

.空白试验：除不称取样品外，按上述测定步骤进行。

6. 结果计算

用色谱数据处理机或按下式计算样品中二氯二甲吡啶酚残留含量：

X h，C* V h s •

m

式中：X 样品中二氯二甲吡啶酚含量，mg/kg；

h——样液中二氯二甲吡啶酚丙酯峰高，mm

hs——标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚丙酯峰高，mm

c——标准工作溶液中二氯二甲吡啶酚浓度，卩g/mL；

V ---- 最终样液的体积，mL

m最终样液所代表的样品重量，g0

注：空白值应从计算结果中扣除。

7. 低限、回收率的测定

.测定低限

本方法测定低限为kg。

.回收率

回收率的实验数据：二氯二甲吡啶酚添加浓度在〜kg范围内，回收率为74%^ 119%

8. 来源：

SN/T —93