2019秋生物人教版选修1习题:专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离(含解析)

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专题5 DNA和蛋白质技术

课题3 血红蛋白的提取和分离

1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是( )

①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠

A.②④B.①④

C.④⑤D.①③

解析:0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。

答案:A

2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其相关的是( )

A.凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填

C.洗脱过程D.样品的处理

解析:在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存有气泡,打乱了洗脱次序所致。

答案:B

3.下列相关“血红蛋白提取和分离”实验的准确叙述是( )

A.用蒸馏水实行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面的杂蛋白

B.将血红蛋白溶液实行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质

C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂

D.整个过程持续用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构

解析:对红细胞洗涤时应该用生理盐水,不能用蒸馏水,A错误;将血红蛋白溶液实行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质,B错误;血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解磷脂,加速血红蛋白的释放,C错误;整个过程持续用磷酸缓冲液处理,是为了维持pH相对稳定,防止和血红蛋白的结构发生改变,D准确。

答案:D

4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,相关说法中,不准确的是( )

A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果

B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果

C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度

D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大

解析:一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,所以应选择直径不超过2 cm的色谱柱。凝胶色谱柱的高度与分离度相关,一般不超过1 m。

答案:B

5.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:

(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。

(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是________;乙装置中,C溶液的作用是________。

(3)甲装置用于________,目的是__________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫________,是根据______________分离蛋白质的有效方法。

(4)用乙装置分离血红蛋白时,待__________________时,用试管收集流出液,每5 mL 收集一管,连续收集。

解析:(1)血红蛋白能携带氧气,体现了蛋白质具有运输功能。(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是磷酸缓冲液;乙装置中,C溶液的作用是洗脱血红蛋白。(3)甲装置用于透析(粗分离),目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。(4)待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。

答案:(1)运输(2)磷酸缓冲液洗脱血红蛋白(3)透析(粗分离) 去除样品中分子量较小的杂质凝胶色谱法相对分子质量的大小(4)红色的蛋白质接近色谱柱底端

1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为下图中( )

解析:凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。

答案:B

2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( ) A.电荷的多少B.分子的大小

C.肽链的多少D.分子形状的差异

解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

答案:B

3.在血红蛋白的整个提取过程中,持续用磷酸缓冲液处理的目的是( )

A.防止血红蛋白被氧气氧化

B.血红蛋白是一种碱性物质,需磷酸中和

C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程

D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和性质

解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和性质。

答案:D

4.下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤,其中准确的是( )

A.蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步

B.蛋白质的提取和分离实验能够以猪、牛、鸡、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白

C.对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D.对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

解析:蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步,A错误;蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白,一般不要鸡、蛙等动物血液为材料分离血红蛋白,B错误;样品处理的一般步骤分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白、透析等,C错误;对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,D准确。

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