分子生物学 学习要点

题型：

名词解释

分析题

简答题

问答题

Genes perform three major roles:

1.Replicated faithfully

Chapter 2 DNA Replication：Mechanism and Enzymology

（1）掌握DNA和RNA在结构上和功能上的异同，并能够解释为什么DNA分子上需要用T代替U以及用脱氧核糖代替核糖。

（2）掌握DNA双螺旋结构的主要内容、支持DNA双螺旋结构的主要实验证据及其生物学意义；了解大沟对于DNA与蛋白质相互作用的重要性。（3）掌握A型、B型和Z型双螺旋结构之间的异同以及形成A型和Z型双螺旋所需要的条件。

（4）能够画出AT、AU和GC碱基对之间的氢键。

（5）掌握DNA的正超螺旋和负超螺旋形成的原因；能够使用L＝T+W预测DNA 过度缠绕或缠绕不足的后果；知道何种超螺旋有利于DNA复制和转录。（6）了解DNA的变性、复性及其杂交等性质；知道能够影响DNA变性和复性的各种因素。

（7）了解影响DNA的Tm的各种因素。

（8）掌握DNA复制的一般性质，包括半保留复制、具有固定的起点、需要引物、模板需要解链、复制方向总是从5'→3'、半不连续复制、通常是双向复制和具有高度的忠实性等。

（9）了解由Stahl和Meselson设计的证明DNA进行半保留复制的实验思路和具体过程；掌握如何证明DNA复制的方向总是从5'→3'以及如何确定一个DNA分子进行双向复制还是单向复制的方法及原理；了解脉冲标记和脉冲追踪实验的原理以及如何用它们证明DNA复制的半不连续性。

（10）了解以大肠杆菌为代表的五种原核细胞DNA聚合酶(DNA聚合酶工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V)的结构及其功能分工；知道DNA聚合酶Ⅲ是催化大肠杆菌染色体DNA复制的主要聚合酶以及支持这种说法的证据。

（11）了解DNA聚合酶工所具有的5'-外切核酸酶(简称外切酶)活性和绝大多数DNA聚合酶所具有的3'一外切酶活性的生理意义；了解DNA聚合酶(Klenow 酶)的三维结构与其功能之间的关系；掌握DNA聚合酶如何在聚合酶活性和校对活性之间进行切换。

（12）了解真核细胞五种主要的DNA聚合酶(DNA聚合酶αβγδ和ξ)的结构及其功能分工，以及新近发现的一些易错的DNA聚合酶(如DNA聚合酶δεζ)在DNA跨损伤合成中的作用；知道DNA聚合酶α、δ和ε是催化真核细胞染色体DNA复制的主要聚合酶；了解DNA聚合酶Ⅲ和DNA聚合酶δ所具有的高进行性的原因。

（13）掌握DNA聚合酶以外的其他蛋白质或酶(DNA解链酶、单链结合蛋白、引发酶、DNA拓扑异构酶、DNA连接酶、端粒酶等)在DNA复制中的作用。（14）了解原核系统复制子和真核系统复制子的类型及其异同；了解复制起始区和双向复制之间的关系；知道每一个双向复制的复制泡具有两个复制叉，每一个复制叉含有一个前导链和一个后随链。

（15）了解大肠杆菌DNA复制四个阶段的反应；了解大肠杆菌染色体DNA复制的详细机制，并能够利用双聚合酶(二聚体)模型解释一个复制叉内的前导链和后随链如何同时进行复制；能够利用招募解释在复制起始区如何形成预引发体的结构。

（16）了解terE、D、A和terC、B是如何一起终止大肠杆菌DNA复制的。（17）了解Dam甲基化酶在大肠杆菌DNA复制中的作用。

（18）了解真核DNA复制系统与原核复制系统的主要差别；了解SV40体外复制系统大概的复制过程以及T抗原，RFC(复制因子C)，RPA(复制蛋白A)，FEN —1(翼式核酸酶)，增殖细胞核抗原(PCNA)，DNA，聚合酶αδ和ε等在复制中所起的作用。

（19）了解自主复制序列（ARS）的结构以及ARS、起始点识别复合物（ORC）、执照因子（licensing fac-tor）、Cdc6和MCM(微小染色体维持蛋白)复合物之间

的关系。

（20）了解克服线性DNA未端复制问题的四种方法，特别是端粒酶在克服真细胞染色体DNA未端复制问题中所起的作用。

（21）了解滚环复制和D环复制的基本过程及其功能。

（22）了解实现DNA复制的高度忠实性的五种机制并能解释DNA复制为什么需要RNA引物以及DNA复制方向为什么总是从5'→3'。

2.Accumulate mutations thereby allowing evolution

Chapter 3 DNA Damage and repair

Chapter 4 Transposition

（1）掌握DNA重组的定义、类型及其生物学功能。

（2）能够区分解释同源重组的Holliday模型、单链断裂模型和双链断裂模型。（3）了解RecA蛋白、RecBCD蛋白、RuvABC蛋白的结构和功能以及它们在大肠杆菌RecBCD同源重组途芦中的作用。

（4）掌握位点特异性重组与同源重组的差别。

（5）了解attP位点、attB位点、整合酶和整合宿主因子(1HF)在入噬菌体在：进行位点特异性重组过程中的作用；了解整合酶与DNA拓扑异构酶工之间的异伺点。

（6）掌握转座重组的类型及其功能；认识以下几种常见的真核生物‘的转座子：Ac—Ds元件、户元件、Ty元件、Copia元件、SINE和LINE；能够区分逆转座：子与DNA转座子、自主型转座子与非自主型转座子与逆转录病毒之间的关系。

（7）掌握以下名词的定义或含义：嘧啶二聚体、直接修复、碱基切除修复(baseexcision此pa汀，BER)、核苷酸切除修复(nucleotide excisionrepair；，NER)、错配修复、跨损伤合成(translesionDNA synthesis TLS)SOS修复、转录偶联修复(TCR)、易错修复二无嘌呤嘧啶(AP)位点、类变子(mutator)。

（8）了解导致DNA损伤的主要理化因素以及常见的DNA损伤。

（9）知道DNA是细胞内唯一一种受到损伤以后可以完全被修复的分子；了解DNA损伤能够完全被修复与DNA双螺旋结构之间的关系。