急性白血病免疫分型
白血病免疫分型的诊断标准
9．白血病免疫分型的诊断标准9．1 急性淋巴系白血病（ALL）9．1．1急性B淋巴系白血病（B-ALL）9．1．1．1MIC 标准:B 祖细胞ALL: CD19+,TdT+,CD10-,CIg-.sIg-Common ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg-,sIg-Pre-B- ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg+,sIg-B-ALL : CD19+,TdT-,CD10-,cIg-,sIg+9．1．1．2 欧洲白血免疫学特征研究组标准:Pro-B-ALL: (BⅠ型):CD19+,CD22+Common ALL:(BⅡ型):CD19+,CD22+,CD10+Pre-B-ALL: (BⅢ型):CD19+,CD22+,CyIgM+，成熟B-ALL:(BⅣ型)：CD19+，CD22+，Kappa/Lambda+9．1．2急性T淋巴系白血病（T-ALL）9．1．2．1MIC 标准:T祖细胞型: CD2-T成熟细胞型: CD2+9．1．2．2 Reinheiz 标准:早期胸腺细胞Ⅰ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71+普通胸腺细胞Ⅱ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71-,CD4+,CD8+,CD1+ 胸腺髓质细胞Ⅲ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD3+,CD4+,CD8+,CD1- 9．1．2．3欧洲白血免疫学特征研究组标准:Pro-ALL:(TⅠ型):CD3+,CD7+Pre-T-ALL(TⅡ型):CD3+,CD2+,CD5+,CD8+皮质-T-ALL(TⅢ型):CD3+,CD1a+成熟-T-ALL(TⅣ型):CD3+,CD1a+,anti-TCRα/β+ 或γ/δ+9．3．急性髓性白血病(AML)能亚型常表达抗原M0 CD11b,CD13或CD33M1 CD13 CD15 CD33 CD34 HLA-DRM2 CD11b CD13 CD15 CD33 •CD34 •HLA-•DR •CD56 CD19M3 CD11b CD13 CD15 CD33 CD34M4 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34M5 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34M6 血型糖蛋白A CD13 CD33 CD34M7 CD41 CD61 CD13 CD33 CD34 因子Ⅷ相关抗原10．各型白血病及淋巴瘤免疫分型特点10．1 急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）10．1．1 M0：有低的(Side scatter ,SSC)和Forward scatter（FSC)。
急性白血病免疫学分型
（一）急性淋巴细胞白血病按免疫标志分为非T细胞型和T细胞型。
前者又可分为无标志性急淋（Null-ALL）普通型急淋（Common-ALL）、前B细胞型急淋（Pre-B-ALL）和B细胞型急淋（B－ALL）4个亚型；T细胞型又分为不成熟胸腺细胞型（immature T-ALL），普通的胸腺细胞型（eommon T-ALL）和成熟胸腺细胞型（mature T-ALL）。
见表5－3－1 和表5－3－2. 表5－3－1 急性T淋巴细胞白血病（T－ALL）细胞表型组别免疫亚型表型特征CD7CD5CD2CD1CyCD3SmCD3CD4CD8Ⅰ幼稚胸腺细胞型immature T-ALL+-/+-/+--/+---Ⅱ普通胸腺细胞型common T-ALL+++++-/+++Ⅲ成熟胸腺细胞型 mature T-ALL+++-+/-++/--/+表5－3－2 急性非T淋巴细胞白血病（non-T-ALL）细胞表型组别免疫亚型表型特征HLA-DRCD19CD10CD22CD20CyIgMSmIgⅠ无标志型急淋Null-ALL+-/+-----Ⅱ普通型急淋common-ALL+++-/+-/+--Ⅲ前B细胞型急淋pre-B-ALL++++++-ⅣB细胞型急淋B－ALL＋＋+/-++-+ （二）急性非淋巴细胞白血病应用免疫学标志进行分型尚正在探索中，髓细胞系的免疫膜标志；粒细胞系为过氧化物酶＋、CD34＋、CD13＋；单核细胞系为α－萘酚醋酸酯酶＋，可被氟化钠抑制，CD34＋、CD13＋、CD14＋；红细胞系为血型糖蛋白（Gl ycophorin）及红细胞膜收缩蛋白（Spectrin）＋；巨核细胞系为血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa+、Ⅰb/Ⅲa＋。
急非淋膜标志与FAB分型的关系见表5－3－3. 表5－3－3 急性非淋巴细胞白血病FAB 分型与膜标志抗体M1M2M3M4M5M6M7 HLA－DR++-+++/-+/-CD34++/--+/-+/--+/-CD33+++ +++/-+/-CD13+/-++ + +- CD14-+/--++- CD15-++/-+++/- 血型糖蛋白-----+-Ⅱb/Ⅲa/Ⅰb------+。
流式细胞术系列之-白血病免疫分型
CD13和/或CD33阳性 HLA-DR阳性 CD34阳性 CD11B，CD15等(+/-) >3%的幼稚细胞表达
MPO。
AML-M2（急性粒细胞白血病部分成熟型）
• 此类型白血病细胞除了占优势的幼稚细胞外还存在已 明显分化的细胞群体，至少已分化至早幼粒细胞或粒 细胞水平。
(immunology， I ) ( cytogenetics，C )
WHO分型(2001)
（MICM）
(morphology，M ) (immunology， I ) ( cytogenetics，C)
(molecular biology, M)
L1型
急淋
急
性
（ALL）
白
L2型 L3型
细 胞
M0: 微分化型髓系白血病；
标本来源
（1）外周血 （2）骨髓穿刺液， （3）骨髓活检标本 （4）淋巴组织穿刺
样本保存
要 求： •室温条件(16℃ -28℃ )存放； • 如非液态标本，则要在标本中加入足量的等渗液 体（如 生理盐水或组织培养液）。
保存时间
1. 肝素抗凝的外周血和骨髓标本，存放时限为48～72小时； 2. EDTA抗凝标本，存放时限只有12 ～ 24小时，因为髓细胞
胞内染色 CD3\CD79a\MPO
可以确定白血病分CD7
B系：CD10、CD19、CD20 表面染色 髓系：CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33
非系列特异的抗体：CD34、HLA-DR 泛白细胞标志：CD45
进一步 细分
其它 CD4、CD8、CD61、CD56、CD38 必要时可以加用
132例急性白血病免疫分型结果分析
Ａｎ ｌ ｓ ｓ ｏ ｍ ｍ ｕ ｅ ｔ ｐ ｎｇ ｏ ｃ ｔ ｅ ｋ ｍ ｉ ａ ｙ ｉ ｆ ｉ ｎ ｙ ｉ ｆａ ｕ ｅ ｌ ｕ ｅ ａ
Ｈ ＵＡＮＧ ｎｇ ｑ ｎ， Ｘｉ － ｉ ＣＨ ＥＮ ｉ－ ｎｇ， Ｊｅ ｐｉ ＺＨＡＮＧ ｎｇ， ｔａｌ Ｙｏ ｅ
（ ｐ ｒｍｅ ｔ ｆ Ｈｅ ｔ ｌｇ Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｍａ ｏｏ ｙ，Ｓ ｕ ｈ ｓ Ｈｏｐ ｔｌ ｈ ｉｄ Ｍｉ ｔｒ ｄ ｃ ｌＵ ｉ ｅ ｓ ｙ，Ｃ ｏ ｇ ｉ ｇ ４ ０ ３ ） ｏ ｏ ｔ ｗｅｔ ｓ ｉ ，Ｔ ｅ ａ Ｔｈ ｒ ｌ ａ ｙ Ｍｅ ｉ ｎ ｖ ｒｉ ｉ ａ ｔ ｈ ｎ ｑｎ ０ ０ ８
［ ｓｒｃ］ Ｏｂｅ ｔ ｅ Ｔｏ ｅ ａｕ ｔ ｈ ｍｍｕ ｅ ｔ ｐｎ ｆａ ｕｅ ｌｕ ｅ ｉ． Ｍ ｅｈ ｄ Ａｂ ｔａ ｔ ｊｃｉ ｖ ｖ ｌａｅ ｔ ｅ ｉ ｎ ｙ ｉｇ ｏ ｃ ｔ ｅ ｋ ｍ ａ ｔｏ
Ｉ ｍｍｕ ｏ ｉｔ ｃ ｅ ｓｒ ｎ ｎ ｈｓｏ ｈ ｍｉｔｙ ａ ｄ
和 骨 髓 免 疫 组 织 化 学染 色检 查 方 法 。结 果
合 （ ４ ３ ％ ） 其 中 １ ７例 ＡＬ １．９ ， １ Ｌ不符 合 的 １ 例 ， ５例 ＡＭＬ 不符 合 的 ７例 。 结 论 白血 病 免 疫 学 分 型是 诊 断 急性 白血 病 ２ １ 不 可缺 少的检 查 手段 ， 对 急 性 白血 病 形 态 学 分型 的补 充和修 正 。对 Ｐ Ｘ ３ 的急 性 白血 病 的诊 断 ， 疫 分型 不 可 缺 少 。 是 Ｏ ＜ 免 【 键 词 】 Ｐ ） ３ 的 急性 白血 病 ； 免 疫 学 分 型 ； 形 态 学 分 型 关 （ Ｘ＜
我国急性白血病免疫分型的四色方案
我国急性⽩⾎病免疫分型的四⾊⽅案中国流式细胞术急性⽩⾎病免疫分型四⾊⽅案由于多参数流式细胞术(MFC)免疫分型具有客观、敏感、准确等特点，免疫表型已成为诊断急性⽩⾎病的重要依据之⼀。
因准确的诊断需要选择⼀定数量的抗体，涉及多个造⾎系列的抗原。
但⽬前国内甚⾄国际上没有规范化的⽅案可以借鉴。
⽽国内不同的医疗单位所⽤的抗体数量和种类均有较⼤的异质性，有些单位由于应⽤的抗体数量较少或抗体选择不当，影响对疾病的诊断、分期和预后的判断。
鉴于国内的实际情况，中国免疫学会⾎液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次的讨论，提出以CD45/SSC为基础的中国流式细胞术急性⽩⾎病免疫分型四⾊⽅案，供参考。
本⽅案不包括标本的采集、保存、制备、试剂和仪器的调整及急性⽩⾎病的诊断标准，这些对免疫分型同样重要，可参考相应的指南。
1．适应范围：1.1急性淋巴细胞⽩⾎病(ALL):z B系：早B前体-ALL(Pro-B), 普通-B-ALL(Common-B),前体B-ALL(Pre-B),及与Burkitt淋巴瘤进⾏鉴别z T系：早T前体-ALL (Pro-T), 前体T-ALL(Pre-T),⽪质-T-ALL和髓质-T-ALL.1.2急性早幼粒细胞⽩⾎病（APL）1.3急性髓细胞⽩⾎病（AML）z AML微分化型（AML-M0）z AML伴粒系和单核细胞分化型（AML-M1/2和AML-M4/5）z急性红⽩⾎病（AML-M6）z急性巨核细胞⽩⾎病（AML-M7）1.4前体树突细胞肿瘤1.5急性嗜碱性粒细胞和肥⼤细胞⽩⾎病1.6 混合表型⽩⾎病1.7 对上诉急性⽩⾎病治疗后检测MRD的标志进⾏筛查2.抗体的选择：根据检测的⽬的，需要检测不同的抗体：2.1 鉴别急性、慢性⽩⾎病:对于急性髓细胞⽩⾎病，可以根据CD45/SSC图型进⾏初步判断。
髓系⽩⾎病细胞CD45的表达较弱，往往位于正常淋巴细胞下⽅，且多数⽩⾎病细胞SSC较低（除去⼤颗粒APL 患者）。
急性白血病免疫分型课件
11
ＡＬＬ免疫分型 －－五分法：
• 五分法： Common型 型 B细胞型
未分化型 T细胞型 前B细胞
• 表型
SmIg+
DR/CD9/CD10+ 复杂
CD2/CD5+ CyIg
23
与AML预后有的抗原
6。Ly+AML： CR率低
占AML43%， CR46%，合并 CD34+38%，PgP+15%， （其中 CD2+AML7.7%，CD7+AML22%， CD19+13%）， Ly-AML：CR73%
7。CD7+AML： CR率低，
占AML22%， 合并CD34+75%， PgP+55%，（ M1：42%，M2：18%， M4：28%，M5：9%，M3：0%） CR35%
5
T细胞系抗原
T 细胞进入胸腺后：
（早） CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR-
（中）CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR-
（晚）CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+，
CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+ CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+
24
与AML预后有的抗原
8。CD19+AML： CR率较低，
占AML13%，合并CD34+67%，PgP+33%， （M2：16%，M5：25%），CR50%。
我国急性白血病免疫分型的四色方案
中国流式细胞术急性白血病免疫分型四色方案由于多参数流式细胞术(MFC)免疫分型具有客观、敏感、准确等特点，免疫表型已成为诊断急性白血病的重要依据之一。
因准确的诊断需要选择一定数量的抗体，涉及多个造血系列的抗原。
但目前国内甚至国际上没有规范化的方案可以借鉴。
而国内不同的医疗单位所用的抗体数量和种类均有较大的异质性，有些单位由于应用的抗体数量较少或抗体选择不当，影响对疾病的诊断、分期和预后的判断。
鉴于国内的实际情况，中国免疫学会血液免疫分会临床流式细胞术学组经过多次的讨论，提出以CD45/SSC为基础的中国流式细胞术急性白血病免疫分型四色方案，供参考。
本方案不包括标本的采集、保存、制备、试剂和仪器的调整及急性白血病的诊断标准，这些对免疫分型同样重要，可参考相应的指南。
1．适应范围：1.1急性淋巴细胞白血病(ALL):z B系：早B前体-ALL(Pro-B), 普通-B-ALL(Common-B),前体B-ALL(Pre-B),及与Burkitt淋巴瘤进行鉴别z T系：早T前体-ALL (Pro-T), 前体T-ALL(Pre-T),皮质-T-ALL和髓质-T-ALL.1.2急性早幼粒细胞白血病（APL）1.3急性髓细胞白血病（AML）z AML微分化型（AML-M0）z AML伴粒系和单核细胞分化型（AML-M1/2和AML-M4/5）z急性红白血病（AML-M6）z急性巨核细胞白血病（AML-M7）1.4前体树突细胞肿瘤1.5急性嗜碱性粒细胞和肥大细胞白血病1.6 混合表型白血病1.7 对上诉急性白血病治疗后检测MRD的标志进行筛查2.抗体的选择：根据检测的目的，需要检测不同的抗体：2.1 鉴别急性、慢性白血病:对于急性髓细胞白血病，可以根据CD45/SSC图型进行初步判断。
髓系白血病细胞CD45的表达较弱，往往位于正常淋巴细胞下方，且多数白血病细胞SSC较低（除去大颗粒APL患者）。
再根据CD34、CD117、CD38、HLA-DR、CD123的表达进行判断。
急性白血病MICM分型
急性白血病MICM分型：白血病MICM分型，是指形态学（morphology）、免疫学（immunology）、细胞遗传学（cytogenetics）、分子特征（molecular）分型形态学分型（FAB）分型1.急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）或急性髓系白血病（AML）：Ｍ１型：急性原粒细胞性白血病未分化型，骨髓中原粒细胞≥90％，POX染色阳性率＞3％。
Ｍ２型：急性原粒细胞性白血病部分分化型，以原幼粒细胞为主，早幼粒细胞＞3％，中、晚幼及成熟粒细胞＞10％为Ｍ２a型。
Ｍ３型：急怀多颗粒早幼粒细胞性白血病，以颗粒增多的异常早幼粒细胞为主，＞30％。
其又分为粗颗粒型（Ｍ３a）和细颗粒型（Ｍ３b）。
Ｍ4型：急性粒－单核细胞性白病，粒系及单核细胞均增生。
Ｍ５型：急性单核细胞性白血病，Ｍ5a为原单核细胞型，原单核＞80％；Ｍ5b为部分分化型，以幼单核细胞为主，原单核＜80％。
Ｍ6型：急性红白血病，原幼红细胞≥50％，非红系细胞中原始细胞＞30％。
Ｍ7型：急性巨核细胞性白血病，原巨核细胞＞30％，并经电镜、血小板过氧化物酶检查、血小板免疫标志物或血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa检查等证实。
Ｍ0型：近年确定，为髓系最早阶段的白血病，形态学上极少髓系分化，不能鉴别，必须用免疫标志物确定。
2.急性淋巴细胞性白血病(ALL)：L1：以小原淋巴细胞为主，大小较一致。
L2：以大原淋巴细胞为主，大小不一致。
L3：以大原淋巴细胞为主，胞质内含大量空泡。
3.急性白血病的主要化学染色特点：免疫学分型－基本免疫表型1.急性非淋巴细胞白血病（ANLL）FAB分型与免疫标志：2.急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)FAB分型与免疫学标志：3.急性非T淋巴细胞白血病(non-T-ALL)FAB分型与免疫学标志：4. 混合细胞性白血病：有极少部分病人白血病细胞为淋巴系和髓系细胞双克隆或同一细胞系免疫标志双表型，即混合细胞性白血病。
此型白血病用形态方法极难诊断，必须结合多参数流式细胞术分析才能确诊。
急性白血病系别判断的流式细胞免疫分型
三、急性白血病系别诊断标准
• EGIL诊断标准缺点： • （1）关于阳性定义，因为影响因素众多，有时存在歧义； • （2）对于某些覆盖率低、特异性高的标志，给予分值低或者未纳入，如CD64、CD14； • （3）对某些常见伴系表达标志予以极低分值，如CD7，未考虑荧光强度的差异； • （4）对于相对特异、在某系别易于伴发的标志，未考虑差异对待，如cCD79a、CD10
三、急性白血病系别诊断标准
• 鉴于几乎没有任何标志是绝对敏感和特异的，做全标志有助于降低误诊风险，因此 在系别筛查时如果出现系别标志表达过多或者过少，或者伴系表达标志的强度超过 标本中残留的正常细胞时，首先应该做全两个诊断标准涉及的相关系别标志，必要 时甚至需要增加CD371等新的髓系标志。
• 在此过程中可以选择一步法或者两步法。选择一步法的实验室，以目前常用3激光8 色机型为例，可供参考的5管法见表3；选择两步法的实验室，第一步进行系别筛查， 包括髓系MPO（或者CD33）和CD117，T系CD7和cCD3、B系CD19和CD22，根据 采用仪器型号不同可能有差异，4色方案可以参考2015年4色流式细胞术中国专家共 识，3激光8色推荐方案见表3。
三、急性白血病系别诊断标准
三、急性白血病系别诊断标准
• 注意几个标志的FCM检测： • （1）MPO：使用克隆号8E6、MPO-7的抗体需要小心，因为均有在B-ALL表达的
报道；阳性阈值虽然大多数沿用10%，但是建议结合荧光强度，并且不典型病例应 该做全其他髓系标志，并结合细胞化学和免疫组化MPO检测结果；FCM破膜处理 可能会使粒细胞的侧向角光散射（side scatter，SSC）降低，从而影响CD45/SSC设 原始细胞门的精确度，导致假阳性结果，正确的方法应结合原始细胞标志修订设门。
白血病MICM分型
白血病MICM分型白血病MICM分型白血病MICM分型，是指形态学（morphology）、免疫学（immunology）、细胞遗传学、（cytogenetics）分子特征（molecular）分型。
形态学分型（FAB）分型1.急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）或急性髓系白血病（AML）：Ｍ１型：急性原粒细胞性白血病未分化型，骨髓中原粒细胞≥90％，POX染色阳性率＞3％。
Ｍ２型：急性原粒细胞性白血病部分分化型，以原幼粒细胞为主，早幼粒细胞＞3％，中、晚幼及成熟粒细胞＞10％为Ｍ２a型。
Ｍ３型：急怀多颗粒早幼粒细胞性白血病，以颗粒增多的异常早幼粒细胞为主，＞30％。
其又分为粗颗粒型（Ｍ３a）和细颗粒型（Ｍ３b）。
Ｍ4型：急性粒－单核细胞性白病，粒系及单核细胞均增生。
Ｍ５型：急性单核细胞性白血病，Ｍ5a为原单核细胞型，原单核＞80％；Ｍ5b为部分分化型，以幼单核细胞为主，原单核＜80％。
Ｍ6型：急性红白血病，原幼红细胞≥50％，非红系细胞中原始细胞＞30％。
Ｍ7型：急性巨核细胞性白血病，原巨核细胞＞30％，并经电镜、血小板过氧化物酶检查、血小板免疫标志物或血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa检查等证实。
Ｍ0型：近年确定，为髓系最早阶段的白血病，形态学上极少髓系分化，不能鉴别，必须用免疫标志物确定。
2.急性淋巴细胞性白血病(ALL)：L1：以小原淋巴细胞为主，大小较一致。
L2：以大原淋巴细胞为主，大小不一致。
L3：以大原淋巴细胞为主，胞质内含大量空泡。
3.急性白血病的主要化学染色特点：免疫学分型－基本免疫表型1.急性非淋巴细胞白血病（ANLL）FAB分型与免疫标志：2.急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)FAB分型与免疫学标志：3.急性非T淋巴细胞白血病(non-T-ALL)FAB分型与免疫学标志：4. 混合细胞性白血病：有极少部分病人白血病细胞为淋巴系和髓系细胞双克隆或同一细胞系免疫标志双表型，即混合细胞性白血病。
白血病免疫分型的诊断标准
9．白血病免疫分型的诊断标准9．1 急性淋巴系白血病（ALL）9．1．1急性B淋巴系白血病（B-ALL）9．1．1．1MIC 标准:B 祖细胞ALL: CD19+,TdT+,CD10-,CIg-.sIg-Common ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg-,sIg-Pre-B- ALL: CD19+,TdT+,CD10+,cIg+,sIg-B-ALL : CD19+,TdT-,CD10-,cIg-,sIg+9．1．1．2 欧洲白血免疫学特征研究组标准:Pro-B-ALL: (BⅠ型):CD19+,CD22+Common ALL:(BⅡ型):CD19+,CD22+,CD10+Pre-B-ALL: (BⅢ型):CD19+,CD22+,CyIgM+，成熟B-ALL:(BⅣ型)：CD19+，CD22+，Kappa/Lambda+9．1．2急性T淋巴系白血病（T-ALL）9．1．2．1MIC 标准:T祖细胞型: CD2-T成熟细胞型: CD2+9．1．2．2 Reinheiz 标准:早期胸腺细胞Ⅰ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71+普通胸腺细胞Ⅱ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD71-,CD4+,CD8+,CD1+ 胸腺髓质细胞Ⅲ期:CD2+,CD5+,CD7+,CD38+,CD3+,CD4+,CD8+,CD1- 9．1．2．3欧洲白血免疫学特征研究组标准:Pro-ALL:(TⅠ型):CD3+,CD7+Pre-T-ALL(TⅡ型):CD3+,CD2+,CD5+,CD8+皮质-T-ALL(TⅢ型):CD3+,CD1a+成熟-T-ALL(TⅣ型):CD3+,CD1a+,anti-TCRα/β+ 或γ/δ+9．3．急性髓性白血病(AML)能亚型常表达抗原M0 CD11b,CD13或CD33M1 CD13 CD15 CD33 CD34 HLA-DRM2 CD11b CD13 CD15 CD33 •CD34 •HLA-•DR •CD56 CD19M3 CD11b CD13 CD15 CD33 CD34M4 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34M5 CD4 CD11b CD13 CD14 CD15 CD33 CD34M6 血型糖蛋白A CD13 CD33 CD34M7 CD41 CD61 CD13 CD33 CD34 因子Ⅷ相关抗原10．各型白血病及淋巴瘤免疫分型特点10．1 急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）10．1．1 M0：有低的(Side scatter ,SSC)和Forward scatter（FSC)。
急性白血病免疫分型
免疫学分型 与FAB AML分型的相关性
M1：CD34+、MPO+、DR+、TdT+、CD33+、CD13+、CD15-、CD11b-、 无 淋、红、巨核系抗原 M2：CD34+、CD33+、CD13+、DR+、CD15+ M3：CD33+、CD13+、DR-、CD34M4：CD34+ 、CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M5：CD34+ CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M6：血型糖蛋白+、CD34-，DR-、CD33-、CD13-、CD15M7：CD34+、CD33+、DR+、CD41+、CD42+、CD61+ M0：FAB：形态学为L2型，MPO、SBB组化阴性，淋系抗原阴性， CD33、CD11、CD15 及antiMPO单抗阳性。
与AML预后有的抗原
6。Ly+AML： CR率低 占AML43%， CR46%，合并CD34+38%， PgP+15%， （其中CD2+AML7.7%， CD7+AML22%，CD19+13%）， Ly-AML： CR73%
7。CD7+AML： CR率低， 占AML22%， 合并CD34+75%，PgP+55%， （ M1：42%，M2：18%，M4：28%，M5： 9%，M3：0%）CR35%
讲座
急性白血病
免 疫 学 分 型
急性白血病的免疫分型
MICM分型:
细胞形态学(包括细胞组化)为基础， 细胞免疫学(免疫表型)为主体， 细胞遗传学为辅助， 分子生物学为补充的原则。 免疫学分型对ALL更重要。 免疫学与FAB分型可不一致。
白血病免疫分型
白血病免疫分型白血病的免疫分型主要是根据造血干细胞再分化发育过程中，不同的阶段，细胞表面的分子标记也不同这一规律，反推出细胞是处于哪个阶段以及细胞属于哪个系别来源。
一般使用流式细胞仪去检测细胞上面表达的抗原，通过检测，我们可以判断出白血病细胞属于哪个系列来源以及处于分化的哪个阶段，最终来确诊白血病的类型。
此种白血病的分型即为免疫分型。
白血病免疫分型是诊断白血病的重要标准，对于白血病选择化疗药物以及估计预后是非常重要的。
白血病的免疫分型最早由欧洲提出来，它主要是根据造血干细胞再分化发育过程中，不同的阶段，细胞表面的分子标记也不同这一规律，反推出细胞是处于哪个阶段以及细胞属于哪个系别来源。
一般使用流式细胞仪去检测细胞上面表达的抗原，通过检测从而判断出，白血病细胞属于哪个系列来源以及处于分化的哪个阶段，最终来确诊白血病的类型。
此种白血病的分型即为免疫分型。
白血病免疫分型一般是对白血病细胞表面表达的分子进行相关检测。
1、白血病的诊断需要骨髓穿刺、骨髓液免疫分型、染色体和基因检查以进一步诊断，骨髓细胞学诊断白血病的准确性仅为70%左右。
如果同时增加白血病的免疫分型，白血病的明确诊断准确率可以接近100%。
2、白血病免疫分型是指对白血病细胞表面表达的分子进行相关检测，可以进一步区分急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病和慢性髓系白血病等类型。
同时还需要检查融合基因的染色体，以便对白血病诊断后的预后进行分层，并制定个性化的化疗方案。
建议平时多进行体育锻炼，增强自身免疫力。
急性白血病是造血干细胞的克隆性恶性疾病，发病时骨髓中异常的原始细胞大量增殖并浸润各种器官组织，正常造血受到抑制。
急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病，这两类还可分成多种亚型。
白血病的分型采用MIC分型，即形态学、免疫学和细胞遗传学结合的分型。
根据白血病细胞免疫学标志，不仅可将急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病进行区别，而且还可将T细胞和B细胞急性淋巴细胞白血病加以区别。
急性白血病的分型-精品医学课件
CD117。 ④巨和核系：CD41、CD42。 ⑤ RBC系：CD36、血型糖蛋白A、H。
⑥造血干祖C：CD34、CD90、CD38、Lin。
③伴t（1；19）的儿童型ALL预后较差。 ④伴 t（1；22）儿童型AML预后很差。
缺陷：
①报结果时间长、代价高。 ②分裂相少、造成分析困难。 ③不够特异，往往几种AL同时出现一种染色体异常。
大约40～70%的MDS患者有克隆性染色体畸变，其 对疾病的预后有着重要的价值。MDS国际预后计分系 统（IPSS）将核型和细胞减少的细胞系列的数目、原 始细胞百分比一起列为MDS预后的主要危险因素。根 据核型可将MDS分为3种不同的预后类型：①低危：正 常核型、-Y、5q-或20q-；②高危：-7/7q-、复杂异常 或核型演变；③中危：其它异常，如+8等。
融合基因
TTG1-TCR TAL1-TCR MYC-TCR MLL-AF4 BCR-ABL BCR-ABL BCR-ABL E2A-PBX1 TEL-AML1 MLL-ENL MYC-IgH MYC-Ig MYC-Ig
AML常见染色体移位及融合基因
FAB
核型
融合基因
M1
t(9;22)(q34;q11)
AML 遗 传 学 分 型
分 型
ALL
意义
1、克隆性染色体异常的检出有助于急性白血病 的诊断和分型
2、染色体异常可作为监测病情缓解或复发的重 要指标，最初核型异常完全消失提示病情缓解， 而重新出现则预示复发。
3、性染色体标志可用来验证异基因骨髓移植成 功与否或确定白血病的复发及其来源。
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天然T细胞 记忆T细胞
活化T细胞
表型 CD4 CD8 CD45RA CD45RO
CD25 CD54 CD58
天然T细胞 记忆T细胞 活化T细胞 + + -/+ + + +/++ + + +++
髓系抗原
根据髓系抗原表达大致分为7类： 1．粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原： CD13、CDw17、CD32、CD87、 CD88、CD89、CDw92、CD93、 CD156、CD157、CD163。 2．以粒细胞为主，也存在于单核细胞上的抗原： CD15、CD65。 3. 以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原： CD14、CD33。
T细胞系抗原 ---CD4+T细胞亚群
1．根据产生淋巴因子的差异分为： TH1—产生 IL-2、IFN-γ 、TNF-β TH2—产生 IL-4、IL-5、IL-6、IL-10 2．根据功能分为： TSI（suppressor inducer T-cell） —诱导TS功能，CD31+、CD45RA+ THI（helper inducer T-cell） —辅助B细胞产生抗体，CD31-、CD45RO+ 3．分为记忆T细胞、天然T细胞、活化T细胞
髓系抗原
3．基本只表达在单核细胞上的抗原： CD16、CD64、CD68、CD91、CDw136、CD155。 基本只表达在粒细胞上的抗原：CD16b、CD66。 4．造血干、祖细胞抗原：CD34、CD90。 5．其他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上， 髓系细胞上也有表达：CD4、CD7、CD9、CD10、 CD11b、CD11c、CD31、CD36、CD38 6．血小板相关抗原：CD36、CD41、CD42、CD61、CD62。 7.. 红细胞抗原： CD36、GPA
T细胞型
CD2/CD5+ 15-25% 20% 再次 最好
前B细胞型
CyIg 2--3% 0.5% 最次 最次
B细胞型
SmIg+ 2--3% 1.5% 最次 最次
预后：
儿童 成人
ＡＬＬ免疫分型 －－两类九型法:
非T亚型 I II III IV V VI HLA-DR + + + + + + CD9 + + + + + CD10 + + +/CD20 + +/+ μ链 + SmIg + 发生率% 5 15 30 50 <5 <2
ＡＬＬ免疫分型
从70年代开始试图进行免疫学分型：
1986年前五分法 1986年后两大类九分法
1994年四型21类法
ＡＬＬ免疫分型 －－五分法：
五分法：
表型 发生率：国外 国内
Common型
DR/CD9/CD10+ 60-70% 50% 最好 次之
未分化型
复杂 30% 30% 次之 再次
与AML预后有的抗原
6。Ly+AML： CR率低 占AML43%， CR46%，合并CD34+38%， PgP+15%， （其中CD2+AML7.7%， CD7+AML22%，CD19+13%）， Ly-AML： CR73%
7。CD7+AML： CR率低， 占AML22%， 合并CD34+75%，PgP+55%， （ M1：42%，M2：18%，M4：28%，M5： 9%，M3：0%）CR35%
进入血液及淋巴结
T细胞系抗原 ---外周血T细胞
血液中T细胞主要有以下亚型： 1.CD3+、CD4+、CD8—辅助性T细胞/诱导性T细胞，TH/TI 占T细胞总数的60-70% 2.CD3+、CD4-、CD8+ —抑制性T细胞/细胞毒性T细胞，TS/TC， 占T细胞总数的20-30% 3.CD3+、CD4+、CD8+ — 占T细胞总数的1-3% 4.CD3+、CD4-、CD8- — 占T细胞总数的1-10%
细胞系列抗原的表达 ---T细胞系抗原
T细胞发育的路径为： 骨髓（骨髓祖细胞→前胸腺细胞，亦称T祖细胞） --→胸腺（早→中→晚） --→外周血（成熟） 骨髓T祖细胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+ CD7出现最早并贯穿于T细胞发育全程
T细胞系抗原
T 细胞进入胸腺后： （早） CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR （中）CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR （晚）CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+， CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+ CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+
细胞系列抗原的表达 ---B细胞系抗原
HLA-DR意义 在白血病分型中，HLA-DR特异性较差， 除B系外，HLA-DR在急非淋、成人T细胞白 血病亦表达， 但如DR+，加上CD5-、CD7-则99%为B系。
90%B系ALL表达CD10。
与AL预后有的抗原
1。CD34：
强表达者预后差，特别是复发时 CD34增强是最有意义的免疫学表型 改变，CD34常与一些预后差的因素 共存时有相加的作用，与CD34与Pgp 或DR共存的患者，比单表达其中一 个抗原的患者完全缓解率明显降低。
急性白血病免疫学 系列分型的积分方案
分数 2 B系 M/cCD22 T系 M/cCD3 粒单系 MPO 巨核系 CD41 CD42 红系 血型蛋白A
RhD HbF CD36 ABH
cCD79a M/cTCRα /β Ccd13 CD61 cμ sIg M/cTCRγ /δ FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117
讲座
急性白血病
免 疫 学 分 型
急性白血病的免疫分型
MICM分型:
细胞形态学(包括细胞组化)为基础， 细胞免疫学(免疫表型)为主体， 细胞遗传学为辅助， 分子生物学为补充的原则。 免疫学分型对ALL更重要。 免疫学与FAB分型可不一致。
白血病免疫分型原理
白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的 性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前尚未发 现特异的白血病抗原。 但白血病细胞可能具有: 1.特异性的联合抗原; 2.某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上,而 正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见。 ——这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群CD （cluster designations）.
与AML预后有的抗原
8。CD19+AML： CR率较低， 占AML13%，合并CD34+67%，PgP+33%， （M2：16%，M5：25%），CR50%。 9。CD2+AML： CR率较高， 占AML18%，合并CD34+57%，PgP+14%， （M3：36%，M5：13%），CR71%。
与AML预后有的抗原
ALL免疫分型 --FAB的MIC分型
B-ALL CD19 TdT
+
DR
+
CD10
-
CyIg
-
SmIg
-
FAB亚型
L1,L2
早期前B + t(4;11) t(9;22) 普通-ALL + 6q近单倍体 t/del(12p) t(9;22) 前B-ALL + t(1;19) t(9;22) B-ALL + t(8;14) t(2;8) t(8;22) 6q-
免疫学分型 与FAB AML分型的相关性
M1：CD34+、MPO+、DR+、TdT+、CD33+、CD13+、CD15-、CD11b-、 无 淋、红、巨核系抗原 M2：CD34+、CD33+、CD13+、DR+、CD15+ M3：CD33+、CD13+、DR-、CD34M4：CD34+ 、CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M5：CD34+ CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M6：血型糖蛋白+、CD34-，DR-、CD33-、CD13-、CD15M7：CD34+、CD33+、DR+、CD41+、CD42+、CD61+ M0：FAB：形态学为L2型，MPO、SBB组化阴性，淋系抗原阴性， CD33、CD11、CD15 及antiMPO单抗阳性。
ＡＬＬ免疫分型 －－两类九型法
T亚型 CD7
I II III + + +
CD5
+ + +
CD2 CD3
+ + + +25% +
CD4
+90% + #
CD8
+90% + #
CD1a
+ -
发生率
55 25 20
#:二者之一阳性
ALL免疫分型 --四型21类法