基因测序仪操作流程

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1、先开电脑再开测序仪,先关测序仪再关电脑。

2、待绿灯常亮后点击桌面的run 3130 data collection

3、样品准备:8μl Hi-Di甲酰胺LIZ混合物+0.5μl产物(1 ml甲酰胺中加入7-8μl LIZ,电子仪器状态及LIZ质量差异,加入的LIZ量有所波动,本着节约的原则,在保证实验成功的前提下尽量少加LIZ)

4、样品混匀离心,确保没有气泡

5、样品变性(94度5分钟),放于冰上冷却

6、编辑96孔板:展开ga3130,点击plate manager,选择new,编辑Name,Owner name,Operator name,application中选择GeneMapper Generic,OK,按照需要编辑sample name,选择存放位置和instrument protocol(一般为Fra-36-pop7-g5),OK。展开ga3130-3130,在run scheduler中选择plate view,点find all,找到自己编辑好的板子,选中。

7、按测序仪的tray按钮,待tray弹出后打开测序仪,放入编辑好的板子(缺口处在右下角),plate view中的板子处变成黄泽,点击板子使其变绿,此时菜单栏中的绿色小三角变亮,点击后开始运行

8、运行过程中绿灯闪烁,运行结束后绿灯常亮,此时按tray,弹出tray,取下板子,关上测序仪即可。

注意:

1、毛细管必须浸泡在buffer中,所以tray不可长时间弹出,并且盛

有Buffer和水的reservoirs中液体的页面不能过低。

2、每次安装板子后,检查4个buffer和水的reservoirs的橡胶垫是否翘起,若翘起需及时压回,橡胶垫使用次数过多导致其不能紧密贴合在reservoirs上时需更换。

3、每次运行前务必检查pop7胶的胶面,以免液面过低吸入空气产生气泡。

4、测序仪的Oven尽量不要打开,打开后需要做空间校正。

5、测序仪所链接的电脑中的参数请勿擅自改动,如电脑中的系统时间。

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