酪酸梭状芽孢杆菌培养条件的研究 (1)

表５结果表明２皇凡菌数和芽孢转化宰较高。 综合以｝二试验结果，兼顾菌培和芽孢率，最终确 定碳氮源配比： ２．无机盐及微请元素的配比 根据酪酸梭菌营养利用特性、确定培养摹中无机 盐厦微量元素的配比ｌ三要是依擗以Ｆ几个ＩＪ司素：１） 当有机氮源充足时加入适肇无机氮源有利十菌体生 长。２）适、ｊ提高培养肇中ｋ＋含量可促进菌体生成芽 孢，３）Ｍｇ’含量对芽孢转化率有较为重要的影响。 ４）添加适量ＮａＨｃＯ，、ｃａｃｏ，¨Ｔ缓冲酸度变化，并 口ｉ酸解ｍｃ矿＋和ｃｏ：有助十芽孢，｝．成。龄于以上几个 Ｉ目素，片参考现有培养居，分刖做了几组不同无机盐 及微睫元素配比的培养试验，试验结果见表６。 吱验结果表明，无机盐及微量元素的配比与芽孢 形成干丁街切的关系，尤站是Ｍｇ“埘芽孢转化率的提 ，岛ｆ Ｊ旺嚣的作Ⅲ（Ｐ＜Ｏ ０５），其巾５班【的培芥纠ｔ 果较删旭Ｉ，按此ｌＩｆ确定尤机盐歧微艟Ｊｉ豢的眦 比 ３添加航钒化刑埘陌体，Ｐ艮影响的研究 酪酸棱陌艟版钒黹，Ⅲ此：府就培养胆的抗氧 化ｔ胁ｔ埔锌的影响进ｆ，研究，禾霞验川维，卜索ｃ 和『Ｌ一、ｒ胱氯酸作为抗氯化剂加『入培芥堆降低氧 化迁麒也ｆ１．’ｊ。夺ｒＩ纰做培莽埘比试验，结果地 点７。
材料与方法 ·、陌种：术实验窄保减的ｆＩ｛｝酸棱状芽孢杆菌
ＣＢ５、
：、器材：光。＃融微镜，厌锻罐，温度 ｌ；｜｝犍培锌｛让．机黼壤眷辍≮：
：．、试州：±Ⅲ－ｆＩ紫染液、“凝酸复红
染液、碱１件美蓝染液。 网、片法
ｌ培养方式：液体深层静嚣培养．不须严格厌氧。 ’ＦⅡⅡｌ嗣体培养需置于厌氧罐中进行。 ２．卡盆测方法：菌数测定ｕ，用平板计数法和血球记数 法。茼体形态用结品紫染液歧抗酸性芽抱染色法染 色后于显微镜Ｆ观察。
实验结果表明ｃＢ５适宜接种ｐＨ值为中性，确定 ７．０为最佳接种ｐＨ值。 三．接种热处理实验 酪酸梭菌为内生芽 孢菌，此类菌的优选及 复牡一般都可采用热处 理的方法。据此，本实验
ｏ
万方数据
啊Ｈ■究Ｉ：ｌ兰ｌ兰１）雌ｓＩ帅‘：Ｈ Ｎｏ ５．２００２
万方数据
万方数据
１）碳源选择 以箭萄精、蔗糖、乳精、可溶性淀粉为碳源，进 ｆｊ培莽．结果见表ｌ， 实验结果表明．以Baidu Nhomakorabea萄糖为碳源培莽效果较好。
表１ 碳源选择实验
。
万方数据
啊啊研奔Ｉ：｜三｜兰｜）Ｊ千１三ｓｌＨＲｃ：卜Ｉ Ｎ：．ｓ，２０：１
响科学试验与研究
道．鹰用ｓＥｗ产生的较低免疫激活水平导致仆猜机 体盘㈠质０Ｃ再！极址并提＾（Ｐ（Ｏ ０ｌｊ，片使机体瞳 Ｊ＾Ｊ术搬｛ｌ】！符提，：Ｊ＿５ ｆＰ＜０．Ｏ Ｊ），ｓＥｗ计箔胴体组成的 影响机制’ｊｊ｝降低机体免疫激活水乎街切＃１茭。 ２．５疾璃挖￥４：ｓＥｗ起源Ｊ：埘堆ｒｊ『Ｊ抗’｝素治疗的 桀哆病＋莓忡厦细曲性病原的睡Ａ传播进行阻断．Ⅲ 此ｓＥｗ址消除｛嚣场病原作、净化帑场的干丁救打法。需 野ｆｉ＿ｉ除ｊＩｌｉ豫体的种类决定ｓＥｗ的具体断奶时Ｍ。”， 以ｌｉＩｉ际小Ｍ的阿；分痫腺体的典体Ｈ龄为：小ｒ １０ Ｈ 龄·Ｉ『以淌除猜帅炎支原体、多杀性巴氏杆茼和猜繁 殖呼Ⅱ蜃综舟癌：小Ｊ‘１２｜ｆ龄叮以消除帑霍乱沙ｆ Ｊ氏 陌：小ｒ １４ Ｉ｛龄ｕｎＨ消除猪剐哺血朴凿：小Ｆ ２１｝』
结果与分析 ·、培养路
根据菌种特性，主要就碳源、氮源、无机盐和微 革元素发厌氧条件等儿个因素进行研究以确定培养 越自【讣。 ｌ碳氮源配比
碳源杠葡萄糖、蔗糖、乳精、可溶性淀粉巾选择， 何机氮源选用蛋白胨类、酵母粉及牛肉浸膏组成复 合氮源井提供菌体乍长所需的生长因子。实验中固 定培养基其他组分用量，分别以碳氮源为变量进行 埘比培养，以Ｉ：是不同碳氮源用酷及比例的培养结 果，
酪睦棱状萄：他丰ｌ陌（ｃＩｏｓ”ｉｄｊｕｍ ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）为版 氯内牛芽他阿，寅验川纠、川酪胺梭茼制造的微，ｌ态 脚删１』Ｉ Ｊ前流ｆ，的舞种ｂｄ类产，编＃ｊ比较，其作用效 粜啦并Ｉ Ｌ能’ｊ抗，ｌ二豢眦仉使Ｊｎ。
…扪“泛ｍ川峋怍芽他娄活衙制削普遍存任保存 期蛳、活性小稳定的缺点．给寅阳；脚刖带来许多【丰Ｉ 船、这个ｎｄ燧化动物川微，ｌ·奁制剂卜＾尤向明显。ｆ｜ｌ ｊ： 动物川微小志制剖的纠、允址通过饲料添加途径，胍 ｒ１：此过稚·ｆ，币Ｉｌ』避免的要经历某些『盘温ｒ盘湿的生产、 运输发｛＿ｌｌｆ喂耶亿ＩＩ：芽抱类活茼制剂在这种情况下． ｊ｝活‘Ｐｆ：会凡蛳降低．进巾严艰影响使用效果。而酪酸 棱前制剂ｔ｜ｌ｝】Ｉ衙址以芽抱阡；式存征的．埘各种恶劣 的环境Ｉｑ豢都｛ｊ舣灶的抗１陀，ｌ目ｌ斫制剂保仔期长、活 ｔ１：稳宅，币仃ｎ．１：述川题。嘲此酪酸棱菌制剖拒以药 和饲料添加剂领赋Ｊ｝ｆＩ较一岛的变川价值。
从是７维果ｕｆ姒看扎抗氧化刺添肌’ｊ卉埘培 莽｝．＇求ＪＦ尤｝ＩＪＪ缸影响，蜕叫ｃＢ５作为Ｊ｝干丁较强耐钮 能力的菌株，培芥过枞巾埘捩瓴条件和氯化还原ＩＵ 似要求＂小严格，ｍ抗悄化剂灭『；！『时蜴失活．儿会影 Ｉｌｍ培养堆ｐＨｆＩｆｆ。Ｗ此培柞琏巾ｕ，币必添巾『抗氧化刺。
综合以ｌ：试验｝，々粜、最终确定培养肚配疗．定
表９ 接种ｐＨ值试验
表７ 添加抗氧化剂试验
Ｌ一牛胱氰酸（％） 维’ｉ：索Ｃ（％）
２４ ｈ蔺体澉眭（ｃＦｕ，ｒ札）
鳖型
０．０】
０．１ １．２ ｘ ｌ旷
表８ 酪酸菌培养基配方
！臼
Ｏ
Ｏ ｌ ２ ｘ １０９
“下喜实验均采啊此培养基
表１０ 热处理对照实验结果
名ＣＢＭ，见表８。 ：、接种ｐＨ慎
本实验“几种不同的接种ｐＨ值进行接种培养． 培养结果见表９。
ｎ科学试验与研究
酪欧掺搽劳孢杆萤烤希秀件的研究
王刚天津轻工业学院
摘要通过对酪酸棱菌培养过程中的各种影响因素的研究， 最终确定最佳的培养条件。 在此条件下，酪酸茵茵体得率和茅孢率均可遗到较高水平。 中试也取得相同的结果。 关键词 酪酸梭菌 中图分类号：ｓ８１６．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２ ２８１ ３（２００２）０５一０００８—０５
仉械艟并降低（Ｐ＜Ｏ ｏＪ）：断奶ｎｄ时降低Ｉ＿指肠
＿…『Ｈ自的乳精酶活＋Ｈ．（Ｐ＜Ｏ．０１）、降低１１■指畅和 唪Ｈ匀的碱性磷酸酶活性（Ｐ（００５）：断奶后往小肠
万方数据
ｎ科学试验与研究
７组的培养结果较好。 ５）碳氮综合试验：结台以卜两个试验结果，进
行不同碳氮比Ｆ菌体得率和芽孢，ｐ成率的试验。结 果见表５。
…ｎ将熊棱阿制剂ｊ￡ｎ ｆ：述ｉｆＩｆ多优点．因此进行 酪胞梭汹培捧条什的研ｊ￡址钉必蛋性和实际意义的。
奉吱蛉根据陷睃梭状芽绝杆菌的菌种埔性。以提 ｒ＿陌体褂率和Ｉ芽孢转化率为１１的．针对酪酸梭苗培 ＝｝ｉ：－Ｉ ｒ的埔非肚配比、棱种条件、培养温度、ｐＨ值、培 养肘ｆｉｒＪ等彬响Ｗ求进ｆ，研究。以ｒ足研究报并。
龄ｌ】『以｝ｆＩｊ除伪托犬病病娥胸膜肺炎收线杆蒲、传染
性Ｗ肠炎牺·《等，Ⅲ此，根据ｌ｝体猪场的病顾体情 况，决定ｊＬ体的仃ｊ☆ｓＥｗ｜ｆ龄，通常采ＪｆＩ １０～１４ Ｈ 龄断奶“，以消除大ｊ＿ｉｌ；讣病毒性病晾。对ｊ：小耜讣在 断奶Ｊ１｛＿『就巳纤感染病原的仃猪托断奶后仍。Ｊ观察剑 发牺症状。ＩＮ此．ｓＥｗ片水能克仑保证Ｉ｛猎的疾病 币会传染给１ｒ衢， ２．６ 消化道形怠学：Ｔａｎｇ等（１９９９ｊ埘ｓＥｗ（１２ Ｈ龄断奶）＊，Ｔｒ精断奶后小Ｊ场发疗情况的研究表明． 住｜】ＩＩ龄（断奶『ｊｉｆ）、１５Ｉｆ龄（断奶后３ ｄ）和３４｝ｊ 龄ｍ‘＊ｆｒｊ扦仆离小啮、ｎ：断奶质３ ｄ与断奶前ＨＩ比． ＳＥｗ和『埘ｊ｝ｃ｛ｆｒ猜的微绒ｔ砒并变｛蒈ｌ｛Ｐ＜０川）、隐 离椒融若变深（Ｐ＜Ｏ ０１）、绒己ｒ高度：隐窝深度比