预染蛋白marker说明书

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蛋白Marker说明书

SM0671

PageRuler Prestained Protein Ladder

A prestained SDS-PAGE MW marker with contrasting colored reference bands at

10 and 70kDa.

The Thermo Scientific PageRuler Prestained Prote

is a mixture of ten (10) blue-, orange- and green-s

recombinant proteins (10 to 170kDa) for use as siz

standards in protein electrophoresis (SDS-PAGE)

Western blotting.

This prestained protein MW marker is designed fo

monitoring the progress of SDS-polyacrylamide ge

electrophoresis, for assessing transfer efficiency o

nylon and nitrocellulose membranes, and for estim

approximate size of separated proteins that have b visible with gel stains or Western blot detection reagents. The ladder contains one orange refer at 70kDa and one green band at 10kDa.

Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD） with 45kDa使用说明书

Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa使用说明书

产品名称规格货号

Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa250μl*1LVN150-1

Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa250μl*2LVN150-2

Livning彩色预染蛋白marker（10-180KD）with45kDa2x250μl*10LVN150-10

【储存条件】

-20˚C恒温长期保存，4˚C保存6个月，建议分装保存，避免反复冻融。

【产品简介】

本产品由跨度从10~180kDa的10种纯化的天然蛋白混合而成，各条带浓度约为0.2~0.4mg/ml。其中75kDa条带为红色预染条带，方便判断各个条带的准确位置。本产品适合作为SDS-PAGE电泳时，变性蛋白样品的分子量参照，并可实时观察蛋白样品的电泳分离状况，也可用于检测Western blot的转膜效率。由于共价结合的染料会影响蛋白质分子的电泳迁移率，本产品适于粗略地估计目的蛋白样品的分子量。

【使用方法】

1.将本产品于室温融化后，轻柔混匀，使沉淀充分溶解；

2.加入3~5μl到SDS-聚丙烯酰胺胶的上样孔中，与待测样品一起电泳和转膜；

3.电泳结束后，通过考马斯亮蓝染液染色观察条带。

【注意事项】

1.使用时应该将从冰箱中取出的产品恢复至室温后使用，否则可能由于低温下蛋白变性不彻底导致电泳条带出现不同程度的弥散；

2.使用前先将产品恢复至室温后混匀，使沉淀充分溶解，否则可能导致电泳条带出现不同程度的弥散或拖带；

蛋白标准品(Marker)知识汇总

蛋白Marker可分为：一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。

在western blot 过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个Western Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。

总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。以下是关于蛋白分子量标准的小叙：

一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准

未染色的蛋白分子量标准是最简单，也是最准确的一种。由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小必须的。现在的Marker多数都选用预混和的Marker，方便不同大小的蛋白比较。预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示，因为混合的条带越多，越不好记，谁知道哪条是那条!数到眼都花了。所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。不过要记得，小带通常都不那么容易看清楚的。在选择上来说，当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。如果你的蛋白不幸在两条跨度较大Marker条带之间，选别的Marker吧。预混的Marker 使用上不如预染Marker(pre-stained)好用，因为电泳过程中完全看不到，要和目标蛋白一起等到最后染色才“开蛊”，无法对实验起预示参照作用。完全属于“后知后觉”型的，当然还是比“不知不觉”不做对照的要好。

所有的Fermentas蛋白Marker（新）

Fermentas 蛋白Marker/Ladder

1 2 3 4

6 7 8 9 10

编号货号名称包装报价推荐上样量使用次数

预染蛋白Marker/Ladder

SM0671 2x250μl 870

1 SM067

2 PageRuler? Prestained Protein Ladder 10x250μl 3480

5/10ul （小/大） 100/50（大/小）

SM1811 2x250μl 1100

2 SM1812 PageRuler? Plus Prestained Protein Ladder

10x250μl 4400

5/10ul （小/大） 100/50（大/小）

SM1841 2x250μl 1000

3 SM1842 Spectra? Multicolor Broad Range Protein Ladder 10x250 μl 4500 10/20ul （小/大） 50/25（大/小）

4 SM1851 Spectra? Multicolor High Range Protein 2x250 μl 1300 10/20ul （小/大） 50/25（大/小）

5 SM1861 Spectra? Multicolor Low Range Protein

1x250 μl 1200 5/10ul （小/大）50/25（大/小）6 SM0441 Prestained Protein Molecular Weight Marker 2x250μl 400 5/10ul （小/大） 100/50（大/小）非预染蛋白Marker/Ladder

彩虹130广谱蛋白marker说明书

第1页，共2页

彩虹130广谱蛋白marker 说明书

货号：PR1950

规格：20T (100μL)/50T(250μL)/100T(250μL×2)/500T(250μL×10)

保存：-20℃保存，有效期至少2年。

产品特点：

●三色预染，颜色鲜亮，条带整齐，便于观察。

●用量少，节约成本，仅5μL 即可完美呈现（1.5mm ，10孔梳）。

●广谱多带，一支即可满足多种实验需求。

产品简介：

本产品包含9种彩色预染的已知分子量标准蛋白，分子量范围为15kD-130kD ，每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/mL 。预染marker 可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot 的转膜效果。经SDS-PAGE 凝胶电泳或转移到PVDF 或NC 膜上可得到清晰的9条彩色蛋白条带，其中72kD 条带为红色，25kD 条带为绿色，其余条带为蓝色。

使用说明（仅供参考）：

1.本产品是即用型液体，可直接上样电泳。上样前无需加热，稀释或添加还原剂。

2.上样5μL ，SDS-PAGE 电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。

3.建议分离胶浓度为15%。

电泳示意图说明：

注意事项：

1.本产品含有较高浓度甘油，常规-20℃保存为液体状态，可直接使用。若冰箱温度不稳，导致结

冰，可适当分装后置于4℃保存，至少稳定6个月。

2.Marker 分离效果与PAGE 胶浓度相关，若分离胶浓度低于15%，25kD 以下条带不易分离，但不影

Beijing Solarbio Science &Technology Co.,Ltd

marker说明书

CERTIFICATE OF ANALYSIS

PageRuler ™

Prestained Protein Ladder

#SM0672

10 x 250 µl

(for 100 mini gel applications 5 µl per well or 50 large gel applications 10 µl per well)

Lot: Expiry Date:

Storage: stable at 4°C for up to 3 months. For long term storage, store at -20°C.

SM067_57_9.doc

Description

PageRuler ™

Prestained Protein Ladder is a mixture of 10 recombinant, highly purified colored proteins with apparent molecular weights of 10 kDa to 170 kDa. Ladder proteins are covalently coupled with a blue dye except for two reference bands prestained with different colors. The 72 kDa reference band is orange and 10 kDa reference band is green.

The ladder is supplied in gel loading buffer and is

低分子量蛋白质Marker(14.4kD-97.4kD)使用说明

低分子量蛋白质Marker（14.4kD-97.4kD)使用说明

货号：PR1400

规格：20T

保存：-20℃可保存至少一年。避免反复冻融，建议分装保存。

产品简介：

低分子量蛋白质Marker包含6种蛋白质混合物的冻干粉，分子量范围为14.4kD-97.4kD，每种蛋白的含量约为20-30μg。经过SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶）电泳后，用考马斯亮蓝染色可以得到分布均匀密度相近的6条带。可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。

使用说明：

1.开封后，溶于400µL体积的1×蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂），于沸水浴中加热5分钟，冷却后可根据需要进行小量分装，每管20µL，-20℃贮存，每次取一管使用。

2.如长期贮存后使用，使用前最好取分装后的小管沸水浴预热3-5分钟后再上样电泳，用考马斯亮蓝G-250染色后可见6条蛋白带(见下示意图)。

注意事项：

1.建议分离胶浓度12%，浓缩胶浓度5%，制胶时先配制分离胶，聚合后再配制浓缩胶。电泳时，80v电压大约跑1小时后，待指示剂沿到达分离胶上沿时，将电压调至120v，直到电泳结

束。整个电泳过程大约需3-4个小时。

2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液，该试剂具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。

蛋白质marker原理

蛋白质marker的原理通常涉及到对蛋白质进行标记，以便在后续的分析和检测中能够识别和追踪这些蛋白质。常见的蛋白质marker可以分为免疫标记物和荧光标记物。

免疫标记物是利用免疫学原理，将抗体与目标蛋白质结合，通过免疫反应实现对目标蛋白质的检测和分析。这种方法通常用于Western blot等蛋白质检测技术中，通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的蛋白质样品进行着色，通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。marker相当于标尺，是大小已知的蛋白质混合物，是预染的胶上直接能看到蛋白条带。通过与目的蛋白对比，可以确定目的蛋白的大小。

荧光标记物则是利用荧光染料或蛋白质自身的荧光性质，在目标蛋白质上引入荧光标记，以便于观察和追踪目标蛋白质的位置和动态变化。例如，彩虹蛋白标记法是一种用于细胞成像和蛋白质定位研究的先进技术，通过将不同颜色的荧光蛋白标记到不同的蛋白质上，从而实现在单个细胞中同时观察多种蛋白质的定位和相互作用。

总之，蛋白质marker的原理是通过特定的方法将标记物引入到目标蛋白质上，从而实现对蛋白质的标记、追踪和检测。这些技术在生物学研究中具有广泛的应用价值，有助于深入了解蛋白质的功能、相互作用和表达调控等方面的问题。

Western-Blot

Western blot相关试剂

哺乳动物蛋白抽提试剂盒：购于北京康为世纪生物科技有限公司（Cat. No. CW0089），蛋白酶抑制剂混合物-20 ℃保存，其他组分室温保存。

BCA蛋白定量试剂盒：购于北京康为世纪生物科技有限公司（Cat. No. CW0014），BSA标准品4 ℃保存，其他组分室温保存。

2×还原型SDS-PAGE上样缓冲液：购于北京康为世纪生物科技有限公司（Cat. No. CW2339），-20 ℃保存。

丙稀酰胺(Acrylamide, Acr)：购于Amresco，室温保存。

30%丙烯酰胺溶液：将0.88 g甲叉双丙稀酰胺和29.28 g丙烯酰胺溶解在超纯水中并定容至100 ml，滤纸过滤，4 ℃避光保存。

1.5 mol/L Tris-HCl 分离胶缓冲液(pH＝8.8)：将18.17 g Tris溶解在超纯水中并定容至100 ml，浓盐酸调pH至8.8，4℃保存。

1.0 mol/L Tris-HCl 浓缩胶缓冲液(pH＝6.8)：将1

2.11 g Tris溶解在超纯水中并定容至100 ml，浓盐酸调pH至6.8，4℃保存。

十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate, SDS)：购于Sigma，室温保存。

10% SDS溶液：称取10 g十二烷基硫酸钠溶解在超纯水中并定容至100 ml，室温保存。

过硫酸铵(Ammonium persulfate, APS)：购于Sigma，室温保存。

10% APS溶液：称取0.1 g过硫酸铵溶解在l ml超纯水中，临用现配。

换个姿势了解蛋白质Marker！

蛋白分子量标准，常称之为蛋白Marker。在免疫印迹（Western blot）试验中，分子量Marker虽不起眼，但意义重大，是阳性对照，是大小的标准，是必须的。只有Marker精确无误了，实验结果才有说服力。除此之外，蛋白Marker还能够提示电泳是否正常，转移是否成功等信息。

在实验中经常会说“跑”电泳

我们可以用

“团队障碍跑”

来描述蛋白质在凝胶中的运动

体型大的阻碍大，跑的慢

体型小的阻碍小，跑的快

对于未知蛋白组

我们可以根据它的停止时位置

分析和区分其中蛋白质的大小

这就要求我们设置一个特殊的赛道

“Marker组”

让具有指示性的蛋白质组（Marker）一起移动

在相同的时间内

与蛋白质“裁判”跑一样距离的

其分子大小也是一致的

Marker组的分子大小我们是知道的

就可以根据目的蛋白的大小进行筛选

再对目的蛋白进行后期的分离与检测

蛋白质电泳示意图

蛋白Marker可分为两大类：

1、未预染的Marker

按照包含的蛋白质分子量大小来区分，又可以分为：宽分子量蛋白Marker、高分子量蛋白Marker以及低分子量蛋白Marker

2、预染的Marker

按照染料颜色的多少可以分为：单色预染和多色预染。

【未预染的Marker】

这是最简单，也是最准确的一种。由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小所必须的。

1、宽分子量蛋白Marker

如果从实验室总体考虑的，就选范围尽量宽，条带分布比较均匀

的，这样你的蛋白无论在哪个区间都容易判断，避免落在一段空白区域中。

蛋白质marker

●使用方法
1. 首先按以下方法配制“稀释液”。
1 M DTT 5×Loading Buffer
* 稀释液可于室温下放置一个月左右。
2 μl 20 μl
2. 按以下方法稀释本制品。
Protein MW Marker（Low）稀释液灭菌蒸馏水
5 μl 22 μl 73 μl
* 20 倍的制品稀释液可在-20℃下保存 2～3 个月，但应避免多次反复冻融。如果一次稀释量较多时，可以小量分装后在-20℃下保存，以避免反复冻融。
●浓度：12 μg/μl
●制品内容（约 200 次量）
Protein MW Marker（Low） 5×Loading Buffer 1 M DTT（Dithiothreitol）
50 μl 300 μl
30 μl
●制品说明
Protein Molecular Weight Marker（Low）是由六种纯化好的不同分子量的蛋白质组成的，它的分子量范围为：14.3 KDa～97.2 KDa。进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，经考马斯亮蓝 R－250 染色后的各种蛋白质的条带强度均一。每微升本制品的蛋白量为 12 μg，稀释 20 倍后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，每次取 5 μl（for SDS-PAGE mini gel）。以每次使用 5 μl（20 倍稀释液）计算时本制品约可使用 200 次。

WesternBlotMarker使用说明

Western Blot Marker使用说明

货号：PR1800

规格：10T(50μl)/20T(100μl)

保存：-20℃可保存2年。避免反复冻融，建议分装保存。

产品简介:

Western Blot Marker是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。传统的Western Blot 试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。但预染蛋白Marker用在Western Blot 试验中有三大缺点：（1）预染蛋白Marker无法在胶片上曝光，曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断，因此后续的图片需要拼接才能两者合而为一；（2）预染蛋白Marker都经过化学修饰，经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE电泳过程中迁移率发生改变，分子量信息不再准确，往往导致Western Blot结果判断出现较大偏差；（3）预染蛋白Marker 无法检测作为杂交过程的阳性对照。Western Blot Marker由7种不同分子量的蛋白组成（19、20、35、45、60、65、110KDa），其中19、45、65KDa条带为蓝色预染marker，其它四个条带都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合。Western Blot Marker可以直接结合二抗，或通过结合一抗间接结合二抗，因此蛋白Marker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号，阳性信号可以直接通过Western Blot Marker的位置来判断。另外，预染发光Western Blot Marker还可作为Western Blot试验的阳性对照。

预染蛋白marker的说明书26616

PRODUCT INFORMATION

Thermo Scientific

PageRuler Prestained Protein Ladder #26616 2 x 250 µl

Lot: XXXXXXXX Expiry Date: __

WARNING! HARMFUL IF INHALED OR ABSORBED

THROUGH SKIN. CAUSES RESPIRATORY TRACT, EYE

AND SKIN IRRITATION. MAY CAUSE ALLERGIC SKIN REACTION. MAY BE HARMFUL IF SWALLOWED.

CONTAINS MATERIAL WHICH CAUSES DAMAGE TO THE FOLLOWING ORGANS: KIDNEYS, LUNGS, UPPER RESPIRATORY TRACT, SKIN, EYES. CONTAINS MATERIAL

WHICH MAY CAUSE DAMAGE TO THE FOLLOWING

ORGANS: LIVER, GASTROINTESTINAL TRACT.

Avoid exposure - obtain special instructions before use. Do

not breathe vapor or mist. Do not ingest. Do not get in eyes

or on skin or clothing. Use only with adequate ventilation. Keep container tightly closed and sealed until ready for use. Wash thoroughly after handling. Refer to MSDS.|

预染蛋白marker的说明书

Thermo Scientific PageRuler Pierce 26616 Fermentas SM0671预染蛋白 Marker/Ladder Westernblot 实验

北京代理Thermo 26616（SM0671）Fermentas 预染蛋白Marker/Ladder

26616 marker

Fermentas是一家经过ISO9002认证的来自立陶宛的生物技术公司，是世界第二大工具酶和分子生物学试剂盒生产商。该公司现在以Fermentas替代原有的MBI Fermentas商标生产和出售分子生物学产品，通过其全球分销商网络推销其产品。该公司产品包括限制性内切酶、DNA甲基化转移酶、DNA/RNA修饰酶、PCR 产品、核酸Markers等。

PageRuler 预染蛋白Ladder

Thermo Scientific PageRuler 预染Ladder 是一种由10 个蓝染、橙染和绿染的重组蛋白 (10 - 170kDa) 组成的混合物，在SDS-PAGE( 蛋白电泳) 和Western blotting 中作为测定分子量大小的标准品使用。

该预染蛋白分子量marker 旨在监测SDS-PAGE 电泳进程，评估转移到PVDF、尼龙和硝酸纤维素膜上的转移率，并在凝胶染色或使用Western blot 检测试剂后估算可见的分离蛋白的大致分子量。该蛋白Ladder 包含一个70kDa 的橙色参考条带和一个10kDa 的绿色参考条带。

产品特点:

•分子量范围– 10 种蛋白分子量范围在10 到170kDa 之间

蛋白电泳预制胶（HEPES Tris-Glycine）说明书

蛋白电泳预制胶（HEPES/Tris-Glycine）说明书

【产品名称】

蛋白电泳预制胶（HEPES/Tris-Glycine）

【产品介绍】

四正柏提供HEPES和Tris-Glycine两种凝胶体系的蛋白电泳预制胶，常用于PAGE和Western Blot检测。

采用自动化的灌胶生产技术，确保了产品质量的高稳定性和重复性

采用玻璃胶板，有效减少蛋白非特异性吸附，使蛋白条带更为尖锐，清晰

胶夹打开极为轻松，只需用刀片在胶夹一侧轻轻一划即可打开

凝胶中不含SDS,可用于变性和非变性电泳

兼容市场上主流的mini电泳槽，如BIORAD,Invitrogen,天能和君意东方等

提供多种浓度的均一胶和梯度胶

均一胶可选浓度：6%，7.5%，8%，10%，12%，15%

梯度胶可选浓度：4-12%，4-15%，4-20%，8-16%，8-20%

【基本信息】

预制胶板尺寸：长98mm，宽84mm，厚度4.1mm

预制胶尺寸：长81mm，宽74mm，厚度1.5mm

浓缩胶：4%，1.5cm

丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺的比例：29:1

包装规格：10片/盒

【储存条件及有效期】

1.HEPES体系预制胶2~8℃冷藏，不可冷冻，保质期18个月

2.Tris-Glycine体系预制胶2~8℃冷藏，不可冷冻，保质期12个月

3.常温运输

4.冬季，泡沫盒保温运输

【HEPES和Tris-Glycine两种体系蛋白电泳预制胶比较】

参数Hepes-Tris体系预制胶Tris-Glycine体系预制胶

分辨率高中等

电压及电泳时间150V，40-50min180V，60min

#SM0431 Unstained Protein Molecular Weight Marker-1

* 也可使用 4X DualColor™ Protein Buffer Loading Pack (#R1011)。缓冲液和水的体积需相应调整。观察预染的蛋白 Ladders/markers 无需再次染色。如需观察未预染的蛋白 Ladders/markers ，可用 PageBlue™ Protein Staining Solution (#R0571) 、 PageSilver™ Silver Staining Kit (#K0681)或其它蛋白染色技术染色凝胶。
组配制胶装置，在两块玻璃板(边缘)之间加入间隔物，形成三明治形式。按上述方法制备分离胶溶液。最后加入 APS 和 TEMED，小心混匀避免产生气泡。重要提示：混合物中加入 APS 后，聚合反应立即开始，后续操作须立即执行。用枪头小心将凝胶溶液注入两块玻璃板之间的空隙。留出大约 1/4 的空间(制备浓缩胶用)。小心在分离胶顶部覆盖 50%异丙醇、0.1% SDS 溶液或水，静置约 30 分钟使分离胶聚合。当聚合反应完成后，分离胶和覆盖的溶液之间会产生清晰线条。
5. 6. 7. 8. 9.
除去水、异丙醇或 SDS 溶液，轻轻用双蒸水洗涤。用枪头小心加入浓缩胶溶液(按上述方法准备浓缩胶，最后加入 APS 和 TEMED)，避免产生气泡。重要提示：混合物中加入 APS 后，聚合反应立即开始，后续操作须立即执行。插入梳子，静置凝胶聚合至少 60 分钟。小心除去梳子。将凝胶放入电泳槽中。电泳槽底部和顶部的溶液池中倒入新鲜配制的 1X Tris-glycine-SDS 缓冲液。确保缓冲液完全覆盖凝胶点样孔。上样。