一株海洋放线菌胞外多糖的初步研究
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７ ４。 ．
海洋 环境 营养 成 分 的稀 缺性 ， 使 许 多海 洋 微 生 迫
物与 富含 营养 成分 的海 洋 动植 物 共 生 ， 些 以前 被 认 某
为是 海洋 动植 物产 生 的生 物活 性物 质实 际上 是 由共生 的微 生物 所产 生 的生 存 必 需 的 营养 物 质 ， 与海 洋 动植
海 洋环 境 的特殊 性—— 高 压 、 高盐 、 温 、 氧 ， 低 缺 使 得海 洋微 生 物产 生大 量结 构新 颖并 具有 良好 生物 活性 的 天然产 物 ［ 。海 洋微 生物 多糖 是海 洋 细菌 、 １ ］ 真菌 、 蓝
采用 Ｄ Ｐ 清 除法对多 糖体 外 自由基 清 除活性 进 行 了 ＰＨ
０ ５ 硝酸 钾 １ 七 水 硫 酸 镁 ０ ５ 七 水 硫 酸 亚 铁 ０ ０ ， ．， ， ．， ． １
三 水 磷 酸 氢 二 钾 ０ ５ 琼 脂 １ ， Ｈ 值 ７ ２ ７ ４ ．， ８ｐ ．～ ． 。
研 究 开发 的重 要 内容 。
发酵 培养 基 ／ 体 种 子 培养 基 （ 液 ｇ・Ｌ ） 可 溶 性 ： 淀粉 ２ ， ０ 氯化 钠 ０ ５ 硝 酸 钾 １ 七 水 硫酸 镁 ０ ５ 七 水 ．， ， ．， 硫酸 亚 铁 ０ ０ ， 水 磷 酸 氢 二 钾 ０ ５ ｐ 值 ７ ２ ．１ 三 ．，Ｈ ． ～
物共生存 的微生 物 提高 了 宿主 在海 洋 中 的环境 适 应性
１ １ ２ 主要试 剂 与仪 器 ．．
葡萄 糖 ， 析 纯 ； Ｐ Ｈ， 分 ＤＰ 日本 Ｗａ ｏ化 学 试 剂 公 ｋ
司 ； 蒸苯 酚 ， 重 北京 鼎 国 昌盛 生物 技 术 有 限 责 任 公 司 ； 维生 素 Ｃ， 上海 润 洁化学 试 剂有 限公 司 。 ＤＬ ６ 型低 速 冷冻 离 心机 ， 一Ｍ 湖南 凯 达科 学 仪器 有 限公 司 ； Ｐ － ５ Ｃ型恒 温恒 湿 培 养 箱 ， 海 博 迅 实 业 Ｓ Ｘ ２０ 上
免疫 调 节 、 肿 瘤 、 氧 化 、 心 血 管 疾 病 等 ］ 抗 抗 抗 。海
１ 实 验
１ １ 材 料 、 剂 与 仪 器 ． 试
１ １ １ 菌株及 培 养基 ．． 放线 菌 Ｚ Ｇ ： Ｊ 从广 东湛 江徐 闻珊 瑚礁 自然 保护 区 石珊 瑚 Ｄｉ ｌｒａｓ ｉｏａ活体 内分离 得 到 ， 属待 定 ， ｐｏｉ ｔ ｇ ｓ ｒ 种 自行 保藏 。
洋微 生物 多糖 具有 安 全 、 毒 、 源 丰富 、 低 来 生产 周期 短 、
不 受 季 节 控 制 的特 点 ， 用 发 酵 法 可 实 现 工 业 化 生 利
产 ［ ， 洋 微 生 物 多 糖 已 成 为 海 洋 药 物 及 功 能 性 食 品 ８ 海 ］
固体 培 养 基 （ ｇ・Ｌ ） 可 溶 性 淀 粉 ２ ， 化 钠 叫 ： ０氯
白、 乙醇 分 级 沉 淀 分 离 的 方 法提 取 纯化 多糖 ， 用苯 酚 一硫 酸 法 测 定 多糖 含 量 ， 以 Ｖｃ 对 照 ， 用 Ｄ Ｐ 清 除 法研 究 采 并 为 采 Ｐ Ｈ
多糖 对 自 由基 的 清 除 作 用 。结 果 表 明 ， 线 茵 Ｚ Ｇ 多糖 总提 取 率 为 １． Ｏ ， 放 Ｊ１ ２ ７ 乙醇 分 级 沉 淀 下 的 多糖 １２ ３的 含 量 分 别 、、
亿 学 与 耋 物 Ｚ 程 ２１， １８ ｏ９ ０１ ｏ２ Ｎ． Ｖ ．
Ｃｈ ｍｉｔｙ ＆ Ｂｉｅ ｇｉ ｅｒ ｇ ｅ ｓｒ ｏｎ ｎ ｅ ｉ ｎ
ｄ ｉ１ ． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ７ — ５ ２ ． ０ １ ０ ． １ ｏ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ６ ２ ４ ５ ２ １ ． ９ ０ ０ ｓ
研究 ， 为该 菌多糖 的进一步研究 提供实验基 础 。
藻 等在代 谢 过程 中产 生 的对 微 生物 有保 护作 用 的生物
高 聚物［ ， ２ 这些 多糖 或 聚集 于微 生物体 内 ， ］ 或分 泌 于微 生物 胞壁 中 ， 或分 泌于 细胞 外介 质 中 ， 两者 统称 为胞 后 外 多糖［ ， ３ 它们 在参 与海 洋微 生 物结构 、 ］ 固水及 防御 外 来 侵 略作 用 ［ ］ 同时 ， 具 有 多种 体 外 生 物 活 性 ， ４ 的 还 如
为 ７． ６ 、１ Ｏ 、１ ６ ， Ｐ Ｈ 清 除 法 测 试 多糖 １具 有 弱 的 抗 氧 化 活性 。 １ ２ ９． ３ ８ ． ６ Ｄ Ｐ
关键 词 ： 外 多糖 ； 线 菌 ； 酚 一硫 酸 法 ； Ｐ Ｈ 胞 放 苯 Ｄ Ｐ 中 图 分 类 号 ： ３ Ｑ ９６ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ２ ４ ５ ２ １ ） ９ ０ ９ ０ １ ７ —５ ２ （ ０ １ ０ —０ ３ — ４
一
株 海 洋放 线 菌胞 外 多糖 的初 步 研 究
蔡 隽妮 。 韦放 球 ， 张德 志 ， 温 露。 闵 颖。 陈 钢 （ 东 药学院 药科 学 院 ， 东 广 州 ５ ０ ０ ） 广ｌｒａｓ ｉ ｏａ 中一 株 共 生放 线 茵 Ｚ Ｇ 进 行 发 酵 ， 用 热 水 提 取 、 醇 沉 淀 、 ｅ ａ 对 ｐ ｏ ｉ ｒｇ ｓ ｔ Ｊ 采 乙 Ｓ ｖ ｇ法 脱 蛋
和生存能 力 ， 可产 生 抑制 宿 主竞 争对 手 的 次生 物 质 ， 这 类 菌产生抗 生物 质 的可 能性 远 高于 非 附生海 洋 微 生物 和陆地微 生物［ 。初 步研 究发 现 ， 海石 珊瑚 Ｄｉｌｒ ９ ］ 南 ｐｏｉ ａ ｓ ｉｏａ中一株 共 生放 线 菌 Ｚ Ｇ 发 酵液 对 Ｄ Ｐ 自由 ｔｇ ｓ ｒ Ｊ ＰＨ 基具 有较好 的清 除能力 ， ５ 为 ０ ２ Ｉ。 Ｃ 值 ．４ｍｇ・ ＿ 。作 ｍＬ 。 者通 过批量发 酵放线 菌 Ｇ ， 备菌 丝体 胞外 多糖 ， 制 并
海洋 环境 营养 成 分 的稀 缺性 ， 使 许 多海 洋 微 生 迫
物与 富含 营养 成分 的海 洋 动植 物 共 生 ， 些 以前 被 认 某
为是 海洋 动植 物产 生 的生 物活 性物 质实 际上 是 由共生 的微 生物 所产 生 的生 存 必 需 的 营养 物 质 ， 与海 洋 动植
海 洋环 境 的特殊 性—— 高 压 、 高盐 、 温 、 氧 ， 低 缺 使 得海 洋微 生 物产 生大 量结 构新 颖并 具有 良好 生物 活性 的 天然产 物 ［ 。海 洋微 生物 多糖 是海 洋 细菌 、 １ ］ 真菌 、 蓝
采用 Ｄ Ｐ 清 除法对多 糖体 外 自由基 清 除活性 进 行 了 ＰＨ
０ ５ 硝酸 钾 １ 七 水 硫 酸 镁 ０ ５ 七 水 硫 酸 亚 铁 ０ ０ ， ．， ， ．， ． １
三 水 磷 酸 氢 二 钾 ０ ５ 琼 脂 １ ， Ｈ 值 ７ ２ ７ ４ ．， ８ｐ ．～ ． 。
研 究 开发 的重 要 内容 。
发酵 培养 基 ／ 体 种 子 培养 基 （ 液 ｇ・Ｌ ） 可 溶 性 ： 淀粉 ２ ， ０ 氯化 钠 ０ ５ 硝 酸 钾 １ 七 水 硫酸 镁 ０ ５ 七 水 ．， ， ．， 硫酸 亚 铁 ０ ０ ， 水 磷 酸 氢 二 钾 ０ ５ ｐ 值 ７ ２ ．１ 三 ．，Ｈ ． ～
物共生存 的微生 物 提高 了 宿主 在海 洋 中 的环境 适 应性
１ １ ２ 主要试 剂 与仪 器 ．．
葡萄 糖 ， 析 纯 ； Ｐ Ｈ， 分 ＤＰ 日本 Ｗａ ｏ化 学 试 剂 公 ｋ
司 ； 蒸苯 酚 ， 重 北京 鼎 国 昌盛 生物 技 术 有 限 责 任 公 司 ； 维生 素 Ｃ， 上海 润 洁化学 试 剂有 限公 司 。 ＤＬ ６ 型低 速 冷冻 离 心机 ， 一Ｍ 湖南 凯 达科 学 仪器 有 限公 司 ； Ｐ － ５ Ｃ型恒 温恒 湿 培 养 箱 ， 海 博 迅 实 业 Ｓ Ｘ ２０ 上
免疫 调 节 、 肿 瘤 、 氧 化 、 心 血 管 疾 病 等 ］ 抗 抗 抗 。海
１ 实 验
１ １ 材 料 、 剂 与 仪 器 ． 试
１ １ １ 菌株及 培 养基 ．． 放线 菌 Ｚ Ｇ ： Ｊ 从广 东湛 江徐 闻珊 瑚礁 自然 保护 区 石珊 瑚 Ｄｉ ｌｒａｓ ｉｏａ活体 内分离 得 到 ， 属待 定 ， ｐｏｉ ｔ ｇ ｓ ｒ 种 自行 保藏 。
洋微 生物 多糖 具有 安 全 、 毒 、 源 丰富 、 低 来 生产 周期 短 、
不 受 季 节 控 制 的特 点 ， 用 发 酵 法 可 实 现 工 业 化 生 利
产 ［ ， 洋 微 生 物 多 糖 已 成 为 海 洋 药 物 及 功 能 性 食 品 ８ 海 ］
固体 培 养 基 （ ｇ・Ｌ ） 可 溶 性 淀 粉 ２ ， 化 钠 叫 ： ０氯
白、 乙醇 分 级 沉 淀 分 离 的 方 法提 取 纯化 多糖 ， 用苯 酚 一硫 酸 法 测 定 多糖 含 量 ， 以 Ｖｃ 对 照 ， 用 Ｄ Ｐ 清 除 法研 究 采 并 为 采 Ｐ Ｈ
多糖 对 自 由基 的 清 除 作 用 。结 果 表 明 ， 线 茵 Ｚ Ｇ 多糖 总提 取 率 为 １． Ｏ ， 放 Ｊ１ ２ ７ 乙醇 分 级 沉 淀 下 的 多糖 １２ ３的 含 量 分 别 、、
亿 学 与 耋 物 Ｚ 程 ２１， １８ ｏ９ ０１ ｏ２ Ｎ． Ｖ ．
Ｃｈ ｍｉｔｙ ＆ Ｂｉｅ ｇｉ ｅｒ ｇ ｅ ｓｒ ｏｎ ｎ ｅ ｉ ｎ
ｄ ｉ１ ． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ７ — ５ ２ ． ０ １ ０ ． １ ｏ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ６ ２ ４ ５ ２ １ ． ９ ０ ０ ｓ
研究 ， 为该 菌多糖 的进一步研究 提供实验基 础 。
藻 等在代 谢 过程 中产 生 的对 微 生物 有保 护作 用 的生物
高 聚物［ ， ２ 这些 多糖 或 聚集 于微 生物体 内 ， ］ 或分 泌 于微 生物 胞壁 中 ， 或分 泌于 细胞 外介 质 中 ， 两者 统称 为胞 后 外 多糖［ ， ３ 它们 在参 与海 洋微 生 物结构 、 ］ 固水及 防御 外 来 侵 略作 用 ［ ］ 同时 ， 具 有 多种 体 外 生 物 活 性 ， ４ 的 还 如
为 ７． ６ 、１ Ｏ 、１ ６ ， Ｐ Ｈ 清 除 法 测 试 多糖 １具 有 弱 的 抗 氧 化 活性 。 １ ２ ９． ３ ８ ． ６ Ｄ Ｐ
关键 词 ： 外 多糖 ； 线 菌 ； 酚 一硫 酸 法 ； Ｐ Ｈ 胞 放 苯 Ｄ Ｐ 中 图 分 类 号 ： ３ Ｑ ９６ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ２ ４ ５ ２ １ ） ９ ０ ９ ０ １ ７ —５ ２ （ ０ １ ０ —０ ３ — ４
一
株 海 洋放 线 菌胞 外 多糖 的初 步 研 究
蔡 隽妮 。 韦放 球 ， 张德 志 ， 温 露。 闵 颖。 陈 钢 （ 东 药学院 药科 学 院 ， 东 广 州 ５ ０ ０ ） 广ｌｒａｓ ｉ ｏａ 中一 株 共 生放 线 茵 Ｚ Ｇ 进 行 发 酵 ， 用 热 水 提 取 、 醇 沉 淀 、 ｅ ａ 对 ｐ ｏ ｉ ｒｇ ｓ ｔ Ｊ 采 乙 Ｓ ｖ ｇ法 脱 蛋
和生存能 力 ， 可产 生 抑制 宿 主竞 争对 手 的 次生 物 质 ， 这 类 菌产生抗 生物 质 的可 能性 远 高于 非 附生海 洋 微 生物 和陆地微 生物［ 。初 步研 究发 现 ， 海石 珊瑚 Ｄｉｌｒ ９ ］ 南 ｐｏｉ ａ ｓ ｉｏａ中一株 共 生放 线 菌 Ｚ Ｇ 发 酵液 对 Ｄ Ｐ 自由 ｔｇ ｓ ｒ Ｊ ＰＨ 基具 有较好 的清 除能力 ， ５ 为 ０ ２ Ｉ。 Ｃ 值 ．４ｍｇ・ ＿ 。作 ｍＬ 。 者通 过批量发 酵放线 菌 Ｇ ， 备菌 丝体 胞外 多糖 ， 制 并