植物提取物中多糖含量测定方法(UV)

编号:TCD0155 植物提取物中多糖含量测定方法
一、仪器与试剂
1.仪器：UV2101 PC紫外-可见光分光光度计
2.试剂：5%苯酚溶液、浓硫酸、80%乙醇溶液
二、样品测定
1. 对照品溶液制备精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖约50mg，置50mL容量瓶中，加水溶解定容。

2．标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0m L分别置于50mL容量瓶中，加水定容，即为对照品供试液。

另各取对照品供试液1.0mL 于25mL具塞刻度试管中，分别加5%苯酚溶液1.0mL，摇匀，加入浓硫酸5.0mL(加入浓硫酸时,勿沿壁加入。

应将移液管悬于试管口使浓硫酸垂直冲入液面)，立即摇匀。

于沸水浴中加热10min，取出后置冰水浴中冷却并放置至室温。

以试剂空白做参比在485nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。

3. 样品溶液的制备精密称取多糖样品约300mg,置100mL容量瓶中，加80%乙醇溶液80mL，超声振荡60min,放置至室温，过滤，残渣用80%乙醇溶液洗涤2～3次后,用少量沸水将残渣洗入原100mL容量瓶中, 加入沸水共约80mL, 超声振荡60min溶解, 放置至室温定容。

摇匀过滤，取续滤液2.0mL置50mL容量瓶中（对于含量低于30%，高于60%的样品，应适当改变移取续滤液的体积），加水定容，即为供试样品溶液。

按标准曲线制备项下操作，由标准曲线求得供试样品溶液浓度。

三、结果计算
C
i
×100 ×50
X% = × 100
W
i ×V
i
C
i
：由标准曲线求得供试样品溶液的浓度（mg/mL）
W i：样品称样量（mg）V i：移取样品续滤液的体积（mL）
注：a.在显色反应操作中，空白、对照、样品的操作应保持一致。

b.80%乙醇溶液的配制；用干燥、洁净的量筒分别量取100ml蒸馏水，400ml 无水乙醇，混合均匀。

c. 试验过程的超声处理时间必须严格控制。