检测生物组织中的糖类
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加热
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一.实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀。 ②脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒。 ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应。
1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O 沉淀。如: 葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O ,即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O ,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。 3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的Cu 2+作用,产生紫色反应。) 三.实验材料
1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)
2.做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 四、实验试剂 斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO 4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A 液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH 溶液和B 液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO 4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。 五、方法步骤:
(一)可溶性糖的鉴定
(二)脂肪的鉴定
1、斐林试剂和双缩脲试剂的比较
相同点:
①都由___________溶液和___________溶液构成;
②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为_______________溶液。
不同点:
①CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为__________CuSO4溶液,双缩脲试剂B为______________CuSO4溶液。
②配制比例不一样。
③使用方法不一样:斐林试剂是甲、乙液______________后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入__________试剂摇匀后,再加入试剂_________。
④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是___________,双缩脲试剂鉴定的是______________。
⑤反应本质及颜色反应不一样。
都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同时要求染色时间更短
课后作业:
基础检测
1.可用于鉴定生物组织中还原糖的试剂是()
A.斐林试剂
B.双缩脲试剂
C.苏丹Ⅲ染液
D.苏丹Ⅳ染液
2.下列哪个实验用到显微镜()
A.还原糖的鉴定
B.蛋白质的鉴定
C.脂肪的鉴定
D.淀粉的鉴定
3.下列哪组试剂在使用过程中,必须经过加热()
A.斐林试剂鉴定还原糖的过程中
B.苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时
C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时
D.碘化钾溶液鉴定淀粉时
4.用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液颜色的变化过程为()
A.无色一砖红色(沉淀)
B.浅蓝色一砖红色(沉淀)
C.浅蓝色一蓝色一砖红色(沉淀)
D.浅蓝色一棕色一砖红色(沉淀)
5.用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时,可用来冲洗浮色的药品是()
A.吸水纸
B.H2O
C.50%的酒精
D.无水酒精
6.用斐林试剂鉴定还原糖时,必须注意以下几点:
(1)被鉴定材料应选择含较高,颜色为的植物组织,以为最好。
(2)斐林试剂很不,必须时再配制并立即使用。配制的方法是将4-5滴滴入2m1 中。
(3)鉴定反应必须在中进行。
7.在鉴定花生种子细胞内含脂肪的实验过程中,应先将花生子叶薄片用染色,然后用洗去,再制成最后,镜检结果是.
8.鉴定豆浆中的蛋白质时,应先加入2m1 ,摇荡均匀后,再加入3-4滴,再摇荡均匀后,颜色变化是.
能力素质提高
9.下列物质中,能被苏丹IV染液染成红色的是()
A.马铃薯块茎
B.浸软的蓖麻种子
C.蛋清液
D.苹果
10.下列可用于鉴定脂肪的实验材料是( )
A.苹果
B.梨
C.卵白
D.花生种子
11.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方,叙述不正确的是()
A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液
B.斐林试剂的配制是将4-5滴0.05g/ml的CuSO4溶液滴入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液中即成
C.双缩脲试剂是将3-4滴0.01g/ml的CuSO4溶液滴入2ML0.1g/ml的NaOH 溶
液中混合而成的
D.双缩脲试剂含有两种试剂:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为0.O1g/ml的CuSO4溶液
12.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是( )
A.先加A液,混合后再加B液摇匀观察
B.先加B液,混合后再加A液摇匀观察
C. A、B液混合后加入,摇匀后观察
D. A、B液同时加入样液,摇匀后观察
迁移与扩展
13.与硫酸铜溶液在碱性环境中反应,生成紫色物质的是( )
A.淀粉
B.脂肪
C.蛋白质
D.核酸
14.将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是( )
A.碘液、苏丹Ⅲ溶液
B.双缩脲试剂、碘液
C.亚甲基蓝溶液、苏丹Ⅲ
D.碘液、斐林试剂
15.下列实验中所用试剂错误
..的是()
A.在观察植物细胞有丝分裂实验中,使用醋酸洋红溶液使染色体着色
B.在提取叶绿体色素实验中,使用丙酮提取色素
C.在DNA的粗提取与鉴定实验中,使用氯化钠溶液析出DNA
D.在蛋白质的鉴定实验中,使用苏丹Ⅲ染液鉴定蛋白质