第四章___培养基的制作
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适合于各类微生物的生长
2.合成培养基
是指用已知成分和数量的化合物配
制而成的培养基。适用研究
3.半合成培养基
利用天然物质作为碳、氮源及维
生素的来源另加一些无机盐类配制而成
(二)按培养基的物理状态分类
1.液体培养基
不加琼脂，多用于生理生化方面研究,培养 液体菌种等。 2.固体培养基 凝固剂的量,琼脂冬季为1.5%--2.0%,夏
第四章
第一节
培养基的制作
母种培养基制作
第二节 原种、栽培种培养基制作
第三节 液体菌种制作技术
教学目的：熟练掌握各级培养基
的制作方法 。
教学重点：培养基的制作方法 。
第一节
一、菌种培养基
母种培养基的制作
(一)按营养物质种类分类 l.天然培养基 常用的生物材料有马铃薯、胡萝
卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。
含量、残糖量、菌丝形态、pH、发酵液的外观和粘度等因
素才能决定。
2.制备药物或提取生化制品 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
3.制作食品或畜禽饲料
四、液体菌种制作的主要设备
1.摇床 往复式播床：振荡方式为来回振荡 旋转式摇床：振荡方式为旋转
四、液体菌种制作的主要设备
2.种子罐和发酵罐 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度，例如，黑木耳的
最适pH为6.0-6.5、金针菇为6.3、香菇为4.5-6.5。
7.罐压 在发酵过程中罐压通常为0.2-0.7Kg/cm。 8.泡沫控制 在发酵过程中泡沫过多不利于发酵，目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫。
9.发酵特点
发酵终点是否准确，应参考产物浓度、过滤浓度、氨基酸
米面5%，石膏1.5%，石灰1%，糖0.5%，过磷酸钙1.5%，尿
素0.5%，料，水=1：1.2左右。适用于金针菇，滑子蘑等
分解基质能力较弱的品种使用。
⑤麦粒、木屑培养基配方
新鲜、优质小麦80%，阔叶树木屑20%，木屑：水=1：1 左右，拌木屑用煮小麦水，或在此基础上，加入总量0.5% 的过磷酸钙，0.5%的蔗糖,1%的石灰，在麦粒煮好后连同 木屑拌入。 ⑥玉米粒培养基配方 优质新鲜玉米100%，或后期加入0.5%过磷酸钙，0.5%的
四、液体菌种制作的主要设备
3.空气净化设备 4.培养基连续灭菌设备 包括配料罐、连消塔、维持塔、喷淋冷却器等。 5．供气设备 主要是蒸气锅炉及附属设备
五、液体菌种制作的主要工艺
1.种子制备 种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度 的种子 ①斜面菌种制备 。 ②摇瓶种子制备 ③一级、二级种子制备 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐为500-1000L。
以用（17-18）X（30-35）X（0.04-0.05）cm
低压聚乙烯袋。
第三节
液体菌种制作技术
一、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是在发酵罐中，采用液
体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培 养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢
所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获
得大量的菌丝体或代谢产物。
三、制作方法
（一）营养液制作 1. 准备工作
2.
称量、材料预处理
按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、 挖掉芽眼后称量200g，切成1cm见方的小块。琼脂
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剪碎后用水浸泡。
3.
熬煮
将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中，
煮至酥而不烂。
4. 入糖
过滤、加可溶药物
用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加
②装瓶：闷1-2个小时（夏季时间不宜过长） 待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松
压平料面，擦净瓶口，打1.5cm粗接种孔至瓶底
封口。
③灭菌：同谷料培养基制作
④出锅、冷却：同谷粒培养基制作
三、栽培种制作 制作方法基本同于原种制作。需要注意
的是栽培种培养基制作一般选用加富的培养
料，而且含水量要较原种加大，更利于菌种 快速吃料。容器可以用500ml罐头瓶，也可
一、常见原种配方
①木屑培养基配方 细木屑80%，麸皮12%，玉米面1%，黄豆粉2%，过磷酸钙 1.5%，红糖0.5%，尿素0.4%，硫酸镁0.1%，石灰1%，石膏 2%，料：水=1：1.0-1.2。此配方适合香菇、黑木耳、平 菇原种生长，菌丝粗壮洁白。 ②玉米芯培养基配方 玉米芯80%，麸皮14%，糖0.5%，过磷酸钙1%，石灰2%， 尿素0.5%，玉米面2%，料：水=1：1.4-1.5。此配方适合 于培养平菇原种，菌丝生长速度快，且菌丝粗状。
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 菌龄与种子的活力密切相关。通常，摇瓶种子菌龄控制在 4-10d，一级种子和二级种子菌龄为48-96H。 2.接种量 一般地，食用菌深层发酵时的接种量为10-20%。 3.温度 通常在22-30℃生长最快，得率最高。
4.通气量 食用菌深层发酵的通气量以0.2-1.5通气体积/培养液体积 /min为宜。 5.搅拌速度 食用菌深层发酵的搅拌速度一般是180-500r/min。
酸）浸泡24小时，隔夜换水。
3.
煮沸、沥干捞出 泡好后，漂洗干净（去杂），煮至饱胀
无白心，切忌煮开花，沥干水分后捞出。
4. 拌料
用煮小麦水拌木屑、棉籽壳、麸皮，最
后再一起与麦粒拌匀。
5.装瓶
(1)装料量应为1/3或1/2罐头瓶，便于培养 时摇动基料促进丝均匀生长。
(2)擦净并封瓶口
封口塑料袋采用规格为13cm×13cm×0.004cm 高压聚丙稀袋，二层，里层在中央剪一3cm宽 菱形口。至少二个皮套。
(四) 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2
（三）灭菌处理
在1.0—1.5 kg/cm2压力下维持20--30min。
(四) 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2
第二节 原种、栽培种培养基制作
③玉米芯、木屑混合培养基配方
玉米芯42%，木屑20%，豆秸20%，麸皮10%，过磷酸钙 1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种。生长健壮，也可 培养金针菇，滑子蘑原种。 ④软质木屑配方 椴木屑75%（木线厂下脚料，颗粒较大），麸皮15%，玉
1.5%，石灰2%，石膏1%，糖0.5%，玉米面3%，料：水1=1：
季2.2%--2.3%。
3.半固体培养基
含有较少量琼脂(0.2%--0.5%)的培养基,
使培养基未达到固态而呈粘稠状态。
二、母种培养基配方：
1.土豆200g、糖20g、琼脂18g、水1000ml 2. 去 皮 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 20g 、 琼 脂 18-20g 、 水 1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄 豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mg）。此 配方适用于大多数菌种，金针菇、黑木耳、灵芝生长尤其 茁壮。可作黑木耳复壮培养基。 3. 去 皮 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 20g 、 琼 脂 18-20g 、 水 1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄 豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mL），平 菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长。做平菇的 复壮培养基效果显著。 4. 去 皮 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 20g 、 琼 脂 18-20g 、 水 1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄 豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mg）1片 ，香菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长，可做 香菇的复壮培养基，效果显著。
6.装锅灭菌 高压灭菌于126℃左右维持2小时；常
压灭菌于100℃维持10-12小时，夏季时间
可酌情延长。
7.出锅 、冷却
冷却至30℃以下待接种。
二、.木屑、玉米芯料培养基制作方法
1.按配方称料。 2.拌料：干混（将石膏和不溶于水的主料和
辅料混匀）；湿混（将石灰和溶于水的辅料 制成母液，加入所需水量稀释后拌料）。
二、液体菌种制作的特点
1.原料来源广泛 2.菌丝体生长快速 3.生产周期短 食用菌深层发酵一般仅需2-7d就可获得大量的菌丝体， 而固体培养则需30-60d。 4.工厂化生产、无季节性 食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培养菌
体的，不受季节性限制。
三、液体菌种制作的用途
1.生产液体菌种 食用菌经深层发酵2-7d的幼嫩菌丝体，可以用来作为食用 菌栽培用的原种和栽培种。
5. 熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全 溶化为止，定容至1000ml。
（二）营养液分装 1. 2. 用注射器分装 分装标准:分装量为试管长度的1/4—
1/5。注意培养基不能沾污试管口。
3.塞棉塞 棉塞松紧适度，1/3在管外，2/3在管内。 4.扎捆 7-10支试管捆在一起，棉塞上包好防水纸，直 立放入高压灭菌锅中。
糖,1%的石灰。
玉米粒培养基制作的原种，具备麦粒原种的优点，后劲
更足，接种扩繁量更大。
二、原种培养基的制作方法
一、谷粒培养基制作
1.按配方称量各营养物质
配方一：优质新鲜小麦65%，木屑15%，棉籽 尿素0.5%
壳15%，麸皮5%，石膏1%，过磷酸钙0.5%，糖0.5%， 2.谷粒浸泡吸水
冬季浸泡24-48小时，夏季加1%石灰（以防变
2.合成培养基
是指用已知成分和数量的化合物配
制而成的培养基。适用研究
3.半合成培养基
利用天然物质作为碳、氮源及维
生素的来源另加一些无机盐类配制而成
(二)按培养基的物理状态分类
1.液体培养基
不加琼脂，多用于生理生化方面研究,培养 液体菌种等。 2.固体培养基 凝固剂的量,琼脂冬季为1.5%--2.0%,夏
第四章
第一节
培养基的制作
母种培养基制作
第二节 原种、栽培种培养基制作
第三节 液体菌种制作技术
教学目的：熟练掌握各级培养基
的制作方法 。
教学重点：培养基的制作方法 。
第一节
一、菌种培养基
母种培养基的制作
(一)按营养物质种类分类 l.天然培养基 常用的生物材料有马铃薯、胡萝
卜、蚕蛹粉、豆芽汁、花生饼粉、玉米粉、酵母等。
含量、残糖量、菌丝形态、pH、发酵液的外观和粘度等因
素才能决定。
2.制备药物或提取生化制品 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
3.制作食品或畜禽饲料
四、液体菌种制作的主要设备
1.摇床 往复式播床：振荡方式为来回振荡 旋转式摇床：振荡方式为旋转
四、液体菌种制作的主要设备
2.种子罐和发酵罐 许多食用菌种类，其深层发酵培养的菌丝体可作为提取药 物成分或生化制品的材料。
6.酸碱度
不同种类的食用菌都有一个最适酸碱度，例如，黑木耳的
最适pH为6.0-6.5、金针菇为6.3、香菇为4.5-6.5。
7.罐压 在发酵过程中罐压通常为0.2-0.7Kg/cm。 8.泡沫控制 在发酵过程中泡沫过多不利于发酵，目前大多数是加入
0.006%的泡敌做消泡剂消除泡沫。
9.发酵特点
发酵终点是否准确，应参考产物浓度、过滤浓度、氨基酸
米面5%，石膏1.5%，石灰1%，糖0.5%，过磷酸钙1.5%，尿
素0.5%，料，水=1：1.2左右。适用于金针菇，滑子蘑等
分解基质能力较弱的品种使用。
⑤麦粒、木屑培养基配方
新鲜、优质小麦80%，阔叶树木屑20%，木屑：水=1：1 左右，拌木屑用煮小麦水，或在此基础上，加入总量0.5% 的过磷酸钙，0.5%的蔗糖,1%的石灰，在麦粒煮好后连同 木屑拌入。 ⑥玉米粒培养基配方 优质新鲜玉米100%，或后期加入0.5%过磷酸钙，0.5%的
四、液体菌种制作的主要设备
3.空气净化设备 4.培养基连续灭菌设备 包括配料罐、连消塔、维持塔、喷淋冷却器等。 5．供气设备 主要是蒸气锅炉及附属设备
五、液体菌种制作的主要工艺
1.种子制备 种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、健壮的、高纯度 的种子 ①斜面菌种制备 。 ②摇瓶种子制备 ③一级、二级种子制备 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐为500-1000L。
以用（17-18）X（30-35）X（0.04-0.05）cm
低压聚乙烯袋。
第三节
液体菌种制作技术
一、液体菌种制作的原理
食用菌液体菌种制作是在发酵罐中，采用液
体培养基通入无菌空气并加以搅拌，增加培 养基中溶氧含量，提供食用菌菌体呼吸代谢
所需要的氧气，并控制适宜的外界条件，获
得大量的菌丝体或代谢产物。
三、制作方法
（一）营养液制作 1. 准备工作
2.
称量、材料预处理
按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、 挖掉芽眼后称量200g，切成1cm见方的小块。琼脂
wk.baidu.com
剪碎后用水浸泡。
3.
熬煮
将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中，
煮至酥而不烂。
4. 入糖
过滤、加可溶药物
用双层沙布过滤，取滤汁，放在电饭锅中加
②装瓶：闷1-2个小时（夏季时间不宜过长） 待料充分吸足水后装瓶，装料至瓶肩，上紧下松
压平料面，擦净瓶口，打1.5cm粗接种孔至瓶底
封口。
③灭菌：同谷料培养基制作
④出锅、冷却：同谷粒培养基制作
三、栽培种制作 制作方法基本同于原种制作。需要注意
的是栽培种培养基制作一般选用加富的培养
料，而且含水量要较原种加大，更利于菌种 快速吃料。容器可以用500ml罐头瓶，也可
一、常见原种配方
①木屑培养基配方 细木屑80%，麸皮12%，玉米面1%，黄豆粉2%，过磷酸钙 1.5%，红糖0.5%，尿素0.4%，硫酸镁0.1%，石灰1%，石膏 2%，料：水=1：1.0-1.2。此配方适合香菇、黑木耳、平 菇原种生长，菌丝粗壮洁白。 ②玉米芯培养基配方 玉米芯80%，麸皮14%，糖0.5%，过磷酸钙1%，石灰2%， 尿素0.5%，玉米面2%，料：水=1：1.4-1.5。此配方适合 于培养平菇原种，菌丝生长速度快，且菌丝粗状。
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 菌龄与种子的活力密切相关。通常，摇瓶种子菌龄控制在 4-10d，一级种子和二级种子菌龄为48-96H。 2.接种量 一般地，食用菌深层发酵时的接种量为10-20%。 3.温度 通常在22-30℃生长最快，得率最高。
4.通气量 食用菌深层发酵的通气量以0.2-1.5通气体积/培养液体积 /min为宜。 5.搅拌速度 食用菌深层发酵的搅拌速度一般是180-500r/min。
酸）浸泡24小时，隔夜换水。
3.
煮沸、沥干捞出 泡好后，漂洗干净（去杂），煮至饱胀
无白心，切忌煮开花，沥干水分后捞出。
4. 拌料
用煮小麦水拌木屑、棉籽壳、麸皮，最
后再一起与麦粒拌匀。
5.装瓶
(1)装料量应为1/3或1/2罐头瓶，便于培养 时摇动基料促进丝均匀生长。
(2)擦净并封瓶口
封口塑料袋采用规格为13cm×13cm×0.004cm 高压聚丙稀袋，二层，里层在中央剪一3cm宽 菱形口。至少二个皮套。
(四) 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2
（三）灭菌处理
在1.0—1.5 kg/cm2压力下维持20--30min。
(四) 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝，用余热烘干报纸和 棉塞，然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2
第二节 原种、栽培种培养基制作
③玉米芯、木屑混合培养基配方
玉米芯42%，木屑20%，豆秸20%，麸皮10%，过磷酸钙 1.4-1.5。此配方适合于培养平菇原种。生长健壮，也可 培养金针菇，滑子蘑原种。 ④软质木屑配方 椴木屑75%（木线厂下脚料，颗粒较大），麸皮15%，玉
1.5%，石灰2%，石膏1%，糖0.5%，玉米面3%，料：水1=1：
季2.2%--2.3%。
3.半固体培养基
含有较少量琼脂(0.2%--0.5%)的培养基,
使培养基未达到固态而呈粘稠状态。
二、母种培养基配方：
1.土豆200g、糖20g、琼脂18g、水1000ml 2. 去 皮 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 20g 、 琼 脂 18-20g 、 水 1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄 豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mg）。此 配方适用于大多数菌种，金针菇、黑木耳、灵芝生长尤其 茁壮。可作黑木耳复壮培养基。 3. 去 皮 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 20g 、 琼 脂 18-20g 、 水 1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄 豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mL），平 菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长。做平菇的 复壮培养基效果显著。 4. 去 皮 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 20g 、 琼 脂 18-20g 、 水 1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、玉米面5g、黄 豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸镁2g，VB11片（10mg）1片 ，香菇子实体100g。此配方适用于大多数菌种生长，可做 香菇的复壮培养基，效果显著。
6.装锅灭菌 高压灭菌于126℃左右维持2小时；常
压灭菌于100℃维持10-12小时，夏季时间
可酌情延长。
7.出锅 、冷却
冷却至30℃以下待接种。
二、.木屑、玉米芯料培养基制作方法
1.按配方称料。 2.拌料：干混（将石膏和不溶于水的主料和
辅料混匀）；湿混（将石灰和溶于水的辅料 制成母液，加入所需水量稀释后拌料）。
二、液体菌种制作的特点
1.原料来源广泛 2.菌丝体生长快速 3.生产周期短 食用菌深层发酵一般仅需2-7d就可获得大量的菌丝体， 而固体培养则需30-60d。 4.工厂化生产、无季节性 食用菌深层发酵是在发酵罐内、控制最佳条件来培养菌
体的，不受季节性限制。
三、液体菌种制作的用途
1.生产液体菌种 食用菌经深层发酵2-7d的幼嫩菌丝体，可以用来作为食用 菌栽培用的原种和栽培种。
5. 熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂，直到琼脂完全 溶化为止，定容至1000ml。
（二）营养液分装 1. 2. 用注射器分装 分装标准:分装量为试管长度的1/4—
1/5。注意培养基不能沾污试管口。
3.塞棉塞 棉塞松紧适度，1/3在管外，2/3在管内。 4.扎捆 7-10支试管捆在一起，棉塞上包好防水纸，直 立放入高压灭菌锅中。
糖,1%的石灰。
玉米粒培养基制作的原种，具备麦粒原种的优点，后劲
更足，接种扩繁量更大。
二、原种培养基的制作方法
一、谷粒培养基制作
1.按配方称量各营养物质
配方一：优质新鲜小麦65%，木屑15%，棉籽 尿素0.5%
壳15%，麸皮5%，石膏1%，过磷酸钙0.5%，糖0.5%， 2.谷粒浸泡吸水
冬季浸泡24-48小时，夏季加1%石灰（以防变