尿蛋白检验
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α1-AT以及低分子量蛋白β2-M\FC片段等 3. 不见分子量大的蛋白如IgG、 IgA、 IgM、
C3 4. 尿免疫球蛋白/清蛋白的比值<0.1,尿蛋
白+++~++++,定量>3.5g/L 5. 主要见于肾病综合症
肾小球性蛋白尿
• 非选择性蛋白尿
1. 可见>9万的蛋白如 IgG、IgA、IgM、 C3和中分子量以及 小分子量蛋白β2MG
临床意义
• 肾前性蛋白尿---溢 出性蛋白尿
–血液中低分子量蛋白 质如血红蛋白、肌红 蛋白、本周氏蛋白等 增加超出肾小管重吸 收能力
临床意义
• 肾性蛋白尿
1.肾小球性蛋白尿 ①选择性蛋白尿 ②非选择性蛋白尿
2.肾小管性蛋白尿 3.混合性蛋白尿
肾小球性蛋白尿
• 选择性蛋白尿
1. 4~9万中分子量蛋白,以清蛋白为主 2. 可见分子量接近的AT、Tf、PA ,α1-AG、
• 肾脏病变累及肾小球和肾 小管,由此产生的蛋白尿 称为混合性蛋白尿
• 标题
–1非选择性肾小球性蛋白尿伴游
离轻链;
图
–2肾小管性蛋白尿伴游离轻链
–3生理性蛋白尿
–4混合性蛋白尿
–5选择性肾小球性蛋白尿
电
泳
图
谱
1 SDS-PAGE
肾后蛋白尿
1.组织性蛋白尿
在尿液代谢过程中,肾小 管代谢产生的和肾组织破 坏分解的蛋白,以及炎症 或药物刺激泌尿系统分泌 的蛋白(T-H)
• 成分 1.主要酸碱指示剂溴酚 蓝(PH阈值3.2) 2.柠檬酸缓冲系统 3.表面活性剂
• 1971年日本生产对白蛋 白、球蛋白、本周氏蛋 白均反应
• 1993年生产出免疫学方 法
干化学法---指示剂蛋白质误差原理
3,3׳,5,5′-四 溴苯酚磺酰酞
1909年Soerensen 发现
尿蛋白试剂带组成及特性
2. 尿蛋白+~++,定量<2g/L 3. 试带法可出现假阴性,
其他方法阳性
肾小管性蛋白尿
1.肾小管间质病变
a)间质性肾炎、肾盂 肾炎、遗传性肾小 管疾病、慢性失钾 性肾病
b)中毒性肾间质性肾 病
①重金属中毒
②苯、四氯化碳有 机溶剂
③抗生素
④中草药:马兜铃、 木通
c)器官移植
马 兜 铃
混合性蛋白尿
2.偶然性蛋白尿
尿道炎、出血、混有阴道 分泌物或精液
想一想
• 患者尿蛋白长期持续增高会有什么临床 表现?
谢谢!!
• 假阴性 1. 尿液过碱(PH>9)或过酸(PH<3)
大剂量青霉素滴注后对磺基水杨酸法 测定尿蛋白的影响
尿蛋白定性实验方法学评价
对单纯球蛋白有特殊反应
在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的, 建议使用磺基水杨酸(加热醋酸)和双缩尿法
尿液蛋白质的定量检验
比浊法
磺基水杨酸 三氯乙酸 钨酸
通过加酸于尿液中使蛋白 质沉淀而形成一定的浊度
氯化苄甲乙氧胺 碱性环境下,蛋白质与季
氯化苯甲烃胺
胺盐结合形成不溶性沉淀
双缩脲法:经典方法
染料结合法
考马斯亮蓝G-250 染料和蛋白质结
直接法
合时,其最大吸
邻苯三酚红
收峰发生漂移
丽春红S 沉淀法
苯胺蓝
蛋白质与结合的染料在TCA的 作用下共沉淀。然后碱性环境 使沉淀复溶,测定吸光度
• 免疫法 • 电泳法
糖、酮体及三胆等的注意事项及临 床意义
尿液蛋白质
尿液蛋白质检查
•健康人尿中的蛋白质含 量甚微 (30~130mg/24h),
•当尿液中蛋白质 >100mg/L或 150mg/24h时,蛋白定 性为阳性,称为蛋白尿
尿蛋白定性检测方法
1.加热乙酸法 2.磺基水杨酸法 3.干化学试带法
干化学法
• PH指示剂蛋白质误差 原理,1909年Soerensen 发现
尿液蛋白质定量检验方法评价
临床意义
• 定性试验(—) • 定量试验:≤150mg/24h(<100mg/L)
来自百度文库
临床意义
•生理性蛋白尿
•功能性蛋白尿 •直立性蛋白尿 •摄入性蛋白尿 •老年性蛋白尿 •妊娠性蛋白尿
临床意义
• 病理性蛋白尿
1.肾前性蛋白尿 2.肾性蛋白尿
① 肾小球性蛋白尿 ②肾小管性蛋白尿 3.肾后蛋白尿
试带法检测尿蛋白的干扰因素
仅作为过筛实验
不同PH对尿蛋白的影响
青霉素对蛋白质测定影响
大剂量青霉素滴注后对试带法 测定尿蛋白的影响
5~6h后检测尿蛋白
加热醋酸法测定尿蛋白
• 加热可使蛋白质变性凝固,加酸 使蛋白质接近等电点,在含有适 量无机盐的情况下,蛋白沉淀
加热乙酸法--注意事项
标本要新鲜,陈旧尿液因大量细菌生长可引起假 阳性,其他分泌物也可能出现假阳性
加酸过多或过少远离蛋白质等电点,可呈假阴性 无盐或低盐饮食的病人,因尿内电解质含量少,
不利蛋白质沉淀,可致假阴性。可先加1-2滴饱 和氯化钠液后再操作 严格按照加热\加酸\再加热程序,否则假阴性
磺基水杨酸法
• 试管法 • 玻片法
磺基水杨酸法--干扰因素
• 假阳性 1. 尿液混浊 含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐 2. 一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、 降血糖药可呈假阳性 3. 混入生殖系统分泌物
尿液化学检查
(尿蛋白的检验)
河南科技大学第二附属医院
王善龙
尿液化学检查
• 尿液化学检验包括 酸碱度、蛋白质、糖、 酮体、胆色素、酶、 激素等检查 •pH、PRO、GLU、 KET 、BIL、URO
本节要点
• 了解尿液特殊化学检验的项目方法 及临床意义
• 掌握尿液一般化学检验的原理 • 重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、
2. 免疫球蛋白/清蛋 白比值>0.5
3. 尿蛋白+~++++,定 量0.5~3g/L
4. 多见于
1.原发性肾小球疾 病:激进性肾炎、 慢性肾炎、膜性 或膜增生性肾炎
2.继发性肾小球肾 炎:糖尿病、红 斑狼疮
• 提示预后差
肾小管性蛋白尿
1. 尿中蛋白以α1-M、β2-M、 LZM、RNase增多为主, 清蛋白正常或轻度增多
C3 4. 尿免疫球蛋白/清蛋白的比值<0.1,尿蛋
白+++~++++,定量>3.5g/L 5. 主要见于肾病综合症
肾小球性蛋白尿
• 非选择性蛋白尿
1. 可见>9万的蛋白如 IgG、IgA、IgM、 C3和中分子量以及 小分子量蛋白β2MG
临床意义
• 肾前性蛋白尿---溢 出性蛋白尿
–血液中低分子量蛋白 质如血红蛋白、肌红 蛋白、本周氏蛋白等 增加超出肾小管重吸 收能力
临床意义
• 肾性蛋白尿
1.肾小球性蛋白尿 ①选择性蛋白尿 ②非选择性蛋白尿
2.肾小管性蛋白尿 3.混合性蛋白尿
肾小球性蛋白尿
• 选择性蛋白尿
1. 4~9万中分子量蛋白,以清蛋白为主 2. 可见分子量接近的AT、Tf、PA ,α1-AG、
• 肾脏病变累及肾小球和肾 小管,由此产生的蛋白尿 称为混合性蛋白尿
• 标题
–1非选择性肾小球性蛋白尿伴游
离轻链;
图
–2肾小管性蛋白尿伴游离轻链
–3生理性蛋白尿
–4混合性蛋白尿
–5选择性肾小球性蛋白尿
电
泳
图
谱
1 SDS-PAGE
肾后蛋白尿
1.组织性蛋白尿
在尿液代谢过程中,肾小 管代谢产生的和肾组织破 坏分解的蛋白,以及炎症 或药物刺激泌尿系统分泌 的蛋白(T-H)
• 成分 1.主要酸碱指示剂溴酚 蓝(PH阈值3.2) 2.柠檬酸缓冲系统 3.表面活性剂
• 1971年日本生产对白蛋 白、球蛋白、本周氏蛋 白均反应
• 1993年生产出免疫学方 法
干化学法---指示剂蛋白质误差原理
3,3׳,5,5′-四 溴苯酚磺酰酞
1909年Soerensen 发现
尿蛋白试剂带组成及特性
2. 尿蛋白+~++,定量<2g/L 3. 试带法可出现假阴性,
其他方法阳性
肾小管性蛋白尿
1.肾小管间质病变
a)间质性肾炎、肾盂 肾炎、遗传性肾小 管疾病、慢性失钾 性肾病
b)中毒性肾间质性肾 病
①重金属中毒
②苯、四氯化碳有 机溶剂
③抗生素
④中草药:马兜铃、 木通
c)器官移植
马 兜 铃
混合性蛋白尿
2.偶然性蛋白尿
尿道炎、出血、混有阴道 分泌物或精液
想一想
• 患者尿蛋白长期持续增高会有什么临床 表现?
谢谢!!
• 假阴性 1. 尿液过碱(PH>9)或过酸(PH<3)
大剂量青霉素滴注后对磺基水杨酸法 测定尿蛋白的影响
尿蛋白定性实验方法学评价
对单纯球蛋白有特殊反应
在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的, 建议使用磺基水杨酸(加热醋酸)和双缩尿法
尿液蛋白质的定量检验
比浊法
磺基水杨酸 三氯乙酸 钨酸
通过加酸于尿液中使蛋白 质沉淀而形成一定的浊度
氯化苄甲乙氧胺 碱性环境下,蛋白质与季
氯化苯甲烃胺
胺盐结合形成不溶性沉淀
双缩脲法:经典方法
染料结合法
考马斯亮蓝G-250 染料和蛋白质结
直接法
合时,其最大吸
邻苯三酚红
收峰发生漂移
丽春红S 沉淀法
苯胺蓝
蛋白质与结合的染料在TCA的 作用下共沉淀。然后碱性环境 使沉淀复溶,测定吸光度
• 免疫法 • 电泳法
糖、酮体及三胆等的注意事项及临 床意义
尿液蛋白质
尿液蛋白质检查
•健康人尿中的蛋白质含 量甚微 (30~130mg/24h),
•当尿液中蛋白质 >100mg/L或 150mg/24h时,蛋白定 性为阳性,称为蛋白尿
尿蛋白定性检测方法
1.加热乙酸法 2.磺基水杨酸法 3.干化学试带法
干化学法
• PH指示剂蛋白质误差 原理,1909年Soerensen 发现
尿液蛋白质定量检验方法评价
临床意义
• 定性试验(—) • 定量试验:≤150mg/24h(<100mg/L)
来自百度文库
临床意义
•生理性蛋白尿
•功能性蛋白尿 •直立性蛋白尿 •摄入性蛋白尿 •老年性蛋白尿 •妊娠性蛋白尿
临床意义
• 病理性蛋白尿
1.肾前性蛋白尿 2.肾性蛋白尿
① 肾小球性蛋白尿 ②肾小管性蛋白尿 3.肾后蛋白尿
试带法检测尿蛋白的干扰因素
仅作为过筛实验
不同PH对尿蛋白的影响
青霉素对蛋白质测定影响
大剂量青霉素滴注后对试带法 测定尿蛋白的影响
5~6h后检测尿蛋白
加热醋酸法测定尿蛋白
• 加热可使蛋白质变性凝固,加酸 使蛋白质接近等电点,在含有适 量无机盐的情况下,蛋白沉淀
加热乙酸法--注意事项
标本要新鲜,陈旧尿液因大量细菌生长可引起假 阳性,其他分泌物也可能出现假阳性
加酸过多或过少远离蛋白质等电点,可呈假阴性 无盐或低盐饮食的病人,因尿内电解质含量少,
不利蛋白质沉淀,可致假阴性。可先加1-2滴饱 和氯化钠液后再操作 严格按照加热\加酸\再加热程序,否则假阴性
磺基水杨酸法
• 试管法 • 玻片法
磺基水杨酸法--干扰因素
• 假阳性 1. 尿液混浊 含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐 2. 一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、 降血糖药可呈假阳性 3. 混入生殖系统分泌物
尿液化学检查
(尿蛋白的检验)
河南科技大学第二附属医院
王善龙
尿液化学检查
• 尿液化学检验包括 酸碱度、蛋白质、糖、 酮体、胆色素、酶、 激素等检查 •pH、PRO、GLU、 KET 、BIL、URO
本节要点
• 了解尿液特殊化学检验的项目方法 及临床意义
• 掌握尿液一般化学检验的原理 • 重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、
2. 免疫球蛋白/清蛋 白比值>0.5
3. 尿蛋白+~++++,定 量0.5~3g/L
4. 多见于
1.原发性肾小球疾 病:激进性肾炎、 慢性肾炎、膜性 或膜增生性肾炎
2.继发性肾小球肾 炎:糖尿病、红 斑狼疮
• 提示预后差
肾小管性蛋白尿
1. 尿中蛋白以α1-M、β2-M、 LZM、RNase增多为主, 清蛋白正常或轻度增多