凝聚胺交叉配血试验 ppt课件

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操作
❖ 1. 取试管两支，标明主侧次侧，主侧管加受 血者血清(血浆)1滴，和供血者3～5％红细胞 悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴，次侧管受血者 3～5％红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)l滴， 加供血者血清(血浆)1滴。
❖ 2. 各加LIM溶液3滴，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟或 参照说明书。
灵敏度高；但费时，准确性和稳定性差。
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❖ 4.卡式配血（微柱凝胶法）已成为国际安
全输血检查的推荐方法，该法具有：①检测 项目全②灵敏度高③特异性强④重复性好⑤ 客观性好⑥节省样品、试剂，结果易保存⑦ 可自动化操作。不足之处是成本昂贵。
❖ 5.抗球蛋白介质配血法是检查不完全抗体
最敏感、可靠的方法；但试剂价格较贵，操 作复杂、费时。
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❖ 3．普通离心机1000g离心15秒，然后把上清液 倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
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❖ 4．轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如 无凝集，则必须重作。
❖ 5．最后加入Resuspending2滴，轻轻转动试管混 匀并同时观察结果。
❖ 6. 结果判定：如果在30秒内（或按说明书） 凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性 聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为 红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结 果不相合。如反应可疑，可进一步倒在玻片 上用显微镜观察。
❖ 5．不同的凝聚胺试剂盒操作方法各不相同， 实验时请严格按照说明书操作。
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【方法学评价】
1. 凝聚胺介质配血法反应较盐水法灵敏度高，
能检测几乎所有规则与不规则血型抗体，适用 于各类输血患者的配血。
2. 盐水介质配血法操作简单、反应快速，但
只能发现完全抗体。
3. 酶介质配血法操作较为简便，试剂便宜，
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试验分步原理
血清
加入LIM
混合液 红细胞悬液
Polybrene 受体
IgG 抗 体 迅速致敏
血型抗原
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试验分步原理
加入 Polybrene
Polybrene 分 子 连 接到红细胞上
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试验分步原理
离心
Polybrene 拉 近 红细胞间的距 离并造成凝集
1 个 IgG 分 子 同时连接两 个红细胞
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试验分步原理
加重悬液
加入重悬液减 弱 了 Polybrene 的作用
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试验分步原理
阳性结果
已被血型抗体 致敏的红细胞 不会散开
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试验分步原理
阴性结果
未被血型抗体致敏 的红细胞很快散开
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❖试剂: 凝聚胺试剂盒；生理盐水 ❖ 器材：小试管、滴管、试管架、记
号笔、显微镜、离心机。 ❖ 标本：静脉血。
实验三 凝聚胺法交叉配血
医学检验系 张晨光
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目的：掌握凝聚胺交叉配血法的原理、方法。
原理：聚凝胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶
解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷， 有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红 细胞的Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的吸 引力。
当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与红细胞发生 紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胺的正电 荷，使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开； 如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体，加入解聚液可使 非特异性凝集消失。
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【注意事项】
❖ 1.可以用含EDTA抗凝血浆代替血清使用。 ❖ 2.若受血者血清(血浆)含肝素，如洗肾患者，
须多加4～6滴Po1ybrene溶液以中和肝素。 ❖ 3.试剂使用前请放置至室温平衡后再行操
作。
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❖ 4.在冬天室温极低的情况下进行交叉配血试 验操作，由于某些受血者血清中可能含有寒 冷凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现， 建议进行交叉配血试验操作时室温保持在 22℃左右，最后滴加Resuspending时，将 试管立即置入37℃水浴中，轻轻转动试管混 合，并在30秒内观察结果。