肌红蛋白测定SOP_MYO临床意义_检验科生化项目SOP
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MYO +CrO2-AbCrO2-Ab-MYO +CrO2-Ab
CrO2-Ab-MYO+ CrO2-Ab + CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+ CrO2-Ab
F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷+ F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷
CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+清洗CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+ CrO2-Ab
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司肌红蛋白（MYO）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：352~353。
编写：审核：批准：
肌红蛋白测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
片剂；7孔为底物稀释剂，缓冲液42 mg/mL，液体；8孔为稳定及，铬片剂，缓冲液，液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD质控液。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
CrO2-Ab+ F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷（转移到比色杯）
CPRG（在577nm处不吸收）CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-galCPR（在577nm处吸收）
2标本采集与处理
2.1采血方法
空腹不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
室温保存，及时送检和检测。样本在2~8℃下可存储7天，在–20℃下可保存28天。
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
直接使用，2~8℃保存。
5.2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
肌红蛋白测定
Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
2.3注意事项
推荐选用血清。在含有草酸盐的血液可能引起铬颗粒积聚，不应该使用。抗凝剂不足的冷冻血浆样品可能引起铬颗粒积聚，不应该使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1孔为结合物0.09 mg/mL，液体；3孔为抗体-CrO21.8mg/ml，片剂；4 ~ 6孔为CPRG10.3mM，
肌红蛋白测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
1检测原理
MYO方法是基于“夹心”原理的两步法酶免疫测定。样品与包被了肌红蛋白特异性单克隆抗体的二氧化铬颗粒孵育形成颗粒/MYO复合物8。颗粒被磁化分离，去除上清液。在第二步，颗粒/MYO复合物与共轭试剂（ß-半乳糖苷酶标记的肌红蛋白特异性单克隆抗体）孵育形成颗粒/ MYO /共轭物夹心。未结合的共轭物和分析物磁化分离和洗涤去除。夹心结合的ß-半乳糖苷酶与生色团底物氯酚红-ß-d吡喃半乳糖苷（CPRG），催化底物水解为氯酚红（CPR）。因为CPR形成在577 nm光吸收改变与病人样品中存在的MYO浓度成正比。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定
4.4标本检测
4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。
6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
7性能参数
本法线性范围为1~1000ng/mL,对于超过测定线性范围的结果，用样本稀释液进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
10~92ng/mL。
9临床意义
血清肌红蛋白检测时AMI早期诊断的最有用指标之一。在AMI发作后1~3h血清肌红蛋白开始升高，4
~12h达峰值，72h恢复正常。
肌红蛋白尿常见于急性心肌梗死、肌肉创伤、多发性肌炎、行军性肌红蛋白尿症、进行性肌营养不良、遗传性特发性肌红蛋白尿、海蛇咬伤等。
CrO2-Ab-MYO+ CrO2-Ab + CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+ CrO2-Ab
F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷+ F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷
CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+清洗CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-gal+ CrO2-Ab
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品（上海）有限公司肌红蛋白（MYO）测定试剂说明书。
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：352~353。
编写：审核：批准：
肌红蛋白测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
片剂；7孔为底物稀释剂，缓冲液42 mg/mL，液体；8孔为稳定及，铬片剂，缓冲液，液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存，有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD质控液。
3.3校准品
西门子校准品。
3.4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。
CrO2-Ab+ F(ab′)2-β-吡喃半乳糖苷（转移到比色杯）
CPRG（在577nm处不吸收）CrO2-Ab-MYO- F(ab′)2-β-galCPR（在577nm处吸收）
2标本采集与处理
2.1采血方法
空腹不抗凝静脉血2~3ml。
2.2标本保存
室温保存，及时送检和检测。样本在2~8℃下可存储7天，在–20℃下可保存28天。
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
直接使用，2~8℃保存。
5.2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。
5.3校准程序
主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
肌红蛋白测定
Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
2.3注意事项
推荐选用血清。在含有草酸盐的血液可能引起铬颗粒积聚，不应该使用。抗凝剂不足的冷冻血浆样品可能引起铬颗粒积聚，不应该使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1孔为结合物0.09 mg/mL，液体；3孔为抗体-CrO21.8mg/ml，片剂；4 ~ 6孔为CPRG10.3mM，
肌红蛋白测定
文件编号：
版本号：
页码：第页共页
1检测原理
MYO方法是基于“夹心”原理的两步法酶免疫测定。样品与包被了肌红蛋白特异性单克隆抗体的二氧化铬颗粒孵育形成颗粒/MYO复合物8。颗粒被磁化分离，去除上清液。在第二步，颗粒/MYO复合物与共轭试剂（ß-半乳糖苷酶标记的肌红蛋白特异性单克隆抗体）孵育形成颗粒/ MYO /共轭物夹心。未结合的共轭物和分析物磁化分离和洗涤去除。夹心结合的ß-半乳糖苷酶与生色团底物氯酚红-ß-d吡喃半乳糖苷（CPRG），催化底物水解为氯酚红（CPR）。因为CPR形成在577 nm光吸收改变与病人样品中存在的MYO浓度成正比。
4操作程序
4.1检测过程流程
签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。
4.2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
4.3标本处理
以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定
4.4标本检测
4.4.1手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。
6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
7性能参数
本法线性范围为1~1000ng/mL,对于超过测定线性范围的结果，用样本稀释液进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
10~92ng/mL。
9临床意义
血清肌红蛋白检测时AMI早期诊断的最有用指标之一。在AMI发作后1~3h血清肌红蛋白开始升高，4
~12h达峰值，72h恢复正常。
肌红蛋白尿常见于急性心肌梗死、肌肉创伤、多发性肌炎、行军性肌红蛋白尿症、进行性肌营养不良、遗传性特发性肌红蛋白尿、海蛇咬伤等。