农药生物测定实验指导
农药生物测定(1)
1、标准目标昆虫：是指被普遍采用的，具有一定代表性和经济意义，以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。
2、毒力：是指药剂本身对不同生物发生直接作用的性质和程度。
3、药效：是在田间或接近田间的条件下所测定的药剂对生物的作用效果。
4、致死中量的置信限：即致死中量的可靠范围，亦即供试昆虫种群致死中量真值的波动范围。
5、内吸杀虫剂：凡是可以通过植物根茎叶以及种子等部位渗入植物内部组织，随着植物体液传导植株，不妨碍植物的生长发育，而对害虫具有很高毒效的化学物质，称为内吸杀虫剂。
6、内吸杀虫作用：昆虫由于受内吸杀虫剂的毒杀作用而致死亡的过程，称之为内吸杀虫作用。
7、杀菌剂室内生物测定：将杀菌物质作用于细菌、真菌或其它病原物（包括线虫）,根据其作用效果的大小来判断药剂毒力。
8、除草剂的生物测定：利用生物体（作物试材、杂草试材，主要指有害生物）对除草剂的反应，来测定除草剂的毒性及其效果的基本方法。
9、杀虫剂室内生物测定：在实验室条件下，以昆虫（包括螨类）对杀虫剂的反应来鉴别某一种农药或某一类化合物的生物活性测定的一种基本方法。
1、杀虫剂生物测定存在的问题（1）评判标准单一（2）人为地固定检查时间（3）无统一的标准试虫（4）一般用校正死亡率表示核心是没有系统评判生物测定结果的方法和标准。
2、影响杀虫剂毒力测定的主要因素分析（1）杀虫剂和溶剂杀虫剂：其理化性质是决定毒力的根本原因。
溶剂：对药剂本身的理化性质一般不产生影响，但不同溶剂会影响昆虫表皮。
（2）环境条件温度：影响到处理前---养虫；影响到处理过程中---挥发、吸收等；影响到处理后---昆虫的死亡率。
湿度：一般不影响杀虫剂的穿透性及作用速度，也不影响解毒过程，通常它只影响昆虫对杀虫剂的忍受力。
光照条件以及昆虫在药剂处理前后的食物供应，营养条件等也会影响到测定结果。
（3）供试昆虫：不同种类的昆虫敏感性不同；同种昆虫不同品系对杀虫剂的敏感性也不同；昆虫不同发育阶段对杀虫剂的敏感性也不同（卵期通常对杀虫剂的敏感性比较低，通常以为有杀虫卵作用的杀虫剂，有很多主要是杀了初孵幼虫）；昆虫的性别与生殖对杀虫剂的敏感性（一般雌性昆虫对杀虫剂的敏感性比雄性昆虫低，但对有机磷杀虫剂来讲，则雌性个体比雄性个体感受性低。
农药生物活性测定实验指导(精)
农药生物活性测定实验指导游红编实验一供试目标昆虫的饲养——棉铃虫的饲养一、实验目的：1、明确标准目标昆虫饲养在生物测定中的意义；2、了解常见目标昆虫的饲养条件及方法；3、学习棉铃虫的饲养方法。
二、实验原理：杀虫剂生物测定必须使用大量、群体整齐、健康程度一致，龄期一致的标准目标昆虫，才能保证对杀虫剂毒力的反应准确。
因此，进行杀虫剂生物测定必须采用人工饲养标准目标昆虫，以保证供试昆虫的充分供应，这是农药毒力试验工作中的最基本的组成部分。
饲养目标昆虫的种类，除采用农作物害虫外，仓库害虫、卫生害虫及其他繁殖力强，便于饲养的昆虫也可采用，通过饲养条件的控制，促使供试目标昆虫尽量达到生理状况一致，以减少试验中的误差。
棉铃虫（Helicoverpa armigera H.）属鳞翅目夜蛾科。
食性杂，可长年饲养。
但因幼虫在三龄期以后有相互残杀习性，故必须单头饲养。
对该虫可采用天然植物饲料，如棉蕾铃、青豌豆、新鲜玉米和辣椒等。
若连续大量饲养，须用人工饲养。
三、主要仪器及试材：1、试虫：棉铃虫；2、饲养用具：养虫室，培养皿（15cm），培养皿（5cm）,养虫缸，纱布等。
3、饲料：（1）、饲料组成：熟大豆粉（g）20.0 玉米粉（g）30.0大麦粉（g）30.0 抗坏血酸（g） 1.0干酵母（g）8.0 琼脂（g） 3.5苯甲酸钠（g）0.8 棉油(ml) 0.536％醋酸(ml) 6.0 10％甲醛(ml) 1.0水(ml) 200(2)、配制方法：取总水量30％的水，加入玉米粉等成分搅拌；另取70％的水，以溶解琼脂，冷却至70℃时与上述成分混合搅拌；饲料均匀倒入培养皿（15cm）内，厚度1.0——1.5cm，冷却后备用。
四、实验方法与步骤：1、饲养条件：养虫室温度保持26——28℃，相对湿度60%——70%，12小时光照。
2、饲养方法：（1）、在培养皿（16cm）放入约0.3——0.5mm厚的饲料若干块，将附有卵块的纱布放入皿内，用黑布将皿口封住，布上压玻璃板，缸下部对着光源，孵化的幼虫可很快到饲料上取食。
食物中的农药测定实验
食物中的农药测定实验一、实验目的通过本实验，了解农药残留在食物中的检测方法，掌握测定食物中农药残留的技术步骤和实验操作。
二、实验器材和试剂1. 器材：酒精灯、分液漏斗、研钵、千分之一称量皿、聚乙烯瓶、移液管、滤纸、离心机等。
2. 试剂：乙酸乙酯、苯酚、醋酸乙酯、氯仿、硫酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、氯化钙等。
三、实验步骤1. 样品准备：选择食物样本，尽量选择新鲜、无昆虫伤害的样品。
如水果、蔬菜等。
将样品洗净并晾干。
2. 样品研磨：将样品磨碎成粉末状，注意避免与空气和灰尘接触。
3. 样品称量：取适量磨碎后的样品，使用千分之一称量皿称取。
4. 提取农药：将样品放入聚乙烯瓶中，加入适量的提取剂，如乙酸乙酯等。
密封瓶口并用酒精灯进行摇匀提取。
5. 过滤提取液：将提取液倒入分液漏斗中，加入适量的醋酸乙酯和苯酚混合溶液，再加入硫酸。
轻轻振荡几下后，使两层液分离。
6. 收集有机层：打开分液漏斗滴取出有机层，注意不要滴到水层中。
7. 农药检测：将有机层溶液置于离心机中进行离心，离心后留下的液体即为含农药样品。
8. 蒸发溶剂：将离心后的有机层溶液放在通风处进行挥发，使其溶剂蒸发。
9. 添加溶剂：将蒸发后的残渣溶于氯仿溶剂中，并加入无水硫酸钠和氯化钙。
10. 过滤溶液：将溶液过滤，用滤纸过滤出杂质。
11. 高温蒸发：将过滤后的溶液放入加热器上进行高温蒸发，直到残渣完全干燥。
12. 农药残留测定：用溶液溶于适量的溶剂中，用移液管移取一定量的溶液，并采用分光光度计等仪器进行测定。
四、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全，避免对身体造成伤害。
2. 实验操作时要严格按照实验步骤进行，注意提取液的使用量和摇匀的时间。
3. 在分液漏斗操作中，要注意两层溶液的分离。
4. 使用化学试剂时要遵守实验室安全操作规范，避免直接接触皮肤和吸入。
5. 实验器材要保持清洁，避免交叉污染。
五、结果分析根据实验步骤所得的数据，可以计算出食物样本中农药的浓度。
农药生物测定田间试验
农药生物测定田间试验一个新药物的发现, 必须两个系统的同时运转一个系统是化学系统, 一个系统是生物学系统农药生物测定与田间药效试验西南大学植保学院丁伟教授一、农药室内生物测定1．生物测定（bioassay ）是由biological 和assay 组合而成，通常是指具有生理活性的物质对某种生物产生效应的一项测定技术。
但是，从更广的范围来理解生物测定，则可概括为：“对生物的任何刺激所产生的效应的测定, 包括来自物理、化学、生物、生理及心理等方面的刺激对生物活体产生的反应。
”总之，生物测定是研究作用物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术。
2．生物测定的一般模式3．农药生物测定（pesticidebioassay ）指在一定条件下利用靶标生物测定其对某些化合物的反应的量度，进而鉴别某种化合物生物活性的基本技术与方法。
靶标生物：通常指有害生物，包括昆虫、螨类、病菌、杂草、鼠类等。
包括这些生物的整体或离体的组织、细胞等。
待测化合物：可以是已经成为农药的化合物，包括杀虫（杀螨）剂、除草剂、杀菌剂、杀鼠剂、杀线虫剂乃至卫生杀虫剂等；也可以是待筛选的化合物（已知物和未知物）。
生物反应：指靶标生物对杀虫、杀菌、除草等作用的反应，可以延伸为凡是干扰破坏有机体正常生长、发育、行为、代谢等效应的反应，如植物生长调节、昆虫生长调节、信息传递物质等。
生物反应用死亡率、抑制率、反应率等指标来表示。
量度：指反应的强度或者大小的指标。
要运用特定的实验设计，以生物统计为工具，借助于数学的方法，来给生物反应以量化表达。
生物活性：指药物或某一个化合物对生物体产生的效应。
如果有，则这个药物或化合物有生物活性，如果不产生效应，则这个药物或化合物就没有生物活性。
4．农药生物测定的知识体系（1）供试对象的准备（包括靶标生物的饲养技术和待测化合物的选择）；也包括组织培养、细胞培养、药剂配制、剂量计算等内容（2）生物测定的操作技术与方法（包括室内生测、小区实验和田间药效实验三个方面）；（3）影响农药生物测定的因素分析；（药剂、生物体、环境、操作方法）（4）农药生物测定结果的评价与表达。
农药学实验原理与方法
农药学实验原理与方法一、农药主要实验原理1.农药的物理性质测定：包括密度、折射率、熔点、沸点等。
测定这些物理性质可以帮助判断农药的纯度和稳定性，以及用于农药配方和施用的参考数据。
2.农药的化学性质测定：包括水解动力学、光解动力学、稳定性、溶解度等。
测定这些化学性质有助于了解农药的降解过程和环境归趋，在研发和使用中能提供科学依据。
3.农药的毒理学测定：包括急性毒性、慢性毒性、刺激性、致敏性等。
通过动物实验，了解农药对生物的毒性程度和影响，以确定农药的安全使用剂量和毒性级别。
4.农药的生物学测定：包括杀菌、杀虫、杀螨、杂草毒性等。
通过室内和田间试验，评估农药对目标生物的杀灭效果和持效期，确定农药的使用方法和推荐剂量。
5.农药的效果评价：包括田间试验和防效测定。
通过对不同施用方法和剂量的试验，评估农药的防效和经济效益，为农民提供科学的农药应用建议。
二、农药主要实验方法1.农药的物理性质测定方法：常用的方法包括测定密度的比重瓶法、测定折射率的折光仪法、测定熔点的差热分析法、测定沸点的蒸馏法等。
2.农药的化学性质测定方法：常用的方法包括测定水解动力学的酶促反应法、测定光解动力学的紫外光照射法、测定稳定性的加热和存储法、测定溶解度的溶液测定法等。
3.农药的毒理学测定方法：常用的方法包括LD50（半数致死剂量）测定、动物器官毒理学测定、细胞毒理学测定、遗传毒理学测定、生殖毒理学测定等。
4.农药的生物学测定方法：常用的方法包括测定杀菌活性的接种法、测定杀虫活性的皮肤接触法、测定杀螨活性的药膜法、测定杂草毒性的土壤带菌法等。
5.农药的效果评价方法：常用的方法包括田间试验的小区试验法、防效测定的虫害指数法、经济效益评价的成本收益比法等。
实验过程中需要注意的几点：1.实验前需了解实验的目的和要求，设计合理的实验方案。
2.配置实验药液时应严格按照实验方案和农药使用说明书的要求进行，确保药液的浓度和质量符合实验要求。
3.必须采取必要的安全措施，如佩戴实验手套、护目镜等，避免接触和吸入农药。
农药室内生物测定试验准则书
农药室内生物测定试验准则书农药是农业生产中常用的一种防治农作物病虫害的工具，但同时也带来了一定的安全隐患。
为了确保农药的安全性，准确评估其对环境和人体健康的影响，进行室内生物测定试验是必不可少的。
室内生物测定试验是一种通过模拟真实环境条件，在实验室中对农药进行毒性评价的方法。
它通过观察和测量农药对特定生物体的影响，来确定其对环境和人体的潜在风险。
首先，室内生物测定试验需要选择适当的实验生物体。
通常选择的实验生物体包括小鼠、大鼠、兔子、鸟类等。
这些生物体代表了不同的物种，在体内代谢和反应机制上有所差异，能够综合评估农药对多种生物体的毒性。
其次，在进行室内生物测定试验时，需要注意实验条件的控制。
温度、湿度、光照等环境条件应与实际使用情况相符合，以保证实验结果的准确性和可比性。
同时，试验中要使用适量的样品和农药浓度，以模拟实际使用时的情况，更好地评估农药的毒性。
室内生物测定试验中，观察指标的选择也很重要。
常用的观察指标包括生长指标、生理指标和生化指标等。
通过测量实验生物体在农药作用下的生长情况、呼吸、代谢等指标，可以了解农药对其生理和生化过程的影响，从而推测其对环境和人体的影响。
此外，室内生物测定试验中还需要进行毒性评价和风险评估。
毒性评价是通过对实验结果的分析和对比，确定农药对实验生物体的毒性程度。
风险评估则是将毒性评价的结果与实际使用情况相结合，评估农药在实际环境中的潜在风险。
通过这些评估，可以为农药的安全使用提供科学依据。
最后，室内生物测定试验的结果需要进行数据统计和分析。
通过对实验数据的处理，可以获得农药的毒性参数，如半数致死浓度（LC50）、半数致残浓度（EC50）等。
这些参数可以用于毒性评价和风险评估，进一步指导农药的使用和管理。
综上所述，室内生物测定试验是一种重要的农药安全评估方法。
它通过模拟真实环境条件，在实验室中对农药进行毒性评价，从而确定其对环境和人体的潜在风险。
在进行室内生物测定试验时，需要选择适当的实验生物体，控制实验条件，选择合适的观察指标，并进行毒性评价和风险评估。
农药室内生物测定技术与方法
农药室内生物测定技术与方法张宗俭(沈阳化工研究院农药生物测定中，沈阳110021)一、农药生物测定的含义及其用途农药生物测定是指利用靶标生物(昆虫、螨类、病原微生物、线虫、植物等)的活体或离体器官、组织、细胞或其代谢物等(如酶、蛋白质等)为试材，测试或鉴别生物活性物质的类型、反应症状或其活性大小的一种方法。
简单地说，农药生物测定技术就是利用靶标生物等对药剂的反应来鉴别农药毒力或药效的一种技术。
农药生物测定主要包括杀虫剂(杀螨剂)、杀菌剂(杀线虫或抗病毒剂等)、除草剂、杀鼠剂以及植物生长调节物质等的生物测定技术。
它涉及靶标生物、测试物质(药剂)、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。
一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性。
农药生物测定技术与农药的使用和开发同时产生，经过长期不懈创新、完善和发展，已经成为研究生理活性物质、靶标生物以及反应强度三者关系的一项专门技术，被广泛应用于新农药的筛选以及作用特性和应用技术评价等研究之中。
纵观目前农药生物测定的研究概况，室内农药生物测定技术主要应用于以下几个方面：1．刨制农药生物活性筛选研究：随着农业生产的发展和人们对地球环境生态和人类健康等的要求不断提高，高效、低毒、环境友好型新农药的开发应用给人类社会和生产企业带来巨大的效益，但同时也由于新农药开发的难度与费用日益增加，如何利用生物测定技术快速高效地筛选新化合物，并准确评价其生物活性以及应用技术，估测其农药生物评价技术报告会市场前景及将来在市场上的占有率和利润额，是决定其创制农药研究成功与否的关键。
利用生物测定方法研究同一类结构或同一作用类型化合物的化学结构与生物活性关系的规律(sAR)以及与靶标作用位点的结合关系，为定向创制新农药和计算机辅助设计新化合物提供基础数据和理论依据。
生物活性筛选被称为农药创制的“眼睛”．对新农药开发研究起着举足轻重的作用。
农药生物测定实验指导
农药生物测定实验指导（研究生）实验一培养基的制作、灭菌和病原菌的接种、培养一、实验目的：1、熟悉并掌握微生物用培养基的制作及灭菌的原理及使用；2、熟悉并掌握微生物的接种、培养及保存方法。
二、实验原理：培养基是供微生物生长的基物，分液体和固体两种。
按成分又可分为天然培养基、半组合培养基和组合培养基。
培养真菌所用的培养基一般用马铃薯培养基，它是半组合培养基，制作比较简单，且能够完全满足微生物的营养要求。
灭菌是杀死所有微生物，保证培养基不被杂菌污染的重要手段之一。
灭菌的方法有四种：热力灭菌、过滤灭菌、化学灭菌和物理灭菌。
热力灭菌在微生物灭菌中占主要地位，分干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用热空气来灭菌，将玻璃器皿等放入烘箱中加热，一般用160-170℃处理1小时或150℃处理2小时，适用于经高温处理不易损坏的干燥物质。
湿热灭菌，即高压蒸汽灭菌，是将灭菌物放入灭菌锅内，维持一定的蒸汽压力，一般为1公斤/cm2左右（相当于121℃），维持半小时，以确保杀死所有微生物，适用于高温高压下不易分解变质的物质和玻璃器皿。
湿热灭菌比干热灭菌效率高。
病原菌接种培养是杀菌剂毒力测定经常进行的工作之一，因培养基性状不同，可采用不同的接种方法。
本实验是练习在固体培养基上接种。
固体培养基的接种方法分倾注和斜面两种接种方法。
接种后的菌种，必须放在适温下培养，在培养期间注意观察菌种的生长情况和有无杂菌污染，温度要保持恒温，培养成熟的菌种必须很好地保存。
三．主要仪器及试材：1、实验器皿：培养皿、容量瓶、移液管、无菌水、PDA培养基[注：以上器皿须经灭菌。
]2、实验仪器：超净工作台、灭菌锅、培养箱、打孔器、酒精灯等。
四．实验方法与步骤：（一）、培养基的制作：1、培养基的组成（PDA）：去皮马铃薯块200克葡萄糖（或蔗糖）10-20克琼脂17-20克水1000ml2、步骤：（1）、在大烧杯中加入1000ml的水，作上标记；（2）、称取去皮马铃薯200克，切成小块，放入盛有水的烧杯中，煮沸30分钟左右，将薯块捞出，留下汁液；（3）、称取17-20克琼脂（事先用水浸泡），加入烧杯中，煮溶后，称取葡萄糖（或蔗糖）10-20克，加入汁液中溶解。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
农药生物测定实验指导（研究生）实验一培养基的制作、灭菌和病原菌的接种、培养一、实验目的：1、熟悉并掌握微生物用培养基的制作及灭菌的原理及使用；2、熟悉并掌握微生物的接种、培养及保存方法。
二、实验原理：培养基是供微生物生长的基物，分液体和固体两种。
按成分又可分为天然培养基、半组合培养基和组合培养基。
培养真菌所用的培养基一般用马铃薯培养基，它是半组合培养基，制作比较简单，且能够完全满足微生物的营养要求。
灭菌是杀死所有微生物，保证培养基不被杂菌污染的重要手段之一。
灭菌的方法有四种：热力灭菌、过滤灭菌、化学灭菌和物理灭菌。
热力灭菌在微生物灭菌中占主要地位，分干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用热空气来灭菌，将玻璃器皿等放入烘箱中加热，一般用160-170℃处理1小时或150℃处理2小时，适用于经高温处理不易损坏的干燥物质。
湿热灭菌，即高压蒸汽灭菌，是将灭菌物放入灭菌锅内，维持一定的蒸汽压力，一般为1公斤/cm2左右（相当于121℃），维持半小时，以确保杀死所有微生物，适用于高温高压下不易分解变质的物质和玻璃器皿。
湿热灭菌比干热灭菌效率高。
病原菌接种培养是杀菌剂毒力测定经常进行的工作之一，因培养基性状不同，可采用不同的接种方法。
本实验是练习在固体培养基上接种。
固体培养基的接种方法分倾注和斜面两种接种方法。
接种后的菌种，必须放在适温下培养，在培养期间注意观察菌种的生长情况和有无杂菌污染，温度要保持恒温，培养成熟的菌种必须很好地保存。
三．主要仪器及试材：1、实验器皿：培养皿、容量瓶、移液管、无菌水、PDA培养基[注：以上器皿须经灭菌。
]2、实验仪器：超净工作台、灭菌锅、培养箱、打孔器、酒精灯等。
四．实验方法与步骤：（一）、培养基的制作：1、培养基的组成（PDA）：去皮马铃薯块200克葡萄糖（或蔗糖）10-20克琼脂17-20克水1000ml2、步骤：（1）、在大烧杯中加入1000ml的水，作上标记；（2）、称取去皮马铃薯200克，切成小块，放入盛有水的烧杯中，煮沸30分钟左右，将薯块捞出，留下汁液；（3）、称取17-20克琼脂（事先用水浸泡），加入烧杯中，煮溶后，称取葡萄糖（或蔗糖）10-20克，加入汁液中溶解。
（4）、加水至标记处，趁热用双层纱布过滤；（5）、将制好的培养基在未凝固前及时分装。
（二）、湿热灭菌：1、在灭菌锅内加入去离子水到指定高度；2、将须灭菌的物品放入灭菌锅内，将盖封闭加热；3、当气压表指到0.3/ cm2时，排出锅内空气；4、当气压升到所须压力（1公斤/ cm2，温度121℃）时，维持压力半小时；5、灭菌完毕，缓慢放气；6、取出锅内培养基，试管作成斜面，以备接种用。
（三）、病原菌接种和培养：1、试管斜面接种，用左手握好装有斜面培养基的试管和菌种试管的底部，右手拔出棉塞，靠近酒精灯火焰，将接种针在酒精灯焰上灼烧后，直接挑取少量菌丝和孢子或连同带菌的培养基小块，放入斜面培养基试管内，轻轻涂抹在斜面上。
并在试管上注明菌种名称、接种日期、组名。
五．实验注意事项：1、注意灭菌操作的方法和灭菌锅的使用方法。
2、病原菌的接种实验要注意无菌操作，整个实验操作过程在无菌操作台上完成。
六．实验结果处理：将接种后的菌种，放在适温下（28℃培养箱中）培养。
并在培养期间注意观察菌种的生长情况和有无杂菌污染。
七．思考题：1、常用的灭菌方法有哪些？实验二杀虫剂精密毒力测定——微量点滴法一．实验目的：1、学习和掌握触杀毒力精密测定技术—微量点滴法。
2、学习农药生物测定数据的处理方法—绘图法，最小二乘法和机率值分析法，求出致死中量（LD50）和致死中浓度（LC50）。
3、明确杀虫剂杀虫毒力表示方法的意义和应用。
二．实验原理：在进行农药杀虫作用方式的实验后，了解某些化合物具有触杀作用的基础上，为了明确其触杀强度以及比较几种药剂的触杀毒力大小时，需采用精密触杀毒力测定技术来求出它的致死中量（或致死中浓度）。
目前许多有机合成杀虫剂大多数都具有触杀作用，因而触杀毒力测定具有一定的重要性，测定方法虽然很多，但基本上可分为两大类：一是全部施药法：如定量喷粉法、定量喷雾法和用一定浓度药液浸渍法等。
其优点是操作方便，比较符合实际施药情况。
但药剂容易被试虫吞食产生胃毒作用。
二是局部施药法：是目前比较精确的触杀毒力测定方法。
一般包括药膜法和微量点滴法。
微量点滴法是将一定浓度和容积的药液点滴在试虫体的一定部位，溶剂挥发后，药剂即可自体壁进入体内发挥触杀作用，药剂不致被试虫吞食。
本实验采用微量点滴法来测定农药的触杀毒力作用。
三．主要仪器及试材：1、试虫：棉铃虫（3龄）2、药剂：氯氰菊酯等3、实验仪器及用具：养虫室、毛细管点滴器、分析天平、滤纸、通针、培养皿（5cm）、容量瓶、具塞小试管及试管架、镊子、移液管、丙酮等。
四．实验方法与步骤：（一）试验前的准备工作1、试虫的移取：选取3龄棉铃虫，大小均匀一致的个体，放在垫有吸水纸的培养皿内，每皿10头，为一个处理。
每个处理重复三次，分别在分析天平上称重，求出平均体重，备用。
2、称药配药：将试药小心地移入洗净干燥的称量瓶中，在分析天平上准确称取一定量试药，放入小烧杯内，加少量丙酮溶解，再移入容量瓶中，加丙酮定容。
摇匀即为母液，备用。
3、毛细管点滴器的质量检定：检查毛细管微量点滴器是否通畅，并练习使用。
（二）预备试验为了确定合适的施药浓度（或剂量）（要求试虫死亡率分布在20-80%范围内），在正式试验前，必须先用几个浓度或剂量（范围较大）进行试点滴，根据死亡结果，确定最合适的点滴浓度，预备试验所用试虫可以减少一半左右。
（三）正式试验步骤1、药液的配制：根据预备试验结果，将容量瓶中的母液按等比级数用丙酮稀释成5个浓度，如1.6、0.8、0.4、0.2、0.1μg/μl等。
每浓度5ml，装入具塞小试管。
并以丙酮为对照。
2、称重：将选好的试虫，在分析天平上称重，每个浓度为一个处理，每个处理10头试虫，重复三次，将每10头试虫放在垫有吸水纸的干净培养皿内，待处理。
3、点滴：使用毛细管点滴器对棉铃虫（3龄）幼虫进行触杀毒力测定。
首先进行预备练习，以毛细管点滴器吸丙酮点滴在滤纸上，反复多次，以点滴的大小均匀一致，每次均有为熟练。
然后点滴虫体，先对照，再从低浓度到高浓度，每个浓度点滴虫体的中胸背部，每虫一滴，每浓度20头，重复三次。
点滴药液量根据试虫大小确定，一般以试虫接受药液不从体壁上流失为宜。
棉铃虫3龄幼虫，点滴量为0.3-0.5μl ，各处理试虫的点药量应一致。
4、培养：处理完毕后，将处理过的试虫置于27℃的环境中，饲喂新鲜饲料，24小时，48小时后检查死虫数，以物触其虫体无任何反应者为死亡。
五．实验注意事项：1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然死亡率底，虫龄虫体大小一致，最好采用人工饲养的试虫。
2、环境条件的选择：温度在20-28℃，相对湿度在60%-80%，通气良好。
3、处理设计：每处理需试虫15-30头，重复三次，每次试验均要设空白对照，施药时要注意各处理用药等量均匀一致。
4、实验中对照（CK ）的死亡率最好小于10%，大于20%时实验必须重做。
5、药液的配制中，要求不少于5个浓度梯度，各处理的死亡率在20-80%之间为最好。
6、点滴操作过程中，点滴力度适宜，应避免力度过大而导致虫体损伤。
并随时检查点滴器是否通畅。
六．实验结果处理：观察死活虫数，计算死亡率及校正死亡率，并将结果记入表中。
%1001%100⨯--=⨯=对照死亡率对照死亡率处理死亡率校正死亡率总虫数死虫数死亡率如自然死亡率超过20%，说明试虫群体生活力差或试验方法有问题，应重做。
为了求得供试药剂的致死中量、需要根据用药浓度及体积求出每头试虫的受药量，并换算出单位虫体重的受药量。
每头试虫受药量（微克）=每微升药液中含药剂微克数×每头试虫受药微升数/=每头试虫受药量（微克）单位虫体重受药量（微克药量克虫体重）试虫平均体重（克） 根据测定结果，以单位体重受药量（或每头受药量）的对数值为x ，校正死亡率换算成机率值为y ，求毒力回归方程y=a+bx ，并求致死中量（LD 50）值，且进行可靠性检验。
七．思考题：1、求出药量对数—死亡率机率值毒力回归方程，求出供试药剂的致死中量。
2、为什么要以致死中量或致死中浓度作为比较药剂毒力的标准。
3、在实验过程中哪些地方容易出误差，如何克服。
实验三杀菌剂毒力测定——生长速率法一．实验目的：学习和掌握杀菌剂生长速率测定法的基本原理和实验方法。
二．实验原理：将不同浓度的药液和热的培养基混合形成含毒培养基，用这种含毒培养基培育病菌，以病菌的生长速率来计算杀菌剂的毒力。
生长速率法适用于不长孢子而菌丝生长较快的真菌。
三．主要仪器及试材：1、 实验药剂：多菌灵，甲基托布津等；2、 供试菌种：水稻纹枯病菌等（培养皿菌种）；3、实验器皿：培养皿、容量瓶、移液管、无菌水、PDA 培养基 [注：以上器皿须经灭菌。
] 超净工作台、灭菌锅、培养箱、打孔器、酒精灯等。
四．实验方法与步骤：1、药液的配制：使用无菌水，将多菌灵配制成1000、500、200、50、20(μg/ml)5个浓度，另设一个无菌水对照。
2、混药培养基平面的制作：将培养基（已灭菌）熔化，在无菌的条件下，取培养基9ml ，加入1ml 配制的药液于灭菌的培养皿，充分混合均匀，制成混药培养基平面，每浓度重复三次。
3、接种：使用打孔器打取菌块，用镊子将载菌的培养基小块放置在含药液的培养基表面，作好标签后，恒温培养。
五．实验注意事项：1、本实验要注意无菌操作，整个实验操作过程在无菌操作台上完成。
2、药液和培养基混合时注意培养基的温度（70-80℃），并保证混合均匀；接种（菌块）前要冷却，接种时菌块的菌丝面向上。
3、用打孔器打菌块时注意打孔器温度不要太高，以免影响菌种的生长。
4、用打孔器打菌块时应在菌落的外缘打菌块，因外缘的生长力强，且差异小。
六．实验结果处理：供试菌培养约2-3天后，当对照处理的菌落长至近培养皿边缘时检查实验结果。
以直尺十字交叉量取各菌落直径，以其平均数为菌落直径。
在计算时注意减去打孔器的直径。
计算抑制生长率：％）径对照菌落直径－菌饼直径处理菌落直径－菌饼直－径对照菌落直径－菌饼直径对照菌落直径－菌饼直抑制生长率＝（100最后将各处理的生长抑制率换成机率值，以对数表示药剂浓度，用作图法求出有效中浓度EC 50，以比较药剂毒力。
七．思考题：1、将实验检查结果记载于结果记载表中，并根据实验结果完成实验报告。
2、比较各种药剂对病菌的毒力。
3、讨论本实验方法的特点。
表3 杀菌剂生长速率测定法测定结果记载表表4 杀菌剂生长速率测定法测定数据换算表实验四 除草剂温室盆栽实验——叶面处理法一．实验目的：防除杂草，保护作物是应用除草剂的目的，因此，除草剂的选择性就显得特别重要。