肺炎链球菌检验

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1.形态结构
G+，呈矛尖状，成双排列，标 本或液体培养中成链状。
有荚膜，无鞭毛，不形成芽胞。
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2.培养特性
营养要求较高，含血液或血清的培养 基中生长。
兼性厌氧，C02 5-10%生长最好。 溶血性——菌落周围有草绿色溶血环。 液体培养基中培养24h，呈均匀混浊，
致病性球菌
葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
链球菌属 链球菌
肺炎链球菌
奈瑟菌属 脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
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肺炎链球菌 (S.pneumoniae)
属链球菌科，链球菌属。 广泛分布于自然界，主要寄生于人 类上呼吸道，多数不致病。
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一、生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4．抗原结构 5．抵抗力特点 6. 变异性
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1．形态结构
G-，球形或肾形，成对排列 有荚膜，无芽胞和鞭毛
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②分离培养鉴定 过氧化酶试验：阳性 触酶试验：阴性 血清凝集试验：阳性
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二、淋球菌
即淋病奈瑟菌， 为淋病的病原体，人是唯 一天然宿主和传染源
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（一）、生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3. 生化反应 4．抵抗力特点
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一、脑膜炎球菌
即脑膜炎奈瑟菌， 是流行性脑脊髓膜炎的病原体
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（一）、生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点
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1．形态结构
G-，肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞
内 无芽胞、无鞭毛，具有荚膜、菌毛。
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4．抗原结构
荚膜多糖抗原：多糖抗原，型特异性，共85型，
Ⅰ~Ⅲ型引起大叶性肺炎。 菌体种属特异性抗原：多糖抗原，存在于细胞
壁，称C多糖。在钙离子存在时,C多糖可与正常 人血清中称为C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)
的β球蛋白结合，发生沉淀。
与草绿色链球菌鉴别
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3. 小鼠毒力试验 有毒力的菌株，接种后12-36h， 死亡。
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第四节
奈瑟菌属 （neisseria）
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为一群G-双球菌，严格寄生菌， 人是自然宿主
主要致病菌是脑膜炎球菌 ( merningococcus) 和 淋 病 球 菌 (gonorrhoeae)
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5．抵抗力特点
较弱，加热56℃ ，20min即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗 力较强。
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6. 变异性
荚膜变异：有荚的光滑（S）型菌 有毒力，失去荚膜的粗糙（R）型 毒力减低或消失。
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20、把小鼠随机分成两组，进行肺炎球菌荚膜 形成试验，分别将两株细菌接种于不同组动物 腹腔（每组接种一株细菌）。12小时后杀死小 鼠解剖，取腹腔作荚膜染色试验。结果有一组 只有少量细菌，且未见荚膜主要原因是什么？
A、 动物对细菌不敏感
B、 染色试剂不合
标准 C、 细菌毒力发生了变异
D、 采标本时间过早
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二、致病性
1．致病物质 2．所致疾病
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1. 致病物质
荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是 荚膜的抗吞噬作用。
溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶 解人和动物的红细胞，高浓度对动 物有坏死及致死作用。
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3. 免疫性：病原可产生群特异性
抗体，但不持久。
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(三) 微生物学检验
1．标本采集 菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状，抽取脑脊液
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2．检验方法
①直接涂片检查 脑脊液或瘀斑渗出液，干燥固定后 革兰染色，若发现G-双球菌，呈肾形 成对，可初报
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2．培养特性
营养要求高，必须在含有血清或多种氨 基酸、无机盐的培养基上生长良好。
血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润 光滑露滴样菌落。
易自溶。
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巧克力平板，蓝灰色，半透明，光滑 湿润的菌落。
卵黄双抗（EPV）平板：为无色，光 滑湿润的菌落。
血清肉汤：呈微混浊。
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3.生化反应
分解葡萄糖、麦芽糖 硝酸盐还原反应阴性，不分解尿素 氧化酶试验阳性
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4.抗原结构
可分9个血清群，对人致病的主 要试A群
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5．抵抗力特点
对寒冷、光、热力，干燥等十分敏感。 室温3h，60 ℃ 5min死亡。
采集标本：注意保温迅速送检。 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。
后期因产生自溶而变得澄清
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3．生化反应
可分解多种糖类，产酸不产气。 胆汁溶解试验阳性：加入胆汁或10%
去氧胆酸钠，37℃.，5-10min，激活 本菌的自溶酶，出现溶菌现象。
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Optochin敏感试验阳性：单个菌落涂于血 平板上，用optochin纸片贴于接种区中央， 35℃需氧培养过夜，抑菌圈 >18mm。
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12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送， 哪一种是错误的？
A、 低温 B、 保温 C、 防干燥 D、 快速
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（二）、致病性与免疫性
1．致病物质 2．所致疾病 3. 免疫性
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1. 致病物质：内毒素、荚膜，菌毛 2. 所致疾病：寄生在正常人鼻咽部， 存在易患人群，与患者补体介导的杀 菌活性缺陷有关。约2%-3%的人表现 为流脑症状
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2. 所致疾病
存在于正常人上呼吸道。 仅在人体抵抗力下降时才引起疾
病。如大叶性肺炎，支气管炎等。
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三、微生物学检验
(一) 标本采集 痰、脓液、血液等。
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(二) 检验方法及鉴定
1. 直接涂片 革兰氏色染色，荚膜染色
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2. 分离培养。 ① 胆汁溶菌试验。 ② 菊糖发酵。 ③ Optochin试验。