超氧化物歧化酶生产方法

紫草种籽超氧化物歧化酶提取方法：属于生物工程领域，涉及一种紫草种籽ＳＯＤ及其用提取紫草种籽油后的残渣为原料，用生物工程装置提取紫草种籽ＳＯＤ的方法，迄今为止紫草种籽是植物中ＳＯＤ含量最高、质量最好、最有提取价值的唯一原料，含量为２０万Ｕ／公斤种籽，是用任何动物血提取的ＳＯＤ所不能比拟的，创下了国内外唯一的用植物提取ＳＯＤ的记录，不仅填补了国内外空白，在科学研究上也是一个重大突破，它将在人类的延年益寿、防衰抗皱、抗紫外线辐射、清除人体内氧自由基保证身体健康上做出巨大的贡献。

超氧化物歧化酶耐高温、不失活的制备方法：该方法是在提取的固体粉末状超氧化物歧化酶中加入２—８％固体状保护剂，该方法是将它们按上述比例混匀后再进行冻干处理。该技术保证了添加超氧化物歧化酶的产品，如化妆品、口服液、啤酒、牛奶等等中的超氧化物歧化酶酶活力的稳定性，并扩充了产品开发和应用范围，相对保证了含超氧化物歧化酶的产品在高温工艺中及常温储存下不易变质。

从鸡雏胴体中提取超氧化物歧化酶的方法：取雏鸡胴体将其绞碎、浸泡、过滤、离心，将上清液在一定时间和温度控制下，加入丙酮提取超氧化物歧化酶，本发明用鸡场孵化鸡雏淘汰的蛋用公雏鸡胴体为原料，变废为宝产生高附加值，雏鸡与人无共患病，避免造成如牛、羊、猪血来源的污染，其工艺简单、产率高、活性好、利润高，并可提取一系列副产物，如表皮生长因子、精细蛋白、氨基酸等，为大批量生产超氧化物歧化酶开辟了广阔的前景。

重组人源锰超氧化物歧化酶的制备工艺：属于生物工程技术领域，其特点是先进行工程菌扩增，收集菌体，然后将菌体裂解，加热处理后离心取可溶部分，经离子交换柱层析纯化。本发明具有工艺流程简便、ＳＯＤ半衰期长、质量稳定、单位成本低等特点，产品不仅可用于化妆品、保健品等民用领域，更适用于医疗领域。

重组人源铜锌超氧化物歧化酶的制备工艺：其特点是先进行工程菌发酵，发酵后收集菌体，然后将菌体裂解，分离包含体，采用巯基乙醇尿素变性剂进行抽提，经加热处理后用硫酸铜复性，并经ＤＥ－５２离子交换层析纯化。本发明具有工艺流程简便、ＳＯＤ产量高、单位成本低等特点，产品适用于医疗领域。

从植物材料中提取超氧物歧化酶的方法：包括：ａ．称取植物材料，加入Ｋ#-[２]ＨＰＯ#-[４]溶液，捣碎匀浆，并压榨过滤；ｂ．滤液中加入乙醇∶氯仿混合溶液，搅拌均匀，离心２０分钟；ｃ．取上清液加入Ｋ#-[２]ＨＰＯ#-[４]，搅匀，再加入丙酮，离心２０分钟；ｄ．取上清液，加入丙酮，离心２０分钟；ｅ．弃上清液，沉淀溶于磷酸缓冲液（ｐＨ７．５）中，并透析；ｆ．透析液进行胶过滤，收集活性部分。该方法流程简单明了，生产出的产品具有高比活、高纯度、高稳定性。

用植物提取超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的方法：其技术方案是将植物的根、茎、叶、种子、果实任选其一，经消毒后，净水浸泡，粉碎成浆体，再用０．５—１０倍的保护液提取，然后过滤、除渣，得ＳＯＤ粗品，将ＳＯＤ粗品进行精制得营养原液，将粗品与酒液调配得保健液。本发明的优点是：从植物的根茎叶及种子、果实中提取ＳＯＤ，原料广泛，工艺简单，生产成本低，产品质量安全可靠，适合大批量生产，扩大了使用范围。

从玉米籽粒制取超氧化物歧化酶的方法：属于生物化学领域中酶的制取方法，涉及从玉米中制取超氧化物歧化酶的方法。其特征是工艺方法为：浸泡玉米；粉碎；上清液超滤浓缩；浓

缩液反复浓缩；浓缩液离心除去沉淀物得上清液；上清液超滤脱盐得超氧化物歧化酶。本发明工艺简单，生产周期短，适合于工业化生产，可向医药、食品、日用化妆品等行业提供价格低廉、安全可靠的超氧化物歧化酶产品。

由植物沙棘提取分离超氧物歧化酶（ＳＯＤ）的工艺方法：是采用多级离心分离，超滤膜浓缩及凝胶过滤法进行。在该工艺中有机处理溶剂为氯仿－乙醇混合溶剂，加入铵盐使ＳＯＤ从原液中分离。同时为提高收率采用先进超滤膜分离技术进行浓缩并采用凝胶过滤进行精制。该工艺提取率高，设备投资少，有机溶剂使用量少。此外该技术也适于从其它天然植物中提取分离ＳＯＤ，不但为ＳＯＤ制备开辟新途径，也为高效综合利用天然植物ＳＯＤ提供一种实用可行技术。

大豆超氧化物歧化酶生产方法：是以大豆（豆类）为原料生产大豆超氧化物歧化酶（大豆ＳＯＤ），其生产方法是将大豆依次经过：制作膨胀大豆、制取豆浆、调值处理、离心处理得上清液、加热过滤、超滤浓缩、干燥等工序。该方法有原料廉价充足、方法简便、成本较低、适于工厂化大量生产的特点。

从海藻中提取铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)的方法：由于该方法是从天然材料中提取铁超氧化物歧化酶，海藻原料充足，不存在紧缺现象，同时材料成本相对于提取产品来说也是十分低廉。得到的产品比活相当高，活力损失相对较小，可以满足一般的医药需求，并且符合当代人“崇尚自然，回归自然”的心理需求，不存在转基因生产导致的基因污染问题。工艺中采用了DEAE-Sepharose Fast Flow和CM-Sepharose Fast Flow两种层析材料，其特点是流速快、可大量分离样品，同时可反复再生利用，能实现大规模工业化生产。

从紫草种子中提取超氧化物歧化酶的方法：依次包括如下步骤：将紫草种子废渣、水、氯化铜、氯化锌、氯化钙按比例混合并浸泡24～32小时；提取上清液；热变上清液；用大超滤器过滤上清液得滤液1；在滤液1中加入酶保活剂后用小超滤器过滤；用赛氏过滤器加压过滤，冻干过滤液。其关键是在提取步骤中，加入了触酶活剂及保酶活剂，并且选择了合适的上清液热变温度，使其提取物——超氧化物歧化酶活性高，酶活性为3750单位/毫克，酶比活性1950 单位/毫克蛋白。

基因重组人源铜锌超氧化物歧化酶的制备工艺：其特征是首先进行工程菌发酵扩增，热激诱导，收集菌体。经缓冲液抽提、再经离子交换、分子筛柱层析分离纯化。本发明具有工艺流程简单、SOD半衰期长、产量高、单位成本低等优点，本产品可广泛应用在化妆品、保健食品、医疗等领域。

大规模生产超氧化物歧化酶的新工艺：采用冻结的动物血液凝块，磨浆融冻使红血球破裂溶血，在铜盐保护下加热除去变性血红蛋白，粗提液经膜分离除盐和小分子杂蛋白。二次加热除去大部分杂蛋白，冻干，得SOD。比活≥4,000u/mg pro.。

从螺旋藻中提取含铁氧化物歧化酶的方法：藻体经超声波破碎、硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ—２３柱层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—７５凝胶过滤提取含铁超氧化物歧化酶，具有工艺简便，Ｆｅ—ＤＯＳ纯化到均一程度，并具有较高的比活。Ｆｅ—ＳＯＤ应用于医药、化妆品、保健品和食品等许多领域。