农药生物活性测定实验指导

农药生物活性测定实验指导

实验指导

游洪扁

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农药生物活性的测定

实验一供试目标昆虫的饲养

--棉铃虫的取食

一、实验目的：

1.阐明标准靶昆虫取食在生物测定中的意义；

2.了解常见目标昆虫的取食条件和方法；

3.学习棉铃虫的饲养方法。

二、实验原理：

农药生物测定必须使用大量数量整齐、健康状况一致、年龄一致的标准目标昆虫，以

确保对农药毒力的准确反应。因此，有必要人为提高农药生物测定的目标昆虫标准，以确

保被测昆虫的充足供应，这是农药毒性试验最基本的部分。

饲养目标昆虫的种类，除采用农作物害虫外，仓库害虫、卫生害虫及其他繁殖力强，

便于饲养的昆虫也可采用，通过饲养条件的控制，促使供试目标昆虫尽量达到生理状况一致，以减少试验中的误差。

棉铃虫属于鳞翅目夜蛾科。它的饮食很杂，可以长时间饲养。然而，幼虫在三龄后有

互相残杀的习惯，因此必须单独饲养。这种昆虫可以用天然植物饲料喂养，如棉花芽、青豆、新鲜玉米和胡椒。如果连续大规模喂食，必须使用人工喂食。

三、主要仪器及试材：

1.试验昆虫：棉铃虫；

2、饲养用具：养虫室，培养皿（15cm），培养皿（5cm）,养虫缸，纱布等。

3、饲料：（1）、饲料组成：熟大豆粉（g）20.0玉米粉（g）30.0大麦粉（g）30.0抗坏血酸（g）1.0干酵母（g）8.0琼脂（g）3.5苯甲酸钠（g）0.8棉油(ml)0.536％醋酸(ml)6.010％

甲醛(ml)1.0水(ml)200(2)、配制方法：

取总水量的30%，加入玉米粉等成分搅拌；另取70%水溶解琼脂，冷却至70℃后与上

述成分混合；饲料应均匀倒入培养皿（15cm），厚度为1.0-1.5cm，冷却备用。

四、实验方法与步骤：

1.喂食条件：

养虫室温度保持26――28℃，相对湿度60%――70%，12小时光照。2、饲养方法：（1）、在培养皿（16cm）放入约0.3――0.5mm厚的饲料若干块，将附有卵块的纱布放入皿内，用黑布将皿口封住，布上压玻璃板，缸下部对着光源，孵化的幼虫可很快到饲料上取食。（2）、待幼虫长到2龄后，移入装有人工饲料的培养皿（5cm）内，每皿一头，幼虫在内取

二

食，直至老熟。（3）、幼虫进入预蛹期，即转移到装有无菌细土的养虫缸内，必须保持湿润，以利入土化蛹和蛹的存活。（4）、成虫羽化后，雌雄配对，放入养虫缸内，缸内放一个内有10%蜂蜜液的培养皿，皿内放脱脂棉，以便蛾子从润湿的棉上吸取蜂蜜。养虫缸上蒙上纱布，并用橡皮筋扎好。蛾子在缸内交尾产卵，每日将产于纱布上的卵连同纱布取下，并换新纱布和蜂蜜。

五、实验预防措施：

1、注意饲养室及饲养用具的清洁、消毒。

2.注意饲养环境的控制。棉铃虫幼虫在三龄后有互相残杀的习性，应单独饲养。

3、在棉铃虫饲养过程中，应注意及时更换新鲜的饲料，以防饲料变干。配制好的饲料必须

低温保存。

六、实验结果处理：

1.每天观察并记录棉铃虫的取食和生长情况，并认真填写观察记录。

2、观察棉铃虫的蜕皮生长情况，记录各龄期的生长时间长短及试虫的平均体重。

七、思考问题：

1、标准目标昆虫的饲养在生物测定工作中有何意义？

2.棉铃虫饲养过程中应注意哪些问题？并对其饲养条件和方法提出了改进建议。

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实验2

杀虫剂初步毒力测定

1、通过本试验学习掌握杀虫剂室内毒力初筛试验的操作技术。

2.观察昆虫中毒的迹象——兴奋、击倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。阐明标准目标

昆虫代表性的现实意义。

二、实验原理：

为了初步确定某些化学品是否具有杀死某些害虫的能力，应首先进行消除试验或初步

筛选试验，也称为初步综合杀虫毒性试验。这种测试不涉及杀毒方式和杀毒能力的大小。

因此，剂量和均匀性没有严格限制。一般采用较高浓度，以充分发挥综合毒性作用（包括

胃毒、接触杀灭、熏蒸等）。

一般农药初筛毒力测定方法，根据试虫对象不同，多采用浸渍法、喷雾法、喷粉法、

饲料混药法等。每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药

时要注意各处理用药等量均匀一致，设置温度一般在20-28℃，相对湿度60-80%，通气良好。一般液剂在0.1-1%，粉剂1-10%。

三、主要仪器和试验材料：1。试验昆虫：小菜蛾（3龄）。

2、供试药剂：药剂a、药剂b。

3、检测设备：昆虫饲养室、陶工喷雾塔、量筒、镊子、吸管、烧杯、培养皿、刷子等。

四、实验方法与步骤

1.试剂配制：将试剂A、B配制成0.1%溶液备用。

2.除虫试验：

取小菜蛾3龄幼虫集中混匀后，用毛笔刷入培养皿，每处理10头，重复一次。3、喷

布质量检定

使用9cm的白色花园纸检查喷雾液滴的大小，以及喷雾布是否均匀。如果不符合要求，可调整喷嘴和位置，使喷布质量达到基本要求。4.处理方法：

采用喷雾法，选用potter喷雾塔，喷布药液前，用清水及欲喷洒的药液大量喷布。

换药前需将受药盘及雾化室底部用布充分擦净，然后大量喷布试验的药液。

在小菜蛾培养皿中加入新鲜蔬菜叶后，用移液管吸取3ml药液喷洒。大约10秒钟后，当所有药水沉淀后，取出培养皿并标记。对于空白对照，只需喷洒清水。试剂干燥后，将

试验昆虫与饲料一起放入回收室培养24小时，并检查结果。

五、

1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然

死亡率最低，昆虫的年龄相同，大小相同。最好使用人工饲养的试验昆虫。

2、环境条件的选择：温度在20-28℃，相对湿度在60%-80%，通气良好。

3.处理设计：每次处理需要检测15-30只昆虫，不能重复。每次测试都应设置空白对

照

要注意各处理用药等量均匀一致。

四

六、实验结果处理：

治疗24小时和48小时后，检查死昆虫和活昆虫的数量，计算死亡率和校正死亡率，

并比较不同药剂的毒性。试验昆虫的死亡和寿命标准一般为能正常移动或飞行或能作为活

昆虫正常移动的昆虫，其余中毒的为死昆虫。

死虫数?100%总虫数

如何应对死亡？控制死亡率调整死亡率？？100%1? 控制死亡率？

表1试验药剂浓度(或剂量)处理方法供试昆虫杀虫剂初步毒力试验记载表试虫数死虫

数处理24小时死亡率(%)校正死亡率(%)死虫数处理48小时死亡率(%)校正死亡率(%)七、

思考问题：

1、将筛选药剂的毒力试验结果记入杀虫剂初步毒力试验记载表，并写成报告。

2、杀

虫剂初步毒力测定在杀虫剂的筛选中有什么重要意义。

五