检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
高中生物知识点：实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
⾼中⽣物知识点：实验：检测⽣物组织中的糖类、脂肪和蛋⽩质 ⽣物组织中糖类、脂肪和蛋⽩质的检测⽅法： 1、检测原理: ⽣物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产⽣特定的颜⾊反应。
(1)糖类 (2)脂肪 (3)蛋⽩质 2、检测步骤 (1)还原糖的检测与观察: (2)脂肪的检测: (3)蛋⽩质的检测: (4)淀粉的检测与观察: 斐林试剂与双缩脲试剂的⽐较： 斐林试剂双缩脲试剂 鉴定成分还原糖蛋⽩质 鉴定原理还原糖中的醛基（-CHO）在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+，从⽽⽣成砖红⾊的Cu.0沉淀双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性溶液中能与Cuz+结合⽣成紫⾊络合物，蛋⽩质分⼦中含有与双缩脲结构相似的肽键 试剂浓度甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；⼄液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 使⽤⽅法甲液、⼄液混合均匀后，再加⼊样液先加A液造成碱性环境，再滴加B液 使⽤条件加热不加热 实验现象浅蓝⾊⼀棕⾊—砖红⾊紫⾊ 知识点拨： (1)在还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含还原糖量较⾼的⽣物组织（或器官），⽽且组织颜⾊较浅，或近于⽩⾊的苹果、梨等材料。
另外，由于⽢蔗、甜菜中含有的蔗糖是⾮还原糖，不宜选⽤。
(2)在脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选择富含脂肪的种⼦。
(3)在蛋⽩质的鉴定实验中，最好选⽤富含蛋⽩质的⽣物组织，植物材料常⽤的是⼤⾖，动物材料常⽤的是稀释的鸡蛋清。
注意事项： 还原糖的检测和观察： ①还原糖有葡萄糖，果糖，麦芽糖； ②甲⼄液必须等量混合均匀后再加⼊样液中，现配现⽤； ③必须⽤⽔浴加热 脂肪的鉴定： ①切⽚要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地⽅清晰，有的地⽅模糊。
②酒精的作⽤是：洗去浮⾊ ③需使⽤显微镜观察 ④使⽤不同的染⾊剂染⾊时间不同 蛋⽩质的鉴定： ①先加A液1ml，再加B液4滴 ②鉴定前，留出⼀部分组织样液，以便对⽐。
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法糖类的检测方法：1.放射免疫法：利用放射性同位素标记的抗体或反应物与目标糖类结合，通过测量放射同位素的放射性强度来定量糖类。
2.高效液相色谱法：利用高效液相色谱仪将样品中的糖类分离，并通过检测器测定糖类的浓度。
3.还原糖法：通过还原糖的特性，将还原糖与试剂反应生成有色化合物，通过测量其吸光度来定量糖类的浓度。
4.酶法：利用具有特异性的酶针对特定的糖类进行酶解反应，生成可测定的产物，通过检测产物的浓度来定量糖类。
脂肪的检测方法：1.水解法：将样品中的脂肪水解为脂肪酸和甘油，再通过酶法或化学法测定脂肪酸或甘油的浓度。
2.胆固醇氧化酶法：利用脂肪样品中的胆固醇通过酶催化反应生成可测定的产物，通过测量产物的浓度来定量脂肪。
3.紫外吸收法：利用脂肪样品中的化学结构特性，通过紫外光谱测量脂肪的吸光度来定量脂肪的含量。
4.气相色谱法：通过气相色谱仪将样品中的脂肪分离，并通过检测器测定脂肪的浓度。
蛋白质的检测方法：1.低里氏法：利用低里氏试剂与蛋白质发生反应，形成可测定的复合物，通过测量复合物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
2.高效液相色谱法：利用高效液相色谱仪将样品中的蛋白质分离，并通过检测器测定蛋白质的浓度。
3.毛细管电泳法：将样品中的蛋白质在电场作用下在毛细管中分离，根据蛋白质的电荷、大小和形状的差异来测定蛋白质的浓度。
4.射流显色法：利用射流试剂将蛋白质样品中的蛋白胺基酸与试剂反应生成有色产物，通过测量产物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
需要注意的是，以上方法中的每一种都有其适用范围和局限性，具体选择方法时需根据实验要求、样本特性和实验设备等因素进行合理选择。
此外，还可结合多种方法进行确认和校准以提高检测结果的准确性和可靠性。
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质引言生物组织是多种不同类型细胞的集合体，其中包含着大量的糖类脂肪和蛋白质。
这些生物分子在细胞的正常功能以及许多疾病的发生和发展中起着重要的作用。
因此，准确、可靠地检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质是科学研究和医学诊断的关键。
检测方法糖类的检测糖类是生物组织中常见的一类生物分子，包括单糖、双糖、多糖等多种形式。
常用的糖类检测方法包括：1.纸层析法：将样品和标准溶液分别点于纸层析板上，通过上升色谱将样品中的糖类分离，并通过特定显色剂反应显示糖类的位置和含量。
2.高效液相色谱（HPLC）：通过色谱柱和流动相的相互作用，将混合物中的糖类分离，并通过检测器测量各组分的峰面积或浓度。
3.质谱法：利用质谱仪对样品中的糖类进行离子化和质量分析，根据质谱图谱确定糖类的结构和含量。
脂肪的检测脂肪是生物组织中重要的能量储存物质，包括甘油三酯、磷脂等多种类型。
常用的脂肪检测方法有：1.色谱法：通过将样品中的脂肪分离，并通过色谱柱和检测器测量各组分的峰面积或浓度来定量。
2.光谱法：利用紫外-可见吸收光谱或红外光谱测量样品中脂肪的吸收或振动特征，从而确定脂肪的含量。
3.核磁共振（NMR）：利用核磁共振技术对样品中的脂肪进行分析和定量。
蛋白质的检测蛋白质是生物组织中的重要成分，不仅参与细胞的结构和功能，还承担信号传导、酶催化等多种生物过程。
常用的蛋白质检测方法包括：1.分光光度法：通过测量蛋白质溶液中的吸收或荧光强度来确定蛋白质的含量。
2.凝胶电泳法：将蛋白质溶液分离成不同带电性质的组分，通过电泳进行分离，并通过染色或荧光标记检测蛋白质的位置和含量。
3.质谱法：利用质谱仪对蛋白质进行离子化和质量分析，根据质谱图谱确定蛋白质的结构和含量。
应用检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质在不同领域具有广泛的应用，例如：•医学诊断：通过检测生物组织中特定糖类脂肪和蛋白质的异常水平，可以帮助医生确定特定疾病的诊断和治疗方案。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
浅蓝色
棕色
砖红色
注意事项: 1：选材：还原糖含量高、组织颜色较浅或近 于白色的植物。
2：斐林试剂现用现配,甲液和乙液等量混合均 匀后加入
鉴定可溶性还原糖的实验材料
为什么不用植物的叶或西瓜与西红柿的果实？
由于叶片中叶绿素的颜色较深，西瓜与西 红柿的果实颜色为红色，对于鉴定时的颜色反 应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此， 也不宜作实验材料。
色1分钟） 去浮色： 用体积分数为50%的酒精溶液试剂1-2滴去薄片上
的浮色 制临时装片 滴一滴蒸馏水盖上盖玻片，制成临时装片
镜检： 先低倍镜再转高倍镜 视野中有橘黄色(红色）颗粒
注意事项：
1、选用富含脂肪的种子，种子必须提前浸泡 3-4小时
2、染色后，一定要用体积分数50%的酒精洗 去浮色
淀粉（多糖）的鉴定
本实验最理想的实验材料是含糖量较高 的生物组织（或器官）,而且组织的颜色较浅， 或近于白色的，如苹果和梨的果实。经试验 比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、 白色甘蓝叶、白萝卜。
蛋白质的鉴定
检测原理：蛋白质+双缩脲试剂---紫色
试剂：双缩脲试剂（A液和B液）。
A液：0.1g/ml NaOH溶液 ；B液：0.01g/ml CuSO4溶
不需加热，摇匀即可 样液变紫色
脂肪的鉴定
检测原理：脂肪+苏丹III染液---------橘黄色 脂肪+苏丹IV染液----------红色
试剂：苏丹III试剂或苏丹Ⅳ试剂 实验步骤： 选材： 经浸泡的去皮的花生种子
切片: 选取最薄的几片切片置于洁净载玻片中央 染色: 滴苏丹III试剂2-3滴，染色3分钟(如用苏丹Ⅳ染液，染
淀粉 + 碘→蓝色
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质
要检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，可以使用以下
几种常见的实验方法：
1. 糖类检测：
- 阳离子交换色谱法（Ion exchange chromatography）：根据糖类的荷电性质，在具有阳离子交换基团的色谱柱上
进行分离和测定。
- 蒽酮法（Anthrone method）：利用蒽酮与糖类形成彩
色产物，测定其吸光度，从而定量分析糖类含量。
2. 脂肪检测：
- 总脂肪测定法（Total lipid assay）：通过提取组织样品
中的脂肪，使用溶剂进行提取，然后通过酶解、酶判定、
光度法或色谱法测定脂肪含量。
- 中性脂肪测定法（Neutral lipid assay）：使用溶剂提取组织中的中性脂肪，然后使用酶判定、高效液相色谱法等进行测定。
3. 蛋白质检测：
- 比色法：如布拉德福酮碱试剂法（Bradford assay）、双酮化合物法（Biuret method）等，根据蛋白质与特定试剂形成复合物，通过光吸收法或比色法测定颜色变化，从而定量分析蛋白质含量。
- 生物素-链霉亲和素（Biotin-streptavidin assay）：通过生物素与链霉亲和素的特异性结合，配合荧光标记物或酶标记物，测定蛋白质含量。
总的来说，具体的方法选择要根据实验目的、仪器设备和实验条件来决定。
另外，还可以结合一些生物学技术，如免疫印迹法、质谱分析和核磁共振等，对糖类、脂肪和蛋白质进行定量和定性分析。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点三 （实验）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（5年6考）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测：脂肪＋⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测：蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精，故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验，若需进一步设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理，2 min后试管内将呈现何种颜色？试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂，经加热若出现砖红色沉淀，则表明试管内含有葡萄糖，对吗？提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色，因未经水浴加热，只有将试管置于50～65 ℃温水中，经水浴加热后，方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”，不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案，请推测：(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质，其中“某试剂”是什么？A液、B液分别指什么？(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色？提示(1)蛋白质及多肽化合物；双缩脲试剂；A为0.1 g/mL NaOH溶液；B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷，15)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液不会产生蓝色；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
2.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
则不需要加热。 (4)现象不同：斐林试剂检测还原糖，产生砖红色沉
淀，双缩脲试剂检测蛋白质，产生紫色物质。
[高考实验对接]
（ⅰ）
（ⅱ） （ⅲ）
【模板应用分析】
实验材料选择：与教材 试验不同，但都是富含 目的有机物且白色或无 色的生物材料，与教材 实验要求相同。
[多维思考]
（1）如果本实验要检测脂肪，应该怎么做？ 提示：可将腐乳制成腐乳组织液，加入苏丹Ⅲ或 Ⅳ染液，观察组织液颜色变化。
（2）如果本实验出现了腐乳腐败现象，可能是由 于什么原因？ 提示：可能的原因是在制作腐乳过程中，无菌操 作出现失误，造成杂菌污染所致。
实验试剂的选择： 蛋白质与双缩脲试 剂反应，与教材实 验要求相同。
实验变量分析：是 对教材实验的拓展。 ①②③组的单一变 量是处理时间，③ ④组的单一变量是 温度
使酶失活 浅
蛋白酶
不变
【模板应用分析】
浅
（ⅴ）
氨基 转换
实验结果： 生物材料中 的目的有机 物含量越多， 颜色越深， 否则越浅。
糖类和脂质
一、实验原理
某些化学试剂能够使生物组织中的相关有机化合物 产生特定的颜色反应。
(1)还原糖＋ 斐林试剂 50℃～65℃温水浴砖红色
沉淀。
苏丹Ⅲ染液 →橘Байду номын сангаас色
(2)脂肪＋
苏丹Ⅳ染液 →红色 (3)蛋白质＋ 双缩脲试剂 →紫色。 (4)淀粉＋ 碘液 →蓝色。
二、实验步骤
1.还原糖的检测： 选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
↓ 制备组织样液
↓ 显色反应：
制浆
检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]
![检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]](https://img.taocdn.com/s3/m/aef6ef3517fc700abb68a98271fe910ef02dae55.png)
检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]
1. 糖类检测：可以采用苏丹红反应法和不定量蓝色磷钼酸法。
苏丹红反应法基于苏丹红与糖类产生的红色复合物，颜色深浅程度可以反映糖类的含量；不定量蓝色磷钼酸法则是利用蓝色磷钼酸与糖类生成蓝色复合物，再根据颜色深浅程度进行糖含量的定量。
2. 脂肪检测：可以采用苏丹三染色法和乙醇提取法。
苏丹三染色法是将组织切片染色，然后进行显微镜观察，染色深的部位表示脂肪含量高；乙醇提取法是用乙醇将脂肪溶解，然后通过温度恒定、有机溶剂飘移法进行脂肪量的测定。
3. 蛋白质检测：可以采用比色法和光度法。
比色法根据蛋白质与某种化学试剂生成的色素深度，来反映蛋白质的含量；光度法则是利用蛋白质与特定光源产生的光学反应，通过光密度来测定蛋白质含量。
需要注意的是，具体选择哪种检测方法要根据样本的类型和检测的目的确定。
同时，检测前要进行适当的样本处理和前处理，以保证检测的准确性和重复性。
检测生物组织中的糖类
加热检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀。
②脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒。
③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应。
1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。
如： 葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O ，即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O ，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。
淀粉遇碘变蓝色。
3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。
（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用，产生紫色反应。
） 三．实验材料1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。
（因为组织的颜色较浅，易于观察。
）2．做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。
3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
四、实验试剂 斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO 4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A 液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液和B 液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO 4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。
五、方法步骤：（一）可溶性糖的鉴定（二）脂肪的鉴定1、斐林试剂和双缩脲试剂的比较相同点：①都由___________溶液和___________溶液构成；②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为_______________溶液。
不同点：①CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为__________CuSO4溶液，双缩脲试剂B为______________CuSO4溶液。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（或红色） ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象：①还原性糖鉴定：取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀） ②淀粉鉴定：取材→制备组织样液（马铃薯匀浆）→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定：方法一：取材与制备组织样液（花生种子匀浆）→滴加苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）→摇匀后变成橘黄色（红色） 方法二：取材、切片、制片：花生种子浸泡，将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→用50%酒精洗去浮色→镜检（看到橘黄色或红色的脂肪颗粒）④蛋白质鉴定：取材→制备组织样液（豆浆或蛋清稀释液）→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色（紫色）3.实验注意事项：（1）从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法：设法使细胞破碎（如研磨、挤压或切割等），再将这些物质提取出来。
（2）禾谷类的果实、种子中含淀粉较多；甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多；花生、芝麻的种子中含脂质较多；大豆种子中含蛋白质较多。
（3）显色反应材料选择时要注意：①材料本身应浅色，以免对实验结果的观察产生干扰； ②材料应含有丰富的相关物质，使现象更显著。
（4）还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。
②实验材料要选含还原性糖量高，白色或近于白色的组织，如苹果和梨的匀浆。
③不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。
④马铃薯含淀粉较多，也不能作为该实验材料。
⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰，也不能作为该实验材料。
⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液，不稳定，如果长时间放置，Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀，不易和还原糖发生反应。
专题03检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点03检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1．实验原理2．实验步骤考向一糖类、脂肪和蛋白质的检测原理与操作典例1：1．关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验，下列叙述正确的是A．还原糖、脂肪的鉴定通常分别使用双缩脲试剂、重铬酸钾试剂B．鉴定还原糖、蛋白质都需要进行水浴加热C．用于配制斐林试剂的NaOH溶液是无色的D．脂肪、蛋白质鉴定时分别可见橘黄色颗粒、砖红色沉淀【参考答案】C技法提炼利用“一同三不同”区分斐林试剂与双缩脲试剂：“一同”是指都含有NaOH和CuSO4两种成分，且NaOH溶液的质量浓度都为0.1 g/mL。
“三不同”分别指：（1）使用原理不同。
斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液，双缩脲试剂的实质是碱性环境中的Cu2＋。
（2）使用方法不同。
鉴定还原糖时将甲、乙两液等量混匀后立即使用；鉴定蛋白质时先加A液1 mL摇匀，然后加B液4滴，振荡摇匀。
（3）CuSO4溶液的浓度不同。
斐林试剂中CuSO4溶液的质量浓度为变式1：2．生物组织中有机物的鉴定实验中，下列对实验材料的选择错误的是A．大豆种子——蛋白质鉴定B．花生种子——油脂鉴定C．甘蔗——还原糖鉴定D．白面馒头——淀粉鉴定【答案】C【解析】生物组织中有机物的鉴定实验，在选择实验材料上，要求含有的所鉴定的有机物尽可能丰富且自身为白色或近于白色。
大豆种子富含蛋白质且为白色，可作为鉴定蛋白质的材料，A正确；花生种子中富含脂肪，可作为油脂的鉴定材料，B正确；甘蔗中富含蔗糖，蔗糖不是还原糖，不能作为还原糖的鉴定材料，C错误；白面馒头中富含淀粉且近于白色，可作为淀粉鉴定的实验材料，D正确。
考向二有机物检测的实验设计与实验分析典例2：3．请分析关于食品检验的设计，正确的是A ．AB ．BC ．CD ．D【参考答案】D变式2：4．用碘液、苏丹III 染液和双缩脲试剂测得甲、乙、丙三种植物的干种子中三大类有机物的颜色反应如下表，其中“+”的数量代表颜色反应深浅程度，下列有关说法不正确的是A ．乙种子中主要含蛋白质B ．苏丹III 染液和双缩脲试剂与相应物质发生的颜色反应分别是橘黄色和紫色C ．在观察颜色时有可能用到光学显微镜规律总结三类有机物检测在操作步骤上的差异（1）唯一需要加热——还原糖检测，必须水浴加热，不能用酒精灯直接加热。
高中生物考点03 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
03 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质高考频度：★★☆☆☆难易程度：★★☆☆☆考点一：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1．实验成功关键点——实验材料的选择、处理、染色(1)还原糖的检测要选择可溶性还原糖含量高、组织颜色较浅或近于白色的植物，如苹果、梨、白萝卜。
(2)脂肪的检测①所用材料最好是富含脂肪的种子，如花生种子。
②染色后，一定要用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色。
(3)蛋白质的检测富含蛋白质的生物组织(或器官)，如大豆、鸡蛋。
如用大豆可直接用豆浆做实验材料；如用鸡蛋要用蛋清，并注意稀释，一般稀释10倍以上。
2．还原糖、脂肪、蛋白质三类有机物检测在操作步骤上的“三个唯一”(1)唯一需要加热——还原糖检测，且必须水浴加热(50～60 ℃，温水浴)，不能用酒精灯直接加热。
若不加热，则无砖红色沉淀出现。
(2)唯一需要显微镜——脂肪检测。
(3)唯一使用酒精——脂肪的鉴定实验用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
3．试剂用量：鉴定蛋白质时，如待测组织样液为2 mL，则A液为1 mL，B液为4滴。
注意B液用量不能过量，否则会与A液产生蓝色Cu(OH)2沉淀，干扰实验的紫色现象。
考向一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1．下列有机物的鉴定实验中，导致实验失败的操作是A．鉴定淀粉时，直接把碘液加入到淀粉样液中B．鉴定脂肪时，在花生种子匀浆中滴加染液后，直接进行观察C．鉴定还原糖时，60 ℃水浴加热D．鉴定蛋白质时，把A、B液混合后再加入蛋白质样液中【答案】D【解析】淀粉的鉴定要用碘液,不需要加热,可直接将碘液滴加到淀粉样液中,不符合题意;向花生种子匀浆中滴加苏丹苏丹Ⅳ染液,直接通过肉眼即可观察颜色变化,B不符合题意;用林试剂鉴定还原糖时,应该用60℃水浴加热,C不符合题意;蛋白质鉴定时,应先加A液,再滴加B液,若将A、B液混合后再加入蛋白质样液中,A液和B液会发生反应,这样就不会与蛋白质发生紫色反应,导致实验失败,D符合题意。
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实验二、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、学习目标1.学会使用试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的方法。
2.掌握根据实验的需要正确选择实验材料的能力。
3.尝试使用斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、碘液检测食物中的糖类、脂肪和蛋白质。
4.提高实验及动手操作能力，体会实验设计的基本思想。
二、观察与思考（一）提出问题豆浆中有蛋白质吗？苹果中有葡萄糖吗？花生中有脂肪吗？我们怎么知道燕麦中含有淀粉呢？（二）猜想与假设提示：不同的化合物可以用不同的试剂来检测。
（三）交流讨论三、实验解析（一）实验原理生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。
还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O（砖红色）；具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物（紫色）。
2.脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色3.蛋白质+双缩脲试剂→紫色（二）主要实验材料：1.苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子、花生种子匀浆，豆浆，鲜肝提取液2. 斐林试剂（甲液：质量浓度为0.1g/ml的NAOH溶液，乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液），苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂（A液：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，B液：0.01g/ml 的CuSO4溶液），体积分数为50%的酒精溶液，碘液，蒸馏水。
（三）方法与步骤：1.还原糖的检测和观察注：溶液颜色的变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色2.脂肪的检测和观察3.蛋白质的检测和观察（四）注意事项1.使用斐林试剂时要现用现配，以免放置过久产生Cu(OH)2沉淀影响实验效果；试管要用水浴加热，不能直接接触酒精灯。
2.使用双缩脲试剂时要先加入NaOH创设碱性环境，然后再加入CuSO4。
3.实验不宜选择有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。
（五）实验变量分析在本实验中，组织样液的新鲜程度和初始颜色、试剂的纯度和配制的时间为无关变量，都会影响颜色的变化，从而影响对实验结果的分析判断。
四、实验结论与分析（一）实验结果与预测结果的比较需鉴定的有机物用于鉴定的试剂预期实验现象实际观察到的现象误差分析还原糖蛋白质淀粉脂肪（二）在本次实验中你遇到了那些问题？你是怎样解决的？五、例题分析：香蕉果实成熟过程中，果实中的贮藏物不断代谢转化，香蕉逐渐变甜。
图A中ⅠⅡ两条曲线分别表示香蕉果实成熟过程中两种物质含量的变化趋势。
请回答：取成熟到第X天和第Y天的等量香蕉果肉，分别加等量的蒸馏水制成提取液。
然后在a、b试管中各加5ml第X天的提取液，在c、d试管中各加5ml第Y天的提取液，如图B。
（1）在a、c试管中各加入等量碘液后，a试管呈蓝色，与a管相比c管的颜色更，两管中被检测的物质是，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是。
（2）在b、d试管中各加入等量斐林试剂，b试管呈砖红色，与b管相比d管的颜色更，两管中被检测的物质是，图A中表示这种物质含量变化趋势的曲线是。
（3）已知乙烯利能增加细胞内乙烯的含量。
如果在第X天喷施乙烯利，从第X天开始曲线Ⅰ将呈现出 (加快、减慢)下降的趋势，曲线Ⅱ将呈现出（加快、减慢）上升趋势。
【解析】本题考查的是果实成熟过程中淀粉和还原糖含量的变化，分别用碘液和斐林试剂来检测，由于在此过程中淀粉逐渐被分解为还原糖，所以随着成熟时间的延长，淀粉减少，加入碘液后出现的蓝色变浅，而加入斐林试剂后，砖红色加深。
【答案】（1）浅淀粉 I （2）（2）深还原糖Ⅱ（3）加快加快六、知识反馈（一）同步练习1.实验原理（1）还原糖能与试剂在条件下发生作用，生成沉淀。
（2）脂肪可以被染成色或被染成色。
（3）蛋白质与发生作用可以生成。
2. 实验材料的选择(1)还原糖的鉴定实验中，理想的实验材料是，因为。
(2)脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选。
(3)蛋白质的鉴定实验中，最好选用，如。
3. 注意事项（1）斐林试剂要现用现配，甲液和乙液后方可使用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。
（2）蛋白质的鉴定中先加，再加。
（二）检测过关１.使用斐林试剂检验还原性糖的正确顺序是（）①制组织样液②加入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液③加入0.01g/ml CuSO4溶液④加入0.05g/ml CuSO4 溶液⑤水浴2 分钟⑥出现砖红色沉淀A.①→②→③→⑤→⑥B.①→（②+③）→⑤→⑥C.①→②→④→⑤→⑥D.①→（②+④）→⑤→⑥２.用斐林试剂鉴定可溶性还原性糖时，溶液的颜色变化过程为（）A.浅蓝色→棕色→砖红色B.无色→浅蓝色→棕色C.砖红色→浅蓝色→棕色D.棕色→绿色→无色３.有关斐林试剂和双缩脲试剂的说法正确的是（）A.两者的NaOH浓度相同B.两者的CuSO4浓度相同C.实验时只能采用课本中给定的浓度D.用两者鉴定物质时都不需要加热４.在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，下列有关实验操作步骤的叙述中，正确的是（）A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定B.脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液和B液要混和均匀后，再加入含样品的试管，且必须现用现配５.下列能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀的是（）①葡萄糖②果糖③蔗糖④麦芽糖⑤淀粉⑥纤维素A．①②⑤ B．②③④ C．①⑤⑥ D．①②④６.根据“检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的检测”实验，回答下列问题：（1）检测成熟苹果肉中存在还原性糖所用的试剂是，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病病人尿液中是否存在。
（2）检测花生子叶细胞中脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染液是，用其染色时，要用酒精来冲洗浮色，这是因为。
（3）检测黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂1mlA摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。
其中双缩脲试剂B的量只有4滴，而不能过量，为什么？。
（4）本实验注意事项：①斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需，使用时再临时混合均匀用于实验。
②双缩脲试剂的使用，应先加试剂，造成碱性环境，再加试剂。
③在还原糖的检测中，对试管中溶液加热时，试管底部不要触及，试管口不要朝向，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。
④蛋白质的检测样品液浓度不能，以免实验后粘住试管壁，洗不净。
七、高考链接（一）高考导航本实验是本册教材中的一个验证型实验，在高考中主要侧重考查学生对斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、碘液四种试剂的使用方法以及相应的颜色变化，并由此来分析判断被测样品中是否含有还原糖、脂肪、蛋白质、淀粉，例如2011年新课标卷的选择题考查的是脂肪和葡萄糖的鉴定方法。
在高考试题的简答题中，该实验通常不独立成题，而是作为检测生物体在生理活动中还原糖、淀粉等物质的含量变化的手段，例如在2005年和2007年的全国II卷出现的用斐林试剂和碘液检测果实成熟过程中还原糖和淀粉含量的变化；2009年全国II卷用碘液来检测筛选高效分解淀粉的突变菌株；2010年的广东卷考查的是鉴定蛋白质的方法。
（二）真题解析1.（2009年广东卷）双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于蛋白质有（）A.肽键B.氨基酸C.羧基D.氨基【解析】本题考查对双缩脲试剂能够检测蛋白质的原理，在碱性溶液Na（OH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
【答案】A2.（2008年山东卷）从细胞膜上提取了某种成分，用非酶法处理后，加入双缩脲试剂出现紫色；若加入斐林试剂或班氏试剂并加热，出现砖红色。
该成分是（） A.糖脂 B.磷脂 C.糖蛋白 D.脂蛋白【解析】本题的意图是根据试剂与被检测物质所发生的颜色变化来判断细胞膜的成分，加入双缩脲试剂出现紫色，说明细胞膜中含有蛋白质；加入斐林试剂或班氏试剂并加热，出现砖红色，说明细胞膜中含有还原糖。
【答案】C３. （2011年新课标卷）下表中根据实验目的，所选用的试剂与预期的实验结果正确的是【解析】本题考查学生对试剂的使用能力，其中B和C选项是本节课所学习使用的试剂，检测脂肪用的是苏丹Ⅲ呈橘黄色或苏丹Ⅳ呈红色；检测葡萄糖用斐林试剂呈砖红色沉淀。
【答案】A4. (2010年广东卷)假设你去某饲料研究所进行课外实践活动，需要完成以下任务：（1）选用恰当的试剂检测某样品中是否含有蛋白质。
提供的试剂有：①碘液，②苏丹Ⅲ溶液，③双缩脲试剂，④斐林试剂。
你选用的试剂应该是；蛋白质与相应试剂反应后，显示的颜色应为。
（2）完善以下实验设计并回答问题。
探究A动物蛋白对小鼠生长的影响资料：饲料中的蛋白含量一般低于20 ；普通饲料可维持小鼠正常生长；A动物蛋白有可能用于饲料生产。
一、研究目的：探究A动物蛋白对小鼠生长的影响。
二、饲料：1、基础饲料：基本无蛋白质的饲料；2、普通饲料（含12%植物蛋白）：基础饲料+植物蛋白；3、试验饲料：基础饲料+A动物蛋白。
三、实验分组：实验组号小鼠数量（只）饲料饲养时间（天）1 10 基础饲料212 10 试验饲料1（含6 A动物蛋白）213 10 试验饲料2（含12 A动物蛋白）214 10 试验饲料3（含18 A动物蛋白）215 10 试验饲料4（含24 A动物蛋白）216 10 ⅠⅡ备注：小鼠的性别组成、大小、月龄、喂饲量和饲养环境均相同。
实验方法和检测指标：略①实验组6中，Ⅰ应该为，原因是；Ⅱ应该为，原因是；②要直观和定量地反映小鼠的生长情况，可以测量小鼠的和。
【解析】本题的第一小题考查学生使用试剂检测化合物的能力，要求学生熟练准确地选择适当的试剂检测蛋白质，能够区别碘液、苏丹Ⅲ溶液、双缩脲试剂、斐林试剂所检测的化合物以及所出现的颜色变化，碘液用来检测淀粉呈蓝色；苏丹Ⅲ溶液用来检测脂肪呈橘黄色；双缩脲试剂用来检测蛋白质呈紫色；斐林试剂用来检测还原糖呈砖红色。
【答案】（1）③紫色（2）①普通饲料要排除普通饲料中的植物蛋白对实验结果的影响21 无关变量应该处于相同且适宜的状态②平均体长平均体重（三）高考预测请完成一个验证淀粉酶对淀粉具有分解作用的实验。
（实验材料、用具齐全）（1）取两支试管编号1、2，分别注入2ml可溶性淀粉溶液。
（2）向1号试管内加入2ml ，2号试管内加入2ml蒸馏水，摇匀，并恒温水浴（37℃）10min。
（3）分别向两支试管中各加入2ml刚配制的，混匀，并 2 min，观察溶液的颜色变化。
（4）预测实验结果及结论：（5）实验分析若要验证淀粉酶的化学本质是蛋白质应加入试剂，将出现色。
本实验还可以加入来检测淀粉是否被分解，若实验组与对照组相比蓝色，则说明淀粉酶对淀粉具有分解作用。