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农药生物测定复习题

名词解释

农药生物测定：是指运用特定的试验设计，利用生物的整体或离体的组织、细胞对农纱（或某些化合物）的反应，并以生物统计为工具，分析供试对象在一定条件下的效应，來度量（判断或鉴别）某种农药的生物活性。

负温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫剂的毒效随温度的降低而升高，称为负温度系数的杀虫剂。如浪锹菊酯对伊蚊幼虫的毒力在10°C时比30°C时大7倍。

正温度系数的杀虫剂：在一定温度范围内，杀虫活性随温度升高而增强。如敌百虫。

标准目标昆虫：指被普遍采用的、具有一定代表性和经济意义以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。

杀虫剂内吸毒力：药剂可通过植物根、茎、叶等部位吸收到植株内部，随着植物体液输导，当害虫取食植物或刺吸汁液时，药剂进入虫体并将之杀死。

熏蒸毒力：在适当气温厂利用有毒气体、液体或固体挥发产生的蒸气来毒杀害虫（或病菌）。熏蒸毒力测定：测定杀虫剂从昆虫气孔或气门进入呼吸系统而引起试虫中毒致死的熏杀毒力。化学保护：用药剂处理植物和植物环境，在病菌侵入寄主植物前发挥药效，保护植物不受病菌侵染的措施。

化学治疗：在病原菌侵入植物Z后使用杀菌剂消灭病菌，使植物不再发病。将药剂内吸到植物内部起作用。

化学免疫：植物通过药剂的作用，使植物具冇对病菌的抵抗能力，避免或减轻病菌的侵害。杀菌剂的离体活性测定：只包括病原菌和药剂而不包括寄主或寄主植物的培养皿内测定方法, 通常根据病菌与药剂接触后的反应，如他子不萌发、不氏菌丝等来作为毒力评判的标准。

杀菌剂的活体活性测定：包括病原菌、药剂和寄主植物在内的活性测定，通常以寄主植物的发病情况（普遍程度、严重程度）来评判约剂的毒力。

致死中量（LD50）（medium lethal dosage）：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需要的药剂剂量。指一定条件下，可致供试生物半数死亡机会的药剂剂量，表示单位：mg/kg、ug/g或口g/头。

致死中浓度（LC50）（medium lathal concentration）：指杀死供试昆虫群体内50%的个体所需耍的谿剂浓度。

校正死亡率：采用Abbort（1975）校正死亡率公式，以去除自然死亡对结果的影响。校正死亡率（％）二（处理组死亡率一对照组死亡率）/ （1—对照组死亡率）

根部内吸法：常用盆栽植物或水培植物为材料，将杀虫剂定量加入培养液中，经根系吸收后将杀虫

剂传导至其它部位，然后在植物上接虫后测定取食昆虫的死亡率。

叶部内吸法：用来测定内吸杀虫剂在植物体内横向传导作用，可将一定剂量杀虫剂施加在某一叶片上，经一定时间后采植株其它部位叶片饲喂试虫，或直接在叶片上接虫。

种子内吸法：用一定浓度的药液进行浸种处理，浸泡一定时间待种了充分吸收后，或采用拌种的方法使药剂附着在种子上，将之播入土中，随种子吸收水分而吸收药剂。待幼苗长岀真叶后，在其上接虫或摘叶饲喂试虫。

活体组织法：是利用植物部分组织、器官或替代物作为实验材料评价化合物杀菌活性的方法, 是一种介于活体和离体Z间的方法。

高通量筛选（high throughput screening, HTS）：就是以玻璃片、膜片或培养板为载体，用高密度、微量自动化加样的方法，实现短吋间内分析犬量样本的筛选方法。

填空题

1.常用的移取试虫的方法有一般移取法、趋光法、麻醉法、吸虫法、自行迁移移虫法等。

2.杀虫剂室内毒力测定主要包括两方而的内容：初步毒力测定、精密毒力测定。

3.根据杀虫剂进入虫体的部位及途径的不同，精密毒力测定可分为触杀毒力测定、胃毒毒力测定、熏蒸毒力测定、内吸毒力测定以及特殊作用方式（忌避、拒食）测定等。

4.浸渍法被联合国粮农组织（FAO）推荐为酚虫抗药性的标准测定方法。

5.杀虫剂胃毒毒力测定的最准确的方法是夹毒叶片法。

6.熏蒸毒力测定的三种基本方法冇二重皿法、三角瓶法和干燥器法。

7.杀虫剂毒力统计分析的基本原理为：剂量转换成对数、死亡率转换成机率值。

8.除草剂活力的鉴定方法冇萌芽鉴定、植株鉴定、生理和形态效应鉴定三种方法。

9.除草剂生物测定技术有种子发芽测定法、植株生长量测定法、生理生化指标测定法、症状鉴定法和愈伤组织鉴定法。

10.药剂的筛选一般经过三个程序：实验室初筛、盆栽实验、山间试验。

11.农药生物测定的一般原则为：影响因素的控制、必须设立对照、必须设重复、供试目标昆虫尽量选择农作物害虫。

12.杀虫剂精密毒力测定的口的是：最终求得毒力冋归线及LD50,并判定其是否符合实际。

13.杀菌剂生物活性测定中的含毒介质法乂包括生氏速率法、抱子萌发法和最低抑制浓度法。

14.玻片浸渍法被联合国粮农组织（FAO）推荐为嫡类抗药性的标准测定方法。

15.杀菌剂防病作用原理可分为：化学保护、化学治疗和化学免疫。

16. 试验器材常用的物理灭菌方法有：干热灭菌、湿热灭菌和紫外线灭菌。

17?杀菌剂的毒作用方式有：杀菌作用、抑菌作用、抗产砲作用、增强植物抗病性。

18?杀虫剂生物测定中一般有3种对照：空白对照、溶剂对照和标准药剂对照。

19.致死屮量及毒力回归式的计算方法冇：作图法、最小二乘法、电子计算机编程输入法等。 选择题

1. 杀虫剂触杀毒力测定中最准确、目询最常用的方法是:

通过杀虫剂初步毒力试验应找到试虫死亡率为多少的药剂浓度范围：（A 6. 下列哪种生物测定方法能精确求得每个昆虫或每克虫体重所获药量: 卜?列哪项不屈于杀菌剂的活体组织测定方法: 10.下列哪种药剂屈丁?黑色素生物合成抑制剂:

A 三环哩 11?药剂毒力回归曲线的求解必须设立的处理浓度为几个:

12?点滴法测定鳞翅目昆虫幼虫的触杀毒力时，其点滴部位通常:

13. 杀嫡剂的毒力测定方法可采用:

2. 3. A 药膜法 B 点滴法 C 饲喂法 喷雾法

目前比较理想的杀虫剂胃毒毒力测定的方法是:

A 夹毒叶片法

B 喷雾法

C 饲料混毒法

D 浸虫法

抑菌圈法中浇制的双层培养基，卜?层为清水琼脂培养基,

下层为: A 带菌培养基

B 带毒培养基

C 清水琼脂培养基 4. 5. A 16%-84%

B 20%-90%

C 10-80% 下列方法屮不屈于种子发芽测定法的是:

A.黄瓜幼苗形态法

B.小杯法

C.高粱法

D.去胚乳小麦幼苗法 A 喷雾法

B 浸渍法

C 点滴法 D.药膜法 7. 药害症状诊断的主要类型是:

A 形态效应

B 生理诊断

解剖诊断 9. A 果实针刺法

B 蚕豆叶片法 盆栽法 杀虫剂毒力比较常用下列的哪一项

A LC 25

B LC50 L

C 90

C 活化酯

A3?5个

B 5?7个

C 2?6个 A 头部

B 胸部背而

C 腹部背而

A点滴法B喷雾法C玻片浸渍法

14.对EC50 （95%置信限）下列哪种结果是正确的：（A ）

A 53.54 （48.11-59.57）

B 53.54 （47.11-49.57）

C 53.54 （58.11-69.57）

15?抱子萌发法测定杀菌剂毒力时，形成“悬滴”的目的是：（A ）

A获取较多的氧B获得更大的湿度C获得更大的光照

16.对鳞翅目昆虫拒食的活性测定可采用：（A ）

A叶碟法B点滴法C注射法

判断题

1 ?点滴法是杀虫剂触杀毒力测定最准确的方法，也是目前最常用的方法。（丿）

2.玻片浸渍法被联合国粮农组织推荐为!W类抗药性的标准测定方法，适于雌成嫡的测定。

（V ）

3 ?化学治疗作用测定时要在病原菌侵入植物之前使用杀菌剂。（X ）

4.夹毒叶片法测定杀虫剂胃毒毒力吋，生存组及死亡组的虫数越多越好，屮间组的虫数越少越好。

（X ）

5.抱子萌发标准是抱子芽管长度大于抱子短半径为萌发。（J ）

6.离体活性测定方法可常用于大量杀菌化合物的初筛，且不易漏筛。（X ）

7.采用叶碟法可测定昆虫的拒食活性。（丿）

8.同--种杀菌剂因使用浓度、处理吋间的不同可能表现出不同的毒杀作用方式。（丿）

9.杂草和作物均可作为除草剂生物测定的试材。（丿）

10.除草剂的生物测定技术只能在一定条件和范围内应用。（J ）

11.抑菌圈法测定杀菌剂毒力时，制备双层培养基的目的是为了保证上层培养基厚薄均匀。

（V ）

12 ?化学保护作用测定吋要在病原菌侵入植物之后使用杀菌剂。（X ）

13.测定杀虫剂对家蝇的触杀毒力时，采用点滴法和药膜法测得的毒力大小一致。（X ）

14.校止死亡率不能表示目标昆虫个体间的羌异而引起生理效应的变异性，也不能表示毒力

相差的强度。（丿）

15.夹毒叶片法、液滴饲喂法和口腔注射法均属于杀虫剂胃毒毒力测定屮的定量取食法。

（V ）

16.通过杀虫剂初步毒力试验可确定药剂的毒杀作用方式。（X ）

17.测定非选择性拒食活性时，将处理叶碟和对照叶碟分置于不同的培养皿内。（丿）

问答题

1.简述农药生物测定技术的一般原则。

（1）影响因素的控制：外界环境条件的变化，如温度、湿度、光照等对杀虫剂的理化性状和昆虫的生理状态都有影响；而杀虫剂理化性能的变化能影响对昆虫的毒效；昆虫的生理状态, 如发育阶段、龄期、性别等的不同对杀虫剂冇不同的耐药力。

（2）必须设立对照：一般有3种对照：①空白对照：即完全不处理（在自然状态下）；②溶剂对照：即不含冇效成分的溶剂、乳化剂等。如以丙酮配制的药液进行点滴试验，那么对照组就应点滴内酮，这是为了消除溶剂对测试结果的影响；③标准药剂对照：标准药剂是指在生产中对某种目标昆虫常用的有效约剂，不仅可以同新农约对比，还可以消除一些偶然因素造成的误差。可以根据具体情况和试验要求来设立，一般至少设两种对照。

（3）必须设重复：一般重复三次，每个重复20?50头试虫。

（4）供试的目标昆虫尽量选择农作物害虫：生物测定中所用廿标昆虫应在同一环境条件下饲养得来或采自皿间同一环境条件下的，在生理上、发育上尽量一致。

2.简述菌丝生长速率法测定杀菌剂室内毒力的操作步骤。

①制备菌饼用以制备菌饼的培养基在皿内应薄而匀，接种苹果炭疽病菌或番茄灰霉病菌培养3-4d,在无菌条件下用直径0.4cm打孔器在培养好的菌落外缘切下带菌培养基块■菌饼, 这种来自菌落外缘的菌饼在新的培养基上生长速度的差异较小。

②制备带毒培养基将供试药液稀释至一定浓度后，准确取一定量的药液加入到热的培养基中，混合均匀后倒入培养皿内，冷凝后即成带毒培养基。

③移植菌饼用接种针或消毒的镶子将菌饼反向（冇菌丝的一而向下和培养基贴合）移植到带毒的培养基上。一个培养皿最好接一个菌饼，也可以在直径9cm的培养皿中呈三角形放3个菌饼，但应注意病菌的生长速度及3个菌饼的间距和它们离皿壁的距离，否则得不到圆的菌落。

④结果的检查及表示培养到预定的时间后，取岀培养皿用卡尺测量菌落的直径，每个菌落十字交叉法测两次直径。如果就用这一数值计算抑制生长率，这样测得的直径并不是真止的生长量，真正的生长量是测得的直径减去原來的菌饼直径。虽然对照和各处理均用同一直

径的菌饼，但误差并不因此而消除。

3. 简述容器药膜法测定杀虫剂触杀毒力的基本步騎

采用干燥的三角瓶或其它容器如指形管等，放入一定量的丙酮药液（0.3?0.5ml）,然后均

匀地转动容器，使药液在容器中形成一层纱膜，等谿液干燥后（或丙酮挥发后），放入定量的

目标昆虫，任其爬行接触一定时间（40min 或lh ）后，再将试虫移至止常环境条件下，于规 定时间内观察试虫击倒中毒反应。

4. 简述影响杀虫剂生物测定的因素有哪些。

（1） 供试昆虫：昆虫的不同种类、不同品系、不同的发育阶段、性别与生殖、生理状态以及 营养条件等不同，对杀虫剂的感受性就会冇明显的差异。

（2） 环境条件因素：环境条件对生物测定有显著的影响，在测定中，影响比较明显的因素是 温度、湿度、光照、营养、容器和密度等，因此在生物测定中，对环境条件要严格控制，并 给予适宜的环境条件。

（3） 生物测定技术：处理方法应根据约剂的作用方式和试虫危害特点而定。此外，试验方法、 处理时间及部位等对杀虫剂的感受性也冇不同的影响，在生物测定技术屮均应加以注意。

（4） 杀虫药剂：供毒力测定用的药剂应是标准品（化学纯），其工业品或制剂中因含朵质或 助剂，会影响到毒力。若确难获得标准品，也应尽量选用高含量（＞90%）的工业品，最好不 用商品制剂。

5. 简述蛹类抗药性的标准测定方法-玻片浸渍法的操作步骤。

着），每片粘20?30头。 ③饲虫：放在干净无毒的塑料盒（或大培养皿）内，并放入湿棉球保湿，盖上盖，置于

20?30°C 温度下；

④镜检：经4h 后，用双目解剖镜逐个检查雌哺，如冇死亡个体应挑出弃去，重新粘上健 康的雌嫡。

⑤ 浸药：将粘冇雌嫡的玻片一端浸人待测的不同浓度的药液中，并轻轻摇动玻片，浸5s 后取出，用吸水纸吸去多余的药液；

⑥ 再培养：放在塑料盒内，置于27°C 条件下培养；

⑦ 检查：24h 后在双目解剖镜下检查死广数及存活数。死广标准以小毛笔轻轻触动嫡足 或口器，无任何反应即为死亡。

① 贴双面胶:将双而胶带剪成2cm

长，贴在载玻片的一端，用小铁了夹起

粘胶上的纸片；

② 粘虫：选取健康的3?5d 龄雌成

嚇，用小毛笔挑起并将其背部贴在粘胶

上（注意嫡足、触须及口器不要被粘

载玻片 胶带

雌成媾 图7玻片浸渍法

6.简述种子发芽测定法测定除草剂活性的基本步骤。

（1）首先将供试药剂用蒸帼水配制成5?7个不同浓度的药液；

（2）在培养皿屮放置两层等大的滤纸，分别吸取一定浓度的待测药液均匀分散在滤纸上；

（3）将供试种子在滤纸上摆成一行，每处理重复3次，设蒸谓水处理作对照。

（4）将培养皿放在25±1°C、相对湿度75%-85%> 12h光照条件下培养一定时间后，观察种了发芽率，并测量幼茎长和幼根长，按下式计算抑制率。

发芽率（％）=药剂处理的发芽数/对照处理的发芽数X100 生长抑制率（%）=（对照发芽率一药剂发芽率）/对照发芽率X 100

7.简述抱子萌发法测定杀菌剂室内毒力的操作步骤。

药剂与病菌抱子悬浮液混合液的制备：向病菌斜而的试管屮加入5mL无菌水，用接种环轻轻刮下抱了，使悬浮，倒入三角瓶，用无菌水稀释，在10X10倍显微镜下检查抱了浓度，以每视野80?100个砲子为宜。吸取砲子悬浮液2ml注入指形管，再加入一定浓度的杀菌剂药液2ml配制成-合适的梯度浓度系列。

他子萌发：吸取上述他子悬浮液与药液的混合液，滴在凹玻片上，每处理重复3次，以

不加药剂的也子悬浮液作对照。将凹玻片倒置于垫冇湿滤纸的培养皿内，放入培养箱，适温培养8?24h,调查抱了萌发情况。（一般把萌发芽管长度为砲了短径长度的一倍时看作萌发）。

8.简述夹毒叶片法测定杀虫剂胃毒毒力的基本步骤。

①夹毒叶片的制备：用打孔器打制成2cm直径的圆叶片或用剪刀剪成一定面积的叶片，将待测药剂用丙酮配成不同浓度的药液，分别用微量点滴器定量滴加在小叶片上（叶片面积尽量小为宜），待丙酮挥干。另用淀粉糊（或而粉糊）涂在没冇药的叶片上，小心地与有药叶片对合制成夹毒叶片。

②饲喂方法：为保证试虫冇较人的取食量，在饲喂前应饥饿3-5h, -?般不超过12h,在分析天平上

逐头称重编号后再饲喂。饲喂吋将每一片夹毒叶片放在一个培养皿内，每皿接1头试虫。为使叶片

保湿，可先在培养皿底铺一层湿滤纸，待试虫取食一段时间后，将夹毒叶片取出，根据取食面积计算出取食药量。取食时间要根据药量和昆虫取食速度而定，一般为lOmin 至lh,最长不超过2h。取食量应由小到大有一定差别，取食吋可加以控制。

③结果检查：昆虫取食后放在干净的容器内，放入新鲜植物叶片，24h-72h后检查死亡率。由于各昆虫取食量不同，因此必须单独作观察记录。

④致死中量（LD50）的计算：根据取食而积、单位而积上的着药量及试虫体重，求岀每头试山的单位体重受约量（|Jg/g）o

吞食药量(Ag/g)=吞食面积⑷”)X药量(朋I〃〃/)

吞食药量(凹/。)-约液浓度("g I ml) x滴加量(“/) x 1()7

~ °昆虫体重(g)

根据单位体重受药量由小至大顺序排列，由于在取食量较小时试虫无死亡；随着取食量的加大，出现死、活均冇出现的剂量范围；再加犬取食量，试虫全部死亡。这三种表现口J分成三组：(1)生存组，(2)生死组，(3)死亡组。若试验中三组情况均能出现，则说明实验成功；如缺其中一组，则需重做。第一组及第三组不参与致死中量的计算，是划分生死组界限的，因此，这两组虫数越少越好。屮间组是求致死屮量的范围，所以虫数越多越好。

将中间组死虫的每项单位体重约量总和除以总死亡头数，所得数值为“A”；将中间组活虫的每项单位体重药量总和除以总活虫头数，所得数值为“B”。将A+B除以2即得致死中量, 计算公式为：

致死屮量(LD50)二厲±￡

2

设计题

1.设计一个试验，以确定所给的新农药的作用方式。

(1)触杀作用方式测定：用来判断毒剂通过昆虫体壁进入虫体的触杀毒效。但实际上也不能完全排除部分药剂从气孔、口器进入消化道而致毒的可能，因此在室内测定时要尽可能使药剂发挥接触作用，减少其它致毒方式的可能。常用的方法有浸渍法、药膜法、直接喷撒法、局部施药法等。本试验采用药膜法和直接喷撒法來鉴定农药的触杀毒力作用。

(2)胃毒作用方式的测定：用来判断毒剂通过昆虫取食进入消化道的毒杀能力。必须排除触杀、熏蒸等作用的干扰，一般能准确地反映出胃毒毒杀能力。测定方法是把的剂加入饵料中间饲喂试虫；或将药液注入试虫的口腔内，迫使?其全部吞食，但此种方法不易掌握，目前很少应用。当而认为较理想而应用较广泛的是夹毒叶片法。其基本原理就是在两片叶中间加入均匀分散的药剂，制成夹毒叶片，用其饲喂试虫，药剂随试虫取食进入消化道而发生毒杀作用。

(3)内吸杀虫作用方式的测定：一般采用种子处理、涂茎涂叶、包扎、水培、土壤灌注等方法。内吸杀虫作用即是药剂接触植物的某一部位，如根、茎、叶或种子等，渗入到植物的内部组织，随植物体液传导至全株后，在一定时间内，当昆虫取食带毒的植物或吸取带毒的潮流，而产生致毒反应。多数具有内吸杀虫作用的杀虫剂均兼冇一定的触杀或熏蒸作用。因此, 在进行内吸杀虫作用测定吋要注意其它作用方式的影响。木试验采用茎杆内吸法和根部内吸

法，理解内吸杀山剂的内吸性能并掌握它的温家宝原理和操作技术。

（4）熏蒸杀虫作用方式的测定：一般用于某些化合物是否具有熏蒸毒次，或比较几种熏蒸剂对某种昆虫熏杀毒力的大小，或测定熏蒸剂在不同种类昆虫及同种昆虫不同发育阶段的熏杀毒力等。其基本原理就是纱剂在适当温、湿度下，在固定的空间挥发成气态，并达到一定浓度，与试虫接触，在短时间内能杀死试虫。因此，必须在密闭或近于密闭的场所进行熏蒸处理，才能保证具有足够的蒸气浓度。在实验室内多采用密闭的玻璃或金属器皿，如钟罩、干燥器、三角瓶或广口瓶等进行熏蒸试验。本试验采用三角瓶和培养皿简易熏蒸测定法，了解几咱药剂对试虫的熏蒸作用及毒力大小，学习和掌握熏蒸毒力测定技术。

（5）拒食作用方式的测定：目前有的化学物质对昆虫的作用，不是直接毒杀使其致死，而是引起昆虫生理上的某种特异性的反应，如消除食欲的拒食剂，昆虫负趋化性的忌避剂等。这样的化学物质同样可以达到防治害虫，保护农作物的冃的。木试验采用浸渍法或喷雾法测定供试药剂的忌避作用。

2.设计两种农药鼠戊菊酯和辛硫磷混用后的联合毒力测定试验方案，并采用共毒系数法判断

混用后是否增效。

计算题

用点滴法测定辛硫磷对玉米螟5龄幼虫的毒力，试虫平均体重为0. 046 g/头，每虫试虫点滴0. 8yiL药剂丙酮液，48 h检查试虫死亡率，结果见表1,采用最小二乘法求毒力冋归方程，并求LA。及其标准差和95%置信限。

表1 辛硫磷对玉米螟5龄幼虫的毒力（48h ）

药剂浓度（ppm）供试虫数

（头）

死虫数

（头）

死亡率

（%）

校正率死亡率

（%）

单位体重药量

（Mg/g）

剂量

对数

枚正死亡

率机率值

375120119.27.6 6.5320.8144 3.5675 500120342&327.1&6960.9393 4.3902 7501206352.551.713.043 1.1154 5.0426 10001209881.781.417.391 1.2403 5.8927 150012011293.393.226.087 1.4164 6.4909对照601 1.7■■■■