不同剂型清开灵中黄芩苷含量测定方法的改进

不同剂型清开灵中黄苓苷含量测定方法
的改进
（作者： _________ 单位： ___________ 邮编：___________ ）
作者：赵兰芬，符滇海，冯进仪
【摘要】目的改进不同剂型清开灵中黄苓苷的含量测定方法。

方
法采用高效液相色谱法，色谱柱为Agile nt TC [C18柱（150 mm 乂4.6 mm，5呵）;流动相为水[甲醇]冰醋酸（体积比55 45 ：）;检测波长为274 nm ;流速为1 mL min-1。

结果黄苓苷的质量浓度在
0.01057〜0.2114 mg mL-1范围内与峰面积线性关系良好，r=0 .999
9;精密度、重复性、稳定性及加样回收率结果均能满足分析要求。

结论本法可行、准确，可为不同剂型清开灵药品的标准修订提供依据。

【关键词】清开灵；黄苓苷；高效液相色谱法；含量测定
Abstract:Objective To improve the determ in atio n method for
the content of the baicalin in differe nt preparati ons of Qin gkail ing . Methods Baicalin was an alyzed on an Agile nt TC ]C18 colum (150
mm >4.6 mm，5 耐.The mobile phase consisted of water ］metha no I
［acetic acid (55 ：5：1). The flow rate was 1.0 ml min-1 and the detection wavelength was at 274 nm . Results Baicalin had a good linearity in the range of 0.01057-0.2114 mg mL-1 (r=0 . 999 9) with satisfied precision, repeatability, stability and recovery . Conclusion This method was practicable and accurate, and it provided the basis for revisi on of the sta ndards
Key words:baicali n;HPLC;co ntent determ in ati on
清开灵组方源于中医治疗急性热病传统处方“温病三宝”中的安宫牛黄丸，由胆酸、猪去氧胆酸、黄芩苷、珍珠母、梔子、水牛角、板蓝根、金银花组成，迄今为止已形成系列产品［1］。

其具有清热解毒、镇静安神的作用，用于外感风热时毒，火毒内盛所致高热不退，烦躁不安，咽喉肿痛，舌质红绛、苔黄、脉数者；上呼吸道感染，病毒性感冒，急性扁桃体炎，急性咽炎，急性气管炎，高热等症属上述证候者［2］黄芩苷是清开灵中含量最高的主要有效成份，故对其进
行定量分析，是控制该制剂质量的关键［3 ］。

本实验参考清开灵注射液、口服液中黄芩苷含量测定项下的样品处理方法［4］，改进清开灵颗粒、清开灵片和清开灵胶囊的样品处理方法，为清开灵系列药品中
黄芩苷含量测定方法的统一和简化提供可靠的依据。

1仪器与试药
岛津LC2010A/C型高效液相色谱仪LCsolution色谱工作
站,METTLER TOLEDO 十万分之一电子天平，TU〕1901双光束紫外可见分光光度计；甲醇为色谱纯，实验用水为超纯水，冰醋酸、乙醇为分析纯；黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110715 [200815，含量：95.2%,供含量测定用）；清开灵颗粒、清开灵片和清开灵胶囊均为市售。

2方法与结果
2. 1色谱条件]2, 5, 6]色谱柱
Agile nt TC[C18 柱（150 mm >4.6 mm , 5 町i）;流动相：水一甲醇一冰醋酸（体积比55 ：5 ：）;检测波长：274 nm ;流速：1 mL mi n-1 ; 进样量：10山。

理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 2 500。

广东药学院学报第25卷第5期赵兰芬，等.不同剂型清开灵中黄芩苷含量测定方法的改进2. 2溶液的制备
2. 2 . 1对照品贮备液的制备
精密称取黄芩苷对照品适量，用体积分数70%乙醇制成每1 mL 含0.5 mg的对照品贮备液。

2. 2 . 2供试品溶液的制备
（1 ）国家标准方法：取装量差异项下的清开灵颗粒粗粉，研细，精密称取细粉适量（约相当于黄芩苷10 mg），置100 mL量瓶中，加体积分数50%甲醇使溶解，稀释至刻度，摇匀，滤过[2 ];取装量差异项下的清开灵胶囊内容物，研匀，精密称取约0.25 g （约相当于黄芩苷10 mg），置100 mL量瓶中，加甲醇50 mL，超声处理10
min，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，滤过[5];取清开灵片20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.2 g （含黄芩苷不少于7.2 mg ），精密称定，置100 mL量瓶中，加体积分数50%甲醇适量，超声处理
15 min，放冷，加体积分数50%甲醇至刻度，摇匀，滤过〔6〕。

（2）
改进后方法：取装量差异项下的不同剂型的清开灵药品细粉，精密称
取适量（约相当于黄芩苷10 mg），置100 mL量瓶中，加体积分数70%乙醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液做为供试品溶液。

取上述溶液，按“2 . 1 ”项下的色谱条件进行测定，结果见图1-3，可见用本文改进方法制备供试品溶液，其图谱特征与国家标
准方法处理的供试品溶液基本一致。

2 . 2 . 3阴性样品溶液的制备
按处方比例取黄芩苷外的其他药材，按2.2.2”项下的方涼2）制备阴性对照溶液。

2 . 3专属性试验
分别取黄芩苷对照品溶液（0.105 7 mg mL-1 ）、供试品溶液和阴性对照品溶液各10山，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果阴性样品溶液无干扰，理论板数为4 717.85，见图4。

2 . 4线性关系考察
分别精密量取黄芩苷对照品贮备液1、3、5、10、15、20 mL，加体积分数70%乙醇稀释成黄芩苷浓度为0.01057、0.03171、0.05285、
0.1057、0.1586、0.2114 mg mL-1 的溶液，按‘2. 1 ” 项下的色谱条件进行测定。

以质量浓度（P，mg mL-1 ）为横坐标，各自峰面积（A）为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为A=3.602 X10 7 p-6.953 X103 , r =0.999 9（n=6 ）。

黄芩苷的质量浓度在0.01057 〜0.2114 mg mL-1 范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2 . 5精密度试验
取质量浓度为0.1057 mg mL-1的黄芩苷对照品溶液，按“ 2. 1 ”项下的色谱条件进行测定，重复进样5次，测得其峰面积的RSD值为
0.11%，表明仪器精密度良好。

2 . 6稳定性试验
取清开灵颗粒（批号080114008 ）按2. 2 . 2”项下的方法（2）制备供试品溶液，分别在制备后0、2、4、6、8、10 h进样，测定峰面积，分别取清开灵胶囊（批号071202095 ）与清开灵片（批号080306009 ）同法制备和测定，计算黄芩苷峰面积的RSD值分别为
0.18%、0.42%、0.39%，表明3种剂型的供试品溶液在10 h内测定结果稳定。

2 . 7重复性试验
取清开灵系列样品，分别按“ 2 . 2 . 2”项下的方法（2）平行制备6 份供试品溶液，按“2 . 1 ”项下的色谱条件进行测定并计算，结果见表1，表明本方法重复性良好。

表1重复性试验结果（略）
2. 8回收率试验
（1）清开灵颗粒：取已知含量的供试品约0.15 g 6份，精密称定，
置20 mL容量瓶中，分别精密加入0.1022 mg mL-1的对照品溶液10 mL ; （2）清开灵胶囊：取已知含量的供试品约0.025 g 6份，精密称定，置20 mL容量瓶中，分别精密加入0.1116 mg mL-1的对照品溶液10 mL ；（3）清开灵片：取已知含量的供试品约0.011 g 6份, 精密称定，置20 mL容量瓶中，分别精密加入0.1116 mg mL-1的对照品溶液10 mL ;再分别加体积分数70%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液按21 ”项下的色谱条件进行测定并计算，结果见表2。

表2加样回收率试验结果（略）
2 . 9样品测定
取清开灵系列样品，按2. 2. 2”项下的方法（2）制备供试品溶液，按2. 1 ”项下的色谱条件进行测定，以外标法计算黄芩苷的含量。

结果表明2种不同溶解方法制备所得样品的含量测定结果基本一致。

见表3。

表3清开灵系列样品含量测定结果（略）
3讨论
国家标准收载的黄芩苷含量测定方法，需要使用对呼吸道
粘膜和视力有所损伤的甲醇，不利于实验室管理和环境保护。

改进后的方法用体积分数70%乙醇代替50%甲醇制备对照品和供试品溶液，减少了中等毒性试剂甲醇的使用。

同时，本法为清开灵系列药品黄芩苷含量测定
方法的统一和简化提供了可靠的依据。

【参考文献】
[1 ]张妙媛，姚金成，赵绪元，等.清开灵不同制剂的高
效液相指纹特征比较[J].时珍国医国药，2007，18 （2）: 442-443.
:2 ］国家药典委员会.WS3 —163 (X—153) —99 (Z)
国家药品标准新药转正标准第十六至二十六册］S］•北京：人民卫生
出版社,2006 : 719-721.
:3 ］张捷莉，兴东杰，彭博，等.反相高效液相色谱法测
定清开灵中黄芩苷的含量［J］.时珍国医国药，2005,16(5):380-381.
:4］国家药典委员会中华人民共和国药典：2005年版
一部］M］.北京：化学工业出版社，2005 : 610-612.
:5 ］国家药典委员会.WS3 —164 (X—154) —99 (Z)
国家药品标准新药转正标准第十六至二十六册］S］.北京：人民卫生出版社,2006 : 722-724.
:6］国家药典委员会.WS3 —287 (Z—087) —2001 (Z)国家药品标准新药转正标准第三十一册］S］.北京：人民卫生出版
社,2006 : 50-51.。